3 二、標本種類及採集方法
(一)血清標本。用無菌真空管,採集患者急性期(發病2周內)和恢復期(發病4周左右)非抗凝血5ml,及時分離血清,分裝保存於帶螺旋蓋、內有墊圈的凍存管內,標記清楚後將血清保存於-70℃冰箱(一週內可保存在-20℃冰箱),用於病毒特異性核酸、抗原和抗體檢測及病原體分離。
編碼規則:“年份(2位)-鄉鎮級地區編碼(8位)-流水號(3位)”。地區編碼可通過中國疾病預防控制中心網絡直報系統查詢。如2010年雲南省昆明市五華區沙朗鄉的第12位調查者的編碼爲“10-53010220-012”。該調查者的急性期和恢復期血清分別在編號首位增加“J”和“H”。如上例調查者的急性期血清編號爲J10-53010220-012,恢復期血清編號爲H10-53010220-012。
(二)必要時,可採集病例的活檢或屍檢標本進行實驗室檢測。具體方法參照病理實驗室相關要求和衛生部《傳染病人或疑似傳染病人屍體解剖查驗規定》。
4 三、實驗室檢測和診斷
(一)病原學。1.核酸檢測:採用RT-PCR 和Real-time PCR病毒核酸診斷方法進行檢測和診斷,患者血清中擴增到特異性核酸,可確診新型布尼亞病毒感染。
2.病毒分離:用於病毒分離的患者急性期血清標本經處理後,可採用Vero、Vero E6等細胞或其他敏感細胞進行,用Real-time PCR病毒核酸診斷方法、ELISA、免疫熒光等方法確定。患者血清中分離到病毒可確診。
(二)血清學。1. 血清特異性IgG抗體:採用ELISA、免疫熒光(IFA)抗體測定、中和試驗等方法檢測,新型布尼亞病毒IgG抗體陽轉或恢復期滴度較急性期4倍以上增高者,可確認爲新近感染。
5 四、生物安全
生物安全按照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關規定要求,做好生物安全工作。
(一)實驗室生物安全。加強實驗室生物安全,應當在生物安全Ⅱ級及以上的實驗室開展標本的血清學、核酸檢測和病毒分離工作。
(二)標本採集個人防護。採集病人標本時可進行一般性防護(穿戴口罩、手套和長袖工作服)。野外採集標本時,應穿着顏色明亮的防護服,並將衣袖或褲管口紮緊以防蜱叮咬人體。一旦發現有蜱附着體表,應當用鑷子等工具夾取,不要用手直接摘除。野外作業或活動的人員可使用驅避劑噴塗皮膚。
(三)在診療及標本的採集、包裝和實驗室檢測等過程中所產生的醫療廢物,應當按照《醫療廢物管理條例》和《醫療衛生機構醫療廢物管理辦法》等相關規定處理。