發熱伴血小板減少綜合徵實驗室檢測方案

技術方案 法規文件

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 註解

發熱伴血小板減少綜合徵實驗室檢測方案

爲保證及時、科學地採集、運送發熱血小板減少綜合徵病例(包括疑似病例標本),規範發熱血小板減少綜合徵的實驗室檢測程序,提高檢測質量,特制定本方案。

2 一、樣本採集對象

發熱血小板減少綜合徵病例(包括疑似病例,以下同)。

3 二、標本種類及採集方法

(一)血清標本。用無菌真空管,採集患者急性期(發病2周內)和恢復期(發病4周左右)非抗凝血5ml,及時分離血清,分裝保存於帶螺旋蓋、內有墊圈的凍存管內,標記清楚後將血清保存於-70℃冰箱(一週內可保存在-20℃冰箱),用於病毒特異性核酸抗原抗體檢測病原體分離

編碼規則:“年份(2位)-鄉鎮級地區編碼(8位)-流水號(3位)”。地區編碼可通過中國疾病預防控制中心網絡直報系統查詢。如2010年雲南省昆明市五華區沙朗鄉的第12位調查者的編碼爲“10-53010220-012”。該調查者的急性期和恢復期血清分別在編號首位增加“J”和“H”。如上例調查者的急性期血清編號爲J10-53010220-012,恢復期血清編號爲H10-53010220-012。

(二)必要時,可採集病例的活檢或屍檢標本進行實驗室檢測。具體方法參照病理實驗室相關要求和衛生部《傳染病人或疑似傳染病人屍體解剖查驗規定》。

4 三、實驗室檢測和診斷

(一)病原學。1.核酸檢測:採用RT-PCR 和Real-time PCR病毒核酸診斷方法進行檢測和診斷,患者血清中擴增到特異性核酸,可確診新型布尼亞病毒感染

2.病毒分離:用於病毒分離患者急性期血清標本經處理後,可採用Vero、Vero E6等細胞或其他敏感細胞進行,用Real-time PCR病毒核酸診斷方法、ELISA、免疫熒光方法確定。患者血清分離病毒可確診。

(二)血清學。1. 血清特異性IgG抗體:採用ELISA、免疫熒光(IFA)抗體測定、中和試驗等方法檢測,新型布尼亞病毒IgG抗體陽轉或恢復期滴度較急性期4倍以上增高者,可確認爲新近感染

2.血清特異性抗體:可採用雙抗原夾心ELISA法檢測血清病特異性抗體陽性表明曾受到病毒感染

5 四、生物安全

生物安全按照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關規定要求,做好生物安全工作。

(一)實驗室生物安全。加強實驗室生物安全,應當在生物安全Ⅱ級及以上的實驗室開展標本血清學、核酸檢測病毒分離工作。

(二)標本採集個人防護。採集病人標本時可進行一般性防護(穿戴口罩、手套和長袖工作服)。野外採集標本時,應穿着顏色明亮的防護服,並將衣袖或褲管口紮緊以防蜱叮咬人體。一旦發現有蜱附着體表,應當用鑷子等工具夾取,不要用手直接摘除。野外作業活動的人員可使用驅避劑噴塗皮膚

(三)在診療及標本的採集、包裝和實驗室檢測等過程中所產生的醫療廢物,應當按照《醫療廢物管理條例》和《醫療衛生機構醫療廢物管理辦法》等相關規定處理。

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