2 英文參考
Urine—Determination of chromium—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 37—1996《尿中鉻的石墨爐原子吸收光譜測定方法》(Urine—Determination of chromium—Graphite furnace atomic absorption spectrometric method)由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
4.2 硝酸,ρ20=1.42 g/mL,優級純,必要時重蒸餾。
4.3 鉻標準溶液:準確稱取2.8288 g的重鉻酸鉀(分析純,預先在120℃乾燥過的),用水(4.1)溶解,配成1 mgCr6+/mL的儲備液。臨用前,用水(4.1)稀釋成1μgCr6+/mL的標準應用溶液。
4.4 質控樣:用標準尿樣、接觸者混合尿樣或加標的正常人混合尿樣、加標的模擬尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 儀器操作條件
波長 357.9 nm
乾燥 17A 60s(階梯)
狹縫 0.2 nm
灰化 100A 40 s(階梯)
鉻燈電流 20 mA
原子化 230A 4s(階梯)
進樣量 20μL
清洗 300A
氬氣 1 L/min(原子化停氣)
8.2 6.2 空白試驗
用水代替尿樣按9+1的比例加入硝酸(4.2)。
8.3 6.3 樣品處理
將尿樣(5)由冰箱中取出,放至室溫,徹底振盪混勻。
8.4 6.4 標準曲線(標準加入法)
取4支試管(3.4),按下表配製標準管。
鉻標準管的製備
管 號 | 1 | 2 | 3 | 4 |
鉻標準應用液(4.3),mL | 0 | 0.01 | 0.02 | 0.03 |
水(4.1),mL | 0.1 | 0.09 | 0.08 | 0.07 |
尿樣(6.3),mL | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
鉻含量,μg/L | 0 | 10 | 20 | 30 |
按儀器操作條件(6.1)測定各管和空白管(6.2)的吸光值。各管的吸光值減掉空白管的吸光值,以吸光值爲縱座標,鉻含量爲橫座標繪製標準曲線。
8.5 6.5 測定
6.5.1 標準曲線(6.4)外延使與橫座標相交,對應於原點與交點的距離,即爲原尿樣中鉻的濃度。按式(1)、(2)換算成標準比重時的濃度。
6.5.2 大批樣品分析時,可採用標準加入計算法定量。即分取兩份樣品,置於5 mL試管中,每份1 mL,一份加入一定量的鉻標準溶液(加入鉻產生的吸光值應接近原尿樣吸光值的一半),另一份加入同體積水。按6.1條測定,同時做空白(6.2)。由兩樣品的吸光值減掉空白的吸光值,按式(1)、(3)計算出標準比重時尿鉻的濃度。在測定前後以及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度校正係數(k)。
7.2 標準加入法按式(2)計算標準比重下尿中鉻的濃度。
式中:X——尿中鉻的濃度,μg/L;.
c——由標準曲線查得的鉻的濃度,μg/L。
7.3 標準加入計算法按式(3)計算尿中鉻的濃度。
式中:
c——樣品加標後鉻的濃度,μg/L。
10 8 說明
8.1 本法最低檢測濃度爲0.54 μg/L(空白值3倍標準差);標準曲線線性範圍0~120 μg/L;精密度:CV=3.0%~5.8%(尿鉻濃度9~90μg/L,n=6);加標回收率95.5%~103.6%(尿鉻濃度7.2~32.2μg/L,加標量9~90μg/L,n=6)。
8.2 用硝酸酸化尿樣可提高穩定性,改進基體,防止氯化鉻(沸點低)揮發損失。市售的硝酸常含相當量的鉻,使用前應按樣品測定條件檢查,必要時蒸餾後再用。
8.3 最好採晨尿測定,若採班前或班後尿時,工人要脫離生產現場,換下工作服,洗淨手,然後再排尿,以防止外來污染.
8.4 本法的特點是樣品不經前處理,直接進樣分析,不使用任何背景校正器,依靠仔細地選擇樣品灰化電流(溫度)消除尿基體的干擾。測定基體複雜的尿樣時,也可配合氘燈背景校正器扣除可能殘餘的背景吸收。方法適用於早期進口儀器和國產儀器。由於儀器型號不同,性能各異,本方法提供的儀器操作條件僅供參考。
使用帶有先進的背景校正器(塞曼效應,滷鎢燈等)和多功能程序石墨爐的儀器分析時,可參考美國農業部Beltsuille人類營養研究中心Calude Veillon等推薦的方法,該法經四個實驗室用不同型號的儀器驗證,被認爲是可靠的。該法儀器操作條件如下:原子吸收分光光度計(P-E 5000/500體系);鉻燈電流25 mA;狹縫小於0.7 nm;乾燥,100℃斜坡15 s,保持20 s,130℃斜坡10s,保持20 s;灰化,1200℃斜坡15 s,保持60 s;原子化:2700℃,4s(內部氣體Ar 50 mL/min);乾燥、灰化階段內部氣體Ar300 mL/min,背景校正器:滷鎢燈,進樣25μL;熱解石墨管。使用其他型號儀器時,可根據儀器的操作手冊和自己的實驗設定儀器操作條件。
8.5 尿鉻的揮發溫度略高於基體的揮發溫度,因此在選擇揮發溫度時,應控制到基體基本除掉,而鉻無明顯損失的程度。
8.6 石墨管易老化,使測試的靈敏度逐漸降低,因此,標準曲線必須與樣品分析同時製備,並使用同一支石墨管。
8.7 Fe3+、Cu2+、Mn2+、V5+、Mo6+、Ti4+0.05μg/L,Ni2+150μg/L不干擾測定。
8.8 質控樣如使用標準尿樣或加標的模擬尿時,可考察準確度和精密度。如使用接觸者尿或加標的正常尿時,可考察精密度。但人尿不宜久存。模擬尿只含人尿的大量成分。