化妝品中過氧化氫的檢測方法

1 拼音

huà zhuāng pǐn zhōng guò yǎng huà qīng de jiǎn cè fāng fǎ

《化妝品中過氧化氫的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發佈。

化妝品中過氧化氫的檢測方法

2 1  適用範圍

本方法規定了採用高效液相色譜法測定化妝品中過氧化氫（CAS：7722-84-1）含量的方法。

本方法適用於染髮劑、膏狀面膜中過氧化氫含量的測定。

3 2  方法提要

試樣採用水浸提，部分上清液與三苯基膦衍生反應，衍生溶液經濾膜過濾，用液相色譜分離，紫外檢測器檢測，峯面積定量，以標準曲線法計算含量，得到樣品中過氧化氫的含量。本方法對過氧化氫的檢出限爲0.0012μg，定量下限爲0.004μg。若取0.2g樣品，過氧化氫的最低檢出濃度爲60μg /g，最低定量濃度爲200μg /g 。

4 3  試劑和溶液

除非另有說明，所用試劑均爲分析純，水爲一級實驗用水。

3.1  乙腈，色譜純。

3.2  三苯基膦溶液，稱取三苯基膦1.3g，用乙腈（3.1）溶解，定容至25mL，濃度爲0.2mol/L，現用現配。

3.3  氧化三苯基膦溶液，稱取氧化三苯基膦0.0003g，用乙腈（3.1）溶解，定容至100mL，濃度爲0.00001mol/L。

3.4  過氧化氫，濃度爲3%，使用前需要進行標定，標定方法見附錄。

3.5  過氧化氫標準儲備液：稱取標定過的過氧化氫對照品（3.4）1.5g，精確到0.0001g，置於25 mL棕色容量瓶中，用水定容，搖勻，配製成質量濃度爲1.8mg/mL的標準儲備溶液。

3.6  過氧化氫標準工作液：配製濃度分別爲3.6mg/L、9.0 mg/L、18mg/L、36mg/L、54 mg/L、90 mg/L、180 mg/L的標準工作液。

5 4  儀器和設備

4.1  高效液相色譜儀：具有二極管陣列檢測器。

4.2  渦旋振盪器。

4.3  分析天平：感量0.0001g。

4.4  分析天平：感量0.001g。

6 5  分析步驟

5.1  樣液的製備

5.1.1  樣品前處理

稱取樣品約0.05g～0.2g（精確至0.001g），含過氧化氫3%以下稱取0.2g，含過氧化氫3%～6%稱取0.1g，含過氧化氫6%～12%稱取0.05g，置於100mL容量瓶中，加入約50 mL水，振搖至樣品完全溶解，用水定容，搖勻備用。面膜等半固體樣品可以稱取樣品於50mL燒杯，加入約20mL，用玻璃棒將樣品攪碎，用水轉移至100mL容量瓶中，定容，搖勻備用。

5.1.2  衍生化反應

分別移取過氧化氫標準工作液（3.6）和樣液（5.1.1）各1mL於10mL棕色容量瓶中，加入1mL三苯基膦乙腈溶液（3.2），振搖，繼續加入5mL乙腈（3.1），振搖，用水定容，搖勻。置於暗處室溫反應30min。

5.2  測定

5.2.1 色譜參考條件

色譜柱：C₁₈色譜柱，4.6mm ×250 mm，5 mm；

流動相：乙腈+水（60+40）（體積比）；

流速：1.0mL/min；

檢測波長：225nm；

進樣量：10mL。

5.2.2  標準曲線的繪製

吸取10mL氧化三苯基膦溶液（3.3），注入高效液相色譜儀，確定氧化三苯基膦的保留時間。衍生化反應結束後，立即開始色譜分析，分別吸取10mL過氧化氫標準工作液衍生液（5.1.2）注入高效液相色譜儀，2h內完成上機分析。在上述色譜條件下測定其峯面積，記錄氧化三苯基膦的峯面積，以標準溶液濃度爲橫座標、氧化三苯基膦的峯面積爲縱座標，繪製標準工作曲線。

5.2.3  樣品中過氧化氫的測定

衍生化反應結束後，立即開始色譜分析，吸取10mL樣液（5.1.2）注入高效液相色譜儀，2h內完成上機分析。在上述色譜條件下測定其峯面積。利用迴歸方程式計算樣液中過氧化氫的濃度。

5.3  平行實驗

按以上步驟操作，對同一樣品獨立進行測定獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。

7 6  結果計算

式中：w—— 化妝品中過氧化氫的含量，%；

r——由迴歸方程式計算待測樣液（5.1.3）中過氧化氫的質量濃度，mg/ L；

V——樣品定容體積，mL；

D—— 樣品稀釋倍數；

m—— 樣品取樣量，g。

8 7  回收率與精密度

方法的回收率爲99.9%～107.3%，相對標準偏差小於7%（n=6）。

9 8  色譜圖

圖1  標準工作液色譜圖

（1.氧化三苯基膦；2.三苯基膦）

10 附錄：過氧化氫含量的標定方法

10.1 1  範圍

本附錄規定了過氧化氫含量的標定方法。

10.2 2  過氧化氫含量的測定原理

H₂O₂分子中含有一個過氧鍵—O—O—，既可在一定條件下作爲氧化劑，又可在一定條件下作爲還原劑。在稀H₂SO₄介質中，室溫條件下KMnO₄可將H₂O₂定量氧化，反應方程式爲：

5H₂O₂+ 2MnO₄^-+6H⁺=2Mn²⁺+ 5O₂+ 8H₂O

該反應開始時速度較慢，滴入第一滴後溶液不易褪色，隨着反應的進行，生成的Mn²⁺對反應有催化作用，反應速度加快，故能順利滴定，當滴定到溶液中有稍過量的MnO₄^-後，溶液出現微紅色顯示終點，通過消耗KMnO₄溶液的濃度和體積，可以計算過氧化氫的含量。

10.3 3  試劑和溶液

3.1  硫酸溶液，取10mL濃硫酸緩慢加入150mL水中，搖勻，備用。

3.2  高錳酸鉀標準滴定溶液，0.1mol/L。

3.2.1  高錳酸鉀標準溶液的配製

稱量1.0g固體KMnO₄，置於大燒杯中，加水至300mL（由於要煮沸使水蒸發，可適當多加些水），煮沸約1小時，靜置冷卻後用微孔玻璃漏斗或玻璃棉漏斗過濾，濾液裝入棕色細口瓶中，貼上標籤，一週後標定。保存備用。

3.2.2  高錳酸鉀標準溶液的標定

準確稱取0.13～0.16g基準物質Na₂C₂O₄三份，分別置於250mL的錐形瓶中，加約30mL水和3mol·L^-1H₂SO₄10mL，蓋上表面皿，在石棉鐵絲網上慢慢加熱到70～80℃（剛開始冒蒸氣的溫度），趁熱用高錳酸鉀溶液滴定。開始滴定時反應速度慢，待溶液中產生了Mn²⁺後，滴定速度可適當加快，直到溶液呈現微紅色並持續半分鐘不褪色即終點。根據Na₂C₂O₄的質量和消耗KMnO₄溶液的體積計算KMnO₄濃度。用同樣方法滴定其他二份Na₂C₂O₄溶液，相對平均偏差應在0.2％以內。

10.4 4  儀器和設備

4.1  酸式滴定管，50mL。

10.5 5  實驗步驟

稱取 0.3g過氧化氫，精確值0.0001g，置於250mL錐形瓶中，加入20～30mL水，振搖，加入100mLH₂SO₄溶液，振搖，用KMnO₄標準溶液[c（1/5KMnO₄）=0.1mol/L]滴定至微紅色，半分鐘內不退色爲終點。記錄消耗KMnO₄溶液的體積，平行測定3次，極差應小於0.1mL，根據KMnO₄標準溶液濃度和消耗的體積，計算過氧化氫的含量。

10.6 6  計算公式

過氧化氫質量分數按下式計算：

式中：w—— 過氧化氫的質量分數，%；

V—— 高錳酸鉀標準滴定溶液的體積，mL；

c——高錳酸鉀標準滴定溶液的濃度，mol/L；

17.01——過氧化氫的摩爾質量[M（1/2H₂O₂）]，g/mol；

m—— 樣品取樣量，g；