2 英文參考
Urine—Determination of δ-aminolevulinic acid—Spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 23—1996《尿中δ-氨基乙酰丙酸的分光光度測定方法》（Urine—Determination of δ-aminolevulinic acid—Spectrophotometric method）由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈，自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外，均爲分析純試劑。
4.2 冰乙酸ρ20=1.05 g/mL。
4.3 高氯酸，ρ20=1.67 g/mL。
4.4 無水乙酸鈉。
4.6 乙酰乙酸乙酯。
4.7 乙酸乙酯。
4.8 乙酸鹽緩衝液（pH=4.6）：於700 mL水中加入57 mL冰乙酸（4.2），82 g無水乙酸鈉（4.4），溶解後加水至1000 mL。
4.9 顯色劑：於30 mL冰乙酸（4.2）中加入1 g對-二甲氨基苯甲醛（4.5），5 mL高氯酸（4.3），5 mL水，溶解後用冰乙酸（4.2）稀釋至50 mL，混勻，存於冰箱中。
4.10 δ-ALA標準溶液：準確稱取0.01280g δ-ALA·HCl。用水溶解後，移入100 mL容量瓶中，稀釋至刻度，此溶液1 mL=0.10 mg δ-ALA。再用水稀釋成1mL =10μg δ-ALA的標準應用溶液。
4.11 質控樣：標準尿樣、加標的模擬尿、加標的正常人混合尿或接觸者的混合尿。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 樣品處理
6.1.1 分別取1 mL尿樣於2支10 mL具塞比色管中，各加1 mL水，2 mL乙酸鹽緩衝液（4.8），混勻，其一爲樣品管，另一爲尿樣空白管。6.1.2 向樣品管中加入0.4 mL乙酰乙酸乙酯（4.6），向空白中加入0.4 mL乙酸鹽緩衝液（4.8），充分混勻。6.2 標準曲線的繪製6.2.1 取6支10 mL具塞比色管，按下表配製標準管。
δ-ALA標準管的配製
管號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
δ-ALA標準應用溶液（4.10），mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 1.0 |
水，mL | 2.0 | 1.9 | 1.7 | 1.5 | 1.3 | 1.0 |
δ-ALA含量，μg | 0 | 1.0 | 3.0 | 5.0 | 7.0 | 10.0 |
6.2.2 向各管中加入2 mL乙酸鹽緩衝液（4.8），0.4 mL乙酰乙酸乙酯（4.6），混勻。
6.2.3 於沸水浴中加熱12 min．取出冷卻至室溫。
6.2.4 各加入4mL乙酸乙酯（4.7），加塞振搖100次，離心5 min，靜置分層。
6.2.5 各取2 mL乙酸乙酯提取液於另6支10 mL具塞比色管中，各加2 mL顯色劑（4.9），混勻，靜置10 min，在554 nm處，用10 mm比色杯，以零管爲參比測量吸光度。
6.2.6 以吸光度爲縱座標，δ-ALA含量爲橫座標，繪製標準曲線。
8.2 6.3 樣品測定
取6.1.2條製備的樣品溶液，按6.2.3～6.2.5條操作。測得吸光度後，將樣品管的吸光度減去尿空白管的吸光度，從標準曲線上查出樣品管中δ-ALA的含量。在測定前後及每次測定10個樣品後，測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式（1）計算尿樣換算成標準比重（1.020）下的濃度的校正係數（k）。
7.2 按式（2）計算尿中δ-ALA的濃度。
式中：
X——尿中δ-ALA的濃度，mg/L；
m——樣品管中δ-ALA含量，μg；
V——分析時所取尿樣的體積，mL。
10 8 說明
8.1 本法的檢測限爲0.30 mg/L（取0.5 mL尿樣）。測定範圍：0.30～10.00 mg/L。精密度：CV=1.2%～3.6%。準確度：鉛接觸者的尿樣加標回收率平均89.0%～95.7%（加標量：1.0，2.0，3.0，5.0 mg/L，n=6）。
8.2 接觸者的尿樣採集時間不限，採樣時不存在污染問題。尿樣4℃保存14 d相對偏差爲+5.6%。
8.3 煮沸時間應從比色管放進水浴後，水重新沸騰，開始計算時間，不得少於12 min。
8.4 尿中δ-ALA含量高或顏色較深時，可減少取樣量。
8.5 本法中紅色生成物在60 min內穩定。
8.6 乙酰乙酸乙酯如變黃色即不能使用。