3 尿雌三醇的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 化驗取材
3.4 尿雌三醇的測定原理
放射免疫測定法:雌三醇(E3)爲雌二醇(E2)和雌酮的代謝物。在妊娠時胎盤分泌大量雌三醇。
雌三醇是分子量較小的半抗原物質,必須與大分子載體蛋白如牛血清白蛋白結合在一起纔有免疫性,以後免疫兔得抗體。測定方法是用3H-雌三醇和樣品中的雌三醇對專一抗體上有限部位的競爭結合,反應達到平衡,用DCC把結合物與遊離激素分開,測量結合部分的同位數計量,對照標準曲線,就可計算樣品含量。
3.5 試劑
(1)雌三醇標準(層析純Sigma):工作液用重蒸無水乙醇配成100pg/100μl,密封,4℃保存。
(2)[2,4-3H]雌三醇SA=229.4×1010Bq/mmol,工作液用無水乙醇配成28000cpm/100μl置4℃保存。
(3)雌三醇抗體:人工合成雌三醇-C6-羥甲基牛血清白蛋白抗原免疫家兔製得,效價1∶4萬,對雌二醇和雌酮的交叉都<0.01%。
(4)其他試劑見雌酮測定。
3.6 操作方法
尿液(稀釋後)1ml加重蒸乙醚6ml,於有塞離心管中振搖2min離心1500r/min 5min,上層乙醚液分兩管每管2ml,45℃吹乾乙醚,加3H-雌三醇各50μl,45℃水浴用壓縮空氣,吹乾每管加1∶2萬稀釋抗體(每管0.2ml),搖後放置4℃冰箱過夜,第二天取出每管加5g/L明膠0.1ml,放4℃冰浴,每管加2.5g/L,DCC 0.5ml。放10min後。離心3000r/min 10min,吸上清液0.4ml於8ml閃爍液內,於漩渦混合器上混漩1min,隔4h閃爍計數。
標準加樣步驟:按表1進行。
3.7 正常值
妊娠 35周 31~97μmol/24h;
妊娠 40周 45~146μmol/24h。
3.8 化驗結果臨牀意義
降低:見於先兆性子癇、無腦兒、腦積水、過期妊娠、死胎、月經不調、營養不良、甲狀腺功能減低症等。妊娠期尿中的雌三醇排出正常,提示胎兒在宮內發展正常,如果排出量降低,提示胎兒生長發育遲緩,甚至危險或死亡。
3.9 附註
測定尿液雌三醇,留24h尿液,加10ml濃鹽酸防腐,記錄總尿量,取30~50ml送檢。