抗-HEV

血清學檢查 病毒的血清學檢查 化驗及醫學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 概述

戊型肝炎病毒(hepatitis E Virus,HEV)爲經腸道傳播引起戊型肝炎的病原體,呈球形,表面無囊膜,二十面體立體對稱,表面有突起結構,內部核酸爲單股RNA,屬嵌杯狀病毒科的嗜肝RNA病毒屬。HEV有表面抗原HEVAg,可刺激機體產生抗體

2 別名

抗-HEV

3 抗戊型肝炎病毒抗體醫學檢查

3.1 檢查名稱

抗戊型肝炎病毒抗體

3.2 分類

血清檢查 > 病毒血清檢查

3.3 化驗取材

血液

3.4 抗戊型肝炎病毒抗體的測定原理

夾心法。包被板上的戊型肝炎抗原(HEVAg)與待測血清中的抗-HEV結合後,再與酶標記抗-人IgG(HRP-抗-人IgG)結合,形成 HEVAg·抗-HEV·HRP-抗-人IgG複合物,經與底物作用後呈現橘黃色反應陽性。待測血清中無抗-HEV時則不呈色爲陰性

3.5 試劑

(1)包被板:用3塊板分別包被HEVAg A、B和陰性對照蛋白。

(2)稀釋液:Tris緩衝液(含熱處理的正常羊血清、牛血白蛋白穩定劑)。

(3)酶結合物:HRP-抗-人IgG,用時以稀釋液作1∶1000稀釋。

(4)底物液:1片OPD加入5ml底物緩衝液溶解混勻。爲無色液體。

(5)洗滌液:0.01mol/L PBST緩衝液(一塊板用300ml)。

(6)終止液:1mol/L H2SO4溶液

3.6 操作方法

(1)每個待檢血清同時做3塊板。

(2)加樣品

①3塊板上的每孔加200μl稀釋液。

②各板上的A1B1孔加10μl稀釋液爲空白,C1D1孔加10μl陰性對照血清,E1F1孔加10μl陽性對照血清,G孔以後加10μl待測血清(1∶21)混勻,封板,置37℃溫箱中30min。

(3)洗滌板:用PBST洗滌液洗板6次,拍幹。

(4)加酶結合物:每孔加HRP-抗-人IgG稀釋液100μl,封板,置37℃溫箱中30min。

(5)洗滌板:同3。

(6)加底物顯色:每孔加新鮮配製的底物液100μl,封板,置室溫暗處15min,每孔加終止液50μl。

(7)比色:用酶聯檢測儀波長爲492nm測每孔A值。

3.7 正常值

A值<0.3,陰性

3.8 化驗結果臨牀意義

戊型肝炎(hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的病毒性肝炎抗-HEV是HEV感染人體後產生的特異性抗體,在急性期時增高,恢復期時下降。在急性肝炎患者中的檢出率約爲30%左右(北京地區),與甲型肝炎近似。抗-HEV可做爲HEV感染的早期特異性斷指標。

3.9 附註

(1)嚴格遵守操作規程。

(2)質量控制空白孔A值<0.2,陰性對照A值>0和<0.2(減去空白),陽性對照A值>0.8(減去空白)。

(3)未用完的包被板放入含有乾燥劑的原袋中密閉保存

(4)加樣品和試劑後勿在水浴中保溫。

(5)底物片和底物液勿放在強光下,用非金屬的小鑷子取OPD片。

(6)其它同ELISA法

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