鼠紅細胞花環形成試驗

1 拼音

shǔ hóng xì bāo huā huán xíng chéng shì yàn

2 英文參考

Mouse erythrocyte rosette formation test

3 概述

B淋巴細胞與抗體合成有關，是體液免疫反應的效應細胞。B細胞表面帶有膜表面免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體及補體受體等。它可與抗原抗體複合物的Fc段牢固結合。選用雞或羊紅細胞，用相應的抗紅細胞抗體致敏成EA複合物，B細胞的Fc受體能與EA結合形成花環，稱EA花環。如果EA複合物再加上補體，與B細胞的補體受體結合，則形成EAC花環。B細胞表面有鼠RBC受體，能與小鼠RBC結合，形成鼠紅細胞花環（M-RFC），主要結合於帶有IgM受體的B細胞上，形成M-RFC的多爲幼稚B細胞。本試驗臨牀上主要用於檢測B淋巴細胞的數量及判斷體液免疫水平。

4 檢查名稱

鼠紅細胞花環形成試驗

5 分類

免疫學檢查 > 細胞免疫測定

6 鼠紅細胞花環形成試驗的原理

人的B細胞有小鼠紅細胞受體，故能與小鼠紅細胞（MRBC）形成花環，測定MRBC花環形成細胞（MRFC），可作爲B細胞計數的一種方法。

7 試劑

（1）淋巴細胞分層液。

（2）Hank液：含20%小牛血清（用小鼠紅細胞吸收過）。

（3）2.0g/L美藍溶液。

（4）Alsever液。

（5）肝素溶液（500u/ml）。

（6）小鼠紅細胞懸液：選健康成年小鼠，每隻小鼠經心臟穿刺取血約0.5ml，加等量Alsever液，4℃保存待用，可保存1周。

8 操作方法

（1）取1ml上述小鼠紅細胞懸液，加3ml生理鹽水混勻，1500r/min，離心10min，共洗3次，最後用生理鹽水配成1%小鼠紅細胞懸液（約1.4×10⁸個細胞/ml）。

（2）取受檢者1.5ml肝素抗凝血，用淋巴細胞分層液分離淋巴細胞，用含20%小牛血清Hank液調整細胞濃度爲2×10⁷/ml。

（3）取淋巴細胞懸液0.1ml，加等量1%小鼠紅細胞懸液，混合後置37℃水浴10min，500r/min，離心10min，放4℃冰箱2～3h。

（4）用毛細管吸取0.05ml上清液，加1滴2g/L美藍溶液，輕輕旋轉使混勻，取1滴混合物放在玻片上，覆以蓋玻片，待細胞下沉後，用高倍鏡檢查。

9 正常值

結果：鏡下計數200個淋巴細胞，凡吸附3個或3個以上小鼠紅細胞的淋巴細胞爲B淋巴細胞，計算出小鼠細胞花環（ME花環）的百分率。正常人外周血ME花環百分率爲5%～10%。

10 化驗結果臨牀意義

慢性淋巴細胞白血病患者外周血液的ME花環百分率高達60%～80%，而無丙種球蛋白血癥、嚴重聯合型免疫缺陷等，ME花環百分率減低或缺如。

（1）升高：慢性淋巴細胞性白血病、系統性紅斑狼瘡。

（2）降低：急性非淋巴細胞性白血病、低丙球蛋白血癥、選擇性IgG、IgM、IgA缺乏症、淋巴瘤、腎病綜合徵、骨髓瘤、放射病、應用免疫抑制劑。

11 附註

（1）溫育時間：ME花環百分率隨溫育時間延長而逐漸增加，溫育1h，ME百分率爲7.4±3.1%，而溫育18h，增至18.3±3.8%，溫育72h後，花環數又逐漸降至3.4±7.1%。

（2）培養液：以用Tc199培養液最爲適宜，其結果及重複性均好。用Hepes緩衝的RPMl 1640培養液洗滌和重懸淋巴細胞和紅細胞，導致細胞趨向聚集，而形成大塊細胞，從而產生不可靠的結果。

（3）紅細胞與淋巴細胞的最適比例約爲35∶1，比例＞60∶1，或比例＜25∶1時，ME花環數可減低。

（4）保存MRBC的培養液：在Alsever液中，MRBC 4℃保存1周仍可產生穩定的花環數，而在PBS，生理鹽水或Tc199培養液中保存的MRBC，隨着保存時間延長，花環數逐漸下降，保存72h後，只能看到小數花環或無花環形成細胞。

12 相關疾病

慢性淋巴細胞白血病