3 概述
流行性乙型腦炎(簡稱乙腦)是由乙型腦炎病毒引起,該病毒產生的血凝素能使雛雞、鴿、鵝和綿羊等紅細胞凝集。成熟的乙腦病毒有V1、V2和V3三個結構蛋白,用相應的單克隆抗體證明,V3有4個與免疫相關的抗原點,其一爲中和抗體決定簇,另兩個爲組和亞組特異性抗原決定簇,還有一個既有血凝也有中和抗原決定簇。此外,乙腦病毒還有型特異性的可溶性補體結合抗原。
乙腦患者受上述病毒抗原的激發,病後血中可產生血凝抑制抗體,中和抗體和補體結合抗體,據此檢測患者上述三種抗體可作爲該病的血清學診斷指標,通常用免疫測定或免疫熒光技術檢測特異性IgM抗體,具有早期診斷意義。
4 檢查名稱
9 操作方法
(1)綿羊紅細胞懸液,溶血素和補體均應先行滴定,各配成最適工作濃度。
(2)抗原滴定,用倍比稀釋的抗原和抗血清作方盤滴定,凡能與最高稀釋度血清結合而出現完全不溶血的最高稀釋度抗原量爲1U,如1∶16爲1U抗原,實驗用2U即1∶8稀釋抗原。
(3)正式試驗:受檢血清經56℃30min滅活後,先作1∶4或1∶8稀釋,以免高濃度血清導致非特異性結合,繼作倍比稀釋,按補體結合試驗常規操作。凡不溶血的爲陽性,溶血爲陰性,對照管結果應符合要求。結果計算是以呈現陽性的受檢血清最高稀釋度爲該受檢血清的補體結合抗體效價。
11 化驗結果臨牀意義
(1)乙腦患者補體結合抗體一般出現較晚,據報道發病1~2w,該抗體陽性者僅12.8%,僅維持半年,凡受檢者該抗體陽性必然是新近感染,故單份恢復期血清大於或等於1∶16即有診斷意義。
(2)一般雙份血清檢測所得抗體效價有4倍以上增長即有診斷價值。如雙份血清的抗體效價均爲1∶8或更高,而恢復期血清並無4倍以上增長,則須分析是否急性期標本採取時間過晚,故需重行採集恢復期血複查,籍以判定抗體效價與本次感染的關係。如仍有疑問則需用中和試驗加以對比覈實。