化妝品中苯並[а]芘的檢測方法

1 拼音

huà zhuāng pǐn zhōng běn bìng [а]pí de jiǎn cè fāng fǎ

《化妝品中苯並[а]芘的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發佈。

化妝品中苯並[а]芘的檢測方法

2 1 範圍

本方法規定了用高效液相色譜-熒光檢測器法測定化妝品中苯並[а]芘的方法。

本方法適用於霜、露、乳、油、液類化妝品中苯並[а]芘的測定。

本方法的檢出限爲0.5 pg，定量下限爲1.6 pg，取樣量爲0.5 g時，檢出濃度爲0.5 μg/kg，最低定量濃度爲1.6 μg/kg。

3 2 方法原理

以甲醇超聲提取化妝品中苯並[а]芘，用高效液相色譜儀進行分析，以保留時間定性，以峯面積進行定量，氣相色譜-質譜確認。

4 3 試劑和材料

3.1  甲醇：色譜純。

3.2  苯並[а]芘標準溶液：國家標準物質，20 μg/mL。

3.3  0.45 μm濾膜。

5 4 儀器

4.1  高效液相色譜儀，配熒光檢測器。

4.2  超聲波清洗器。

4.3  離心機。

4.4  氣相色譜-質譜聯用儀。

6 5 分析步驟

5.1 樣品預處理

稱取化妝品試樣0.5 g（精確到0.001 g），置於25mL具塞刻度管中，加入9 mL甲醇，渦旋混勻，超聲提取30min，每隔10 min取出用力振搖15秒，冷至室溫，加甲醇至10 mL，混勻。5000 rpm離心5min，取上層清液過0.45 μm濾膜後備用。

5.2 色譜參考條件

色譜柱：C₁₈柱，150× 3.9 mm，5 μm，或相當者；

流動相：甲醇+水=90+10；

流速：1.0 mL/min；

柱溫：35 ℃

進樣量：20 μL

檢測器：熒光檢測器，激發波長370 nm，發射波長：406 nm。

5.3 校準曲線的製備

用甲醇將（3.2）苯並[а]芘標準溶液稀釋成濃度爲0.08，0.16，0.8，4.0，16.0 ng/mL的標準系列，各取20 μL注入高效液相色譜儀，記錄各次色譜峯面積，並繪製峯面積——濃度曲線。

5.4 測定

取20 μL待測溶液注入高效液相色譜儀，根據峯的保留時間定性，根據峯面積從校準曲線上查出待測溶液中苯並[а]芘的濃度。

7 6 計算

式中：w——樣品中苯並[а]芘含量，單位爲微克每千克（μg/kg）；

ρ——樣品待測液中苯並[а]芘的含量，單位爲納克每毫升（ng/mL）；

V——樣品待測液的定容體積，單位爲毫升（mL）；

m——樣品的質量，單位爲克（g）。

8 7 色譜圖

苯並[а]芘標準溶液的色譜圖

9 8 陽性結果的確認

測定過程中，如果有陽性結果，可用氣相色譜-質譜法進一步確證。

氣相色譜參考條件：

色譜柱：HP-5MS 30 m×0.25 mm×0.25μm；柱箱溫度：80 ℃ 保持1 min，以15 ℃/min上升到230 ℃，再以4 ℃/min上升到310 ℃，保持1 min；進樣口溫度：280 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；不分流進樣；載氣：氦氣，流速1.0 mL/min；進樣量：1 μL。

質譜參考條件：

離子源：EI源；電離能量：70 eV；選擇離子監測（SIM）模式，監測離子：252，126，113；溶劑延遲時間：5 min。

質譜鑑定的允差見表1。

表1  苯並[а]芘相對離子丰度比的最大允許偏差

氣相色譜-質譜法的檢出限爲0.3 ng/mL。實際樣品溶液的苯並[а]芘濃度如果低於此檢出限，則需將樣品溶液濃縮至合適濃度後進行確證分析。

10 9 精密度

在重複性條件下獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不大於這兩次測定值的算術平均值的10%。