2 英文參考
Urine—Determination of mercury—Dithizone extraction spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 24—1996《尿中汞的雙硫腙萃取分光光度測定方法》(Urine—Determination of mercury—Dithizone extraction spectrophotometric method)由中華人民共和國衛生部,於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外,均爲分析純試劑。4.1 實驗用水:爲重蒸餾水或具有同等純度的去離子水。
4.2 硫酸,ρ20=1.84 g/mL。
4.6 雙硫腙洗除液:稱取10 g EDTA和10 g氫氧化鈉,加水溶解後稀釋至500 mL,並與500 mL氨水(ρ20=0.9 g/mL)混合。
4.7.1 雙硫腙的提純,稱取0.1 g雙硫腙溶於50 mL三氯甲烷中,置於250 mL分液漏斗中,用1+99氨水提取三次(每次約30 mL),雙硫腙進入氨水層。合併氨水溶液,用6 mol/L鹽酸調至酸性,此時雙硫腙析出,加入適量三氯甲烷使雙硫腙溶於三氯甲烷層中,用等量的蒸餾水洗滌二次,將雙硫腙三氯甲烷溶液放入棕色瓶中,加入15~20 mL 1+9硫酸,置冰箱中保存,可使用一個月。
4.7.2 使用時吸取提純的雙硫腙三氯甲烷液適量,用三氯甲烷稀釋至透光度爲60%(490 nm,10 mm比色杯),溶液應呈翠綠色。
4.8 汞標準溶液:準確稱取0.1354 g經乾燥器乾燥過的重結晶氯化汞(HgCl2),加0.5 mol/L硫酸使其溶解後,定量轉移至1000 mL容量瓶中,稀釋至刻度,此溶液1 mL = 0.1 mg汞。使用前,用0.5 mol/L硫酸稀釋成1 mL=10μg汞的標準應用液。
4.9 質控樣:用標準尿樣、加標的模擬尿、加標的正常人混合尿或接觸者混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 樣品處理
6.1.1 取尿50 mL放入錐形瓶中,同時用50 mL水作空白。
6.1.2 加30 mL飽和高錳酸鉀溶液(4.4)及5 mL硫酸(4.2),搖勻,加熱至沸(如發現尿樣中高錳酸鉀紫色褪去,可酌情補加適量的高錳酸鉀溶液).保持10 min,取下,冷卻.
8.2 6.2 標準曲線的繪製
6.2.1 取6個錐形瓶,按下表配製標準系列。
汞標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
汞標準應用液(4.8),mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 0.9 |
水,mL | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
汞含量,μg | 0 | 1.0 | 3.0 | 5.0 | 5.0 | 9.0 |
6.2.2 按6.1.2條操作.
6.2.3 冷卻至溫熱時,滴加鹽酸羥胺溶液(4.5),隨加隨振搖,至完全無色透明,再振搖5 min。放至室溫後,轉移到分液漏斗中,用水沖洗錐形瓶三次,洗液倒入分液漏斗至150 mL左右.
6.2.4 加入5 mL雙硫腙三氯甲烷溶液(4.7.2),在2 min內振搖200次,靜置分層後,將三氯甲烷層放入另一個已盛20 mL雙硫腙洗除液(4.6)的分液漏斗中,振搖50次,洗去過量的雙硫腙,靜置分層後將三氯甲烷層通過脫脂棉過濾於10 mL乾燥的具塞比色管中.
6.2.5 用10 mm比色杯,在490 nm波長下,以空白作參比,測定吸光度。以汞的含量爲橫座標,吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
8.3 6.3 樣品測定
尿樣按6.1條處理完後,按6.2.3~6.2.5條操作。測得吸光度後,在標準曲線上查得尿樣中汞的含量(μg).在測定前後以及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度的校正係數(k)。
7.2 按式(2)計算尿中汞的濃度:
式中:X——尿中汞的濃度,mg/L;
m——尿樣中汞的含量,μg;
V——分析時所取尿樣體積,mL。
10 8 說明
8.1 本法的檢測限,取50 mL尿樣時爲0.005 mg/L;測定範圍0.005~0.180 mg/L。本法精密度:CV=3.4%~8.1%(尿樣濃度0.01,0.05,0.10 mg/L,n=6),準確度:尿樣加標回收率爲92.3%~96.3%(尿汞濃度0.026,0.106,0.185 mg/L,n=6)。
8.3 在本實驗條件下,1.0mg Cu2+,50μg Ag+、Bi2+、Cd2+,0.1 mg I-,200 mg Br-,1.5 g Cl-無干擾,而0.3 mg I-,1 μg Pd2+則呈負干擾。
8.4 雙硫腙汞絡合物對光及溫度很敏感,室溫20℃以上,散射光在50 lx照度以上時,照度越大,褪色越快,但褪色後置於暗處5 min即可恢復,室溫20℃以下時,散射光無影響。