4 B因子溶血活性的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 B因子溶血活性的測定原理
未致敏的家兔紅細胞(RE)(有類似酵母多糖或菊糖對人補體的作用)可在含Mg2+的EGTA緩衝液稀釋的人血清中激活AP,引起溶血。溶血的程度可反映AP活性。
4.4 試劑
(1)0.1mol/L EGTA:取NaOH3.5g,溶於蒸餾水85ml中,加入EGTA(乙二醇雙乙胺醚四乙酸)19g使之溶解,補足蒸餾水至500ml。
(2)巴比妥緩衝原液:NaCl 121.25g,巴比妥1.44g,巴比妥鈉0.94g,蒸餾水補足500ml。
(3)稀釋液:0.1mol/L EGTA80ml,巴比妥緩衝原液180ml,MgCl2·6H2O0.41g,蒸餾水補至1000ml,以1mol/L NaOH調pH至7.5。
(4)0.5%RE懸液:取保存於Alsever液的RE以生理鹽水洗2次,稀釋液洗1次後配成0.5%懸液(RE3×108/ml)。
(5)被測血清:被測血清分離後立即置-20℃保存,用前以稀釋液1∶4稀釋,37℃水浴10min。
(6)50%溶血標準管:取0.5%RE0.2ml,加入蒸餾水0.8ml。
4.5 操作方法
按表1加入各反應液。
4.6 正常值
124名正常人AP-CH50(±SD)爲21.7±2.7U/ml。
4.7 化驗結果臨牀意義
補體旁路途徑活化,參與的成分爲補體C3、C5~C9、P因子、D因子、B因子等,其中任何成分的異常都可引起旁路途徑溶血活性的改變。AP-CH50溶血活性顯著增高見於某些自身免疫病、腎病綜合徵、慢性腎炎、腫瘤、感染等,降低則見於肝硬化、慢活肝、急性腎炎等病症。
4.8 附註
(1)血清中補體不穩定容易破壞,4℃僅能放置1d,0℃可放5d,-20℃可放置1個月。
(2)稀釋液中Mg2+濃度過高過低都會影響AP-CH50活性。
(3)稀釋液的pH:最適宜的pH爲7.2~7.5,否則影響結果。
(4)不同個體的RE對測定結果有影響。