2 英文參考
Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 36—1996《尿中鉻的分光光度測定方法》(Urine—Determination of chromium—Spectrophotometric method)由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外,均爲分析純試劑。
4.2 硫酸.ρ20=1.84 g/mL。
4.3 高氯酸,ρ20=1.67 g/mL。
4.4 磷酸,ρ20=1.68 g/mL。
4.5 氨水,ρ20=0.90 g/mL。
4.8 疊氮化鈉溶液,5 g/L。
4.9 甲基橙溶液,1 g/L。
4.10 二苯碳酰二肼溶液,0.4 g/L:稱取0.1 g二苯碳酰二肼溶於50 mL95%(v/v)乙醇中,再加入200 mL 1+9硫酸,搖勻。貯存於棕色瓶中,於冰箱保存,可使用一個月。
4.11 鉻標準溶液:稱取120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀(K2Cr2O7)0.1415 g,用水溶解,移入容量瓶中稀釋到500 mL。此溶液1 mL=0.1 mg鉻。使用時逐級稀釋成1 mL=10.0 μg鉻標準應用液。
4.12 質控樣:用標準尿樣、加標的模擬尿、加標的正常人混合尿或接觸者混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 樣品處理
6.1.1 取50 mL比重爲1.010~1.030尿樣,置於錐形瓶中,同時取50 mL水(4.1)做試劑空白,加5 mL硫酸(4.2),於電熱板上消化至剛炭化時取下,冷卻,加2 mL高氯酸(4.3)。
6.1.2 繼續消化至液體剩下1 mL左右。取下冷卻後加30 mL水(4.1)及1滴甲基橙(4.9),用氨水(4.5)調至黃色,再用1+3硫酸調到剛變紅色。加0.15 mL磷酸(4.4),1滴高錳酸鉀溶液(4.7),於電爐上煮沸約10 min。溶液應保持淡紫色,如溶液呈棕色可補加高錳酸鉀溶液(4.7),趁沸滴加疊氮化鈉溶液(4.8)使溶液無色透明,再煮沸2 min。冷卻後移入50 mL比色管中,加水(4.1)至刻度。
8.2 6.2 標準曲線的繪製
6.2.1 取6只200 mL錐形瓶按下表配製標準管。
鉻標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
標準應用液(4.11),mL | 0 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 0.7 | 1.0 |
水,mL | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
硫酸(4.2),mL | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
鉻的含量,μg | 0 | 1 | 3 | 5 | 7 | 10 |
6.2.2 各錐形瓶放在電熱板上消化至液體剩下約10 mL,取下,冷卻,加2 mL高氯酸(4.3)。然後按6.1.2 條繼續操作。
6.2.3 加1 mL二苯碳酰二肼溶液(4.10),混勻。20 min後在540 nm處,用30 mm比色杯,以零管作參比,測量吸光度。
6.2.4 以鉻含量爲橫座標,吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
8.3 6.3 樣品測定
取6.1.2條製備的稀釋至50 mL的樣品溶液,按6.2.3條操作,測量吸光度,在標準曲線上查出樣品溶液中鉻含量。在測定前後以及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度校正係數k。
7.2 按式(2)計算尿中鉻的濃度。
式中:X——尿中鉻的濃度,mg/L;
m——由標準曲線上查出的鉻含量,μg;
V——分析時所取尿樣體積,mL。
10 8 說明
8.1 本法的檢測限,取50 mL尿樣時爲0.008 mg/L;測定範圍:0.008~0.200 mg/L;精密度:CV=4.6%~8.2%(尿鉻濃度0.022~0.140 mg/L,n=6)。準確度:尿樣加標回收率=92.0%~95.6%。
8.2 接觸者尿樣採集時間不限。採尿樣時要脫離現場環境,換下工作服,洗手,以防鉻塵污染。
8.3 鉻與二苯碳酰二肼顯色時,硫酸濃度應控制在0.05~0.30 mol/L。酸度低,顯色慢,高於0.30 mol/L也會使顯色減弱。本方法在最後的50 mL測定溶液中酸度爲0.20 mol/L。在上述操作條件下15 min顯色完全,顏色在90 min內保持穩定。