3 A羣腦膜炎球菌多糖疫苗藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
A Qun Naomoyanqiujun Duotong Yimiao
3.1.3 英文名
GroupA Meningococcal Polysaccharide Vaccine
3.2 定義、組成及用途
本品系用A羣腦膜炎球菌培養液，經提取獲得的莢膜多糖抗原，純化後加入適宜穩定劑後凍乾製成。用於預防A羣腦膜炎球菌引起的流行性腦脊髓膜炎。
3.3 1 基本要求
生產和檢定用設施、原材料及輔料、水、器具、動物等應符合“凡例”的有關要求。
3.4 2 製造
3.4.1 2.1 菌種
生產用菌種應符合“生物製品生產檢定用菌毒種管理規程”的有關規定。
3.4.1.1 2.1.1 名稱及來源
生產用菌種爲A羣腦膜炎球菌CMCC 29201 （A4）菌株。
3.4.1.2 2.1.2 種子批的建立
3.4.1.3 2.1.3 種子批的傳代
主種子批啓開後至工作種子批，傳代應不超過5代，工作種子批啓開後至接種發酵罐培養，傳代應不超過5代。
3.4.1.4 2.1.4 種子批的檢定
3.4.1.4.1 2.1.4.1 培養特性
菌種接種於含10%羊血普通瓊脂培養基，腦膜炎球菌在25℃不生長。於35～37℃二氧化碳的環境中培養16～20小時，長出光滑、溼潤、灰白色的菌落，菌苔易取下，在生理氯化鈉溶液中呈現均勻混懸液。
3.4.1.4.2 2.1.4.2 染色鏡檢
3.4.1.4.3 2.1.4.3 生化反應
發酵葡萄糖、麥芽糖，產酸不產氣；不發酵乳糖、甘露醇、果糖及蔗糖（2010年版藥典三部附錄XIV）。
3.4.1.4.4 2.1.4.4 血清學試驗
取經35～37℃培養16～20小時的菌苔，混懸於含0.5%甲醛的生理氯化鈉溶液中，或56℃加熱30分鐘殺菌以後，使每Iml含菌1.0×109～2.0×109，與同羣參考血清做定量凝集反應，置35～37℃過夜，次日再置室溫2小時觀察結果，以肉眼可見清晰凝集現象（+）之血清最高稀釋度爲凝集效價，必須達到血清原效價之半。
3.4.1.4.5 2.1.5種子批的保存
3.4.2 2.2 原液
3.4.2.1 2.2.1 生產用種子
啓開工作種子批菌種，經適當傳代，檢定培養特性及染色鏡檢合格後接種培養基，製備數量適宜的生產用種子。
3.4.2.2 2.2.2 生產用培養基
採用改良半綜合培養基或經批准的其他適宜培養基。培養基不應含有與十六烷基三甲基溴化銨能形成沉澱的成分。
3.4.2.3 2.2.3 培養
採用培養罐液體培養。在培養過程中取樣進行純菌檢查，塗片做革蘭氏染色鏡檢，如發現污染雜菌，應廢棄。
3.4.2.4 2.2.4 收穫及殺菌
於對數生長期的後期或靜止期的前期收穫，取樣進行菌液濃度測定及純菌檢查，合格後在收穫的培養液中加入甲醛溶液殺菌。殺菌條件以確保殺菌完全又不損傷其多糖抗原爲宜。
3.4.2.5 2.2.5 純化
3.4.2.5.1 2.2.5.1 去核酸
將已殺菌的培養液離心後收集上清液，加入十六烷基三甲基溴化銨，充分混勻，形成沉澱；離心後的沉澱物加入適量氯化鈣溶液，使多糖與十六烷基三甲基溴化銨解離；加入乙醇至最終濃度爲25%，2～8℃靜置1～3小時或過夜，離心收集澄清的上清液。
3.4.2.5.2 2.2.5.2 沉澱多糖
於上述上清液中加入冷乙醇至最終濃度爲80%，充分振搖。離心收集沉澱，沉澱物用無水乙醇及丙酮分別洗滌，沉澱物即爲多糖粗製品。應保存在-20℃以下，待純化。
3.4.2.5.3 2.2.5.3 多糖純化
將多糖粗製品溶解於1/10飽和中性醋酸鈉溶液中，稀釋至適宜濃度，按適當比例用冷酚提取數次，離心收集上清液，並用0.1mol/L氯化鈣溶液或其他適宜溶液透析或超濾，加入乙醇至終濃度爲75%～80%；離心收集的沉澱物用無水乙醇及丙酮分別洗滌，乾燥後用滅菌注射用水溶解，除菌過濾後即爲多糖原液。提取過程應儘量在15℃以下進行。
3.4.2.6 2.2.6 原液檢定
按3.1項進行。
3.4.2.7 2.2.7 保存及有效期
於-20℃以下保存。自多糖粗製品製造之日起，有效期爲60個月。
3.4.3 2.3 半成品
3.4.3.1 2.3.1 配製
用無菌、無熱原乳糖和滅菌注射用水稀釋原液。每1次人用劑量含多糖應不低於30μg，乳糖2.5～3.0mg。
3.4.3.2 2.3.2 半成品檢定
按3.2項進行。
3.4.4 2.4 成品
3.4.4.1 2.4.1 分批
3.4.4.2 2.4.2 分裝及凍幹
應符合“生物製品分裝和凍幹規程”規定。凍幹過程中製品溫度應不高於30℃，真空或充氮封口。
3.4.4.3 2.4.3 規格
按標示量復溶後每瓶5ml（10次人用劑量），含多糖300μg;按標示量復溶後每瓶2.5ml（5次人用劑量），含多糖150μg。每1次人用劑量含多糖應不低於30μg。
3.4.4.4 2.4.4 包裝
3.5 3 檢定
3.5.1 3.1 原液檢定
3.5.1.1 3.1.1 鑑別試驗
採用免疫雙擴散法（2010年版藥典三部附錄Ⅷ C），本品與A羣腦膜炎球菌抗體應形成明顯沉澱線。
3.5.1.2 3.1.2 化學檢定
3.5.1.2.1 3.1.2.1 固體總量
依法測定（2010年版藥典三部附錄Ⅶ M）。
3.5.1.2.2 3.1.2.2 蛋白質含量
應小於10mg/g（2010年版藥典三部附錄Ⅵ B第二法）。
3.5.1.2.3 3.1.2.3 核酸含量
應小於10mg/g，核酸在波長260nm處的吸收係數（
）爲200（2010年版藥典三部附錄Ⅱ A）。
3.5.1.2.4 3.1.2.4 O-乙酰基含量
應不低於2mmol/g（2010年版藥典三部附錄Ⅵ F）。
3.5.1.2.5 3.1.2.5 磷含量
應不低於80mg/g（2010年版藥典三部附錄Ⅶ A）。
3.5.1.2.6 3.1.2.6 多糖分子大小測定
多糖分子的KD值應不高於0.40，‰值小於0.5的洗脫液多糖回收率應大於65%（2010年版藥典三部附錄Ⅷ G）。
3.5.1.3 3.1.3 無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.5.1.4 3.1.4 細菌內毒素檢查
應不高於50EU/μg（2010年版藥典三部附錄Ⅻ E凝膠限度試驗）；也可採用熱原檢查法（2010年版藥典三部附錄Ⅻ D）檢查，注射劑量按家兔體重每1kg注射0.05μg多糖，應符合規定。
3.5.2 3.2 半成品檢定無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.5.3 3.3 成品檢定
除裝量差異、水分測定、多糖含量、多糖分子大小測定和異常毒性檢查外，按製品標示量加入滅菌PBS復溶後進行其餘各項檢定。
3.5.3.1 3.3.1 鑑別試驗
按3.1.1項進行。
3.5.3.2 3.3.2 物理檢查
3.5.3.2.1 3.3.2.1 外觀
應爲白色疏鬆體，按標示量加入PBS應迅速復溶爲澄明液體，無異物。
3.5.3.2.2 3.3.2.2 裝量差異
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅰ A），應符合規定。
3.5.3.3 3.3.3 化學檢定
3.5.3.3.1 3.3.3.1 水分
應不高於3.0%（2010年版藥典三部附錄Ⅶ D）。
3.5.3.3.2 3.3.3.2 多糖含量
每1次人用劑量多糖含量應不低於30μg。根據以下比例（多糖含量：磷含量爲1000：75），先測定磷含量應不低於2.25μg（2010年版藥典三部附錄Ⅶ A），再計算出多糖含量。
3.5.3.3.3 3.3.3.3 多糖分子大小測定
每5批疫苗至少抽1批檢查多糖分子大小。KD值應不高於0.40，KD值小於0.5的洗脫液多糖回收率應大於65%（2010年版藥典三部附錄Ⅷ G）。
3.5.3.4 3.3.4 無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.5.3.5 3.3.5 異常毒性檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ F），應符合規定。注射劑量每隻豚鼠爲500μg/ml，每隻小鼠爲100μg/0.5ml。
3.5.3.6 3.3.6 熱原檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ D），注射劑量按家兔體重每1kg注射0.05μg多糖，應符合規定。
3.5.4 3.4 稀釋劑檢定
3.5.4.1 3.4.1 pH值
應爲6.8～7.2（2010年版藥典三部附錄Ⅴ A）。
3.5.4.2 3.4.2 無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.5.4.3 3.4.3 異常毒性檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ F），應符合規定。
3.5.4.4 3.4.4 熱原檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ D），注射劑量按家兔體重每1kg注射1ml，應符合規定。
3.6 4 保存、運輸及有效期
3.7 5 使用說明
【藥品名稱】
通用名稱：A羣腦膜炎球菌多糖疫苗
英文名稱：Group A Meningococcal PolysaccharideVaccine
漢語拼音：A Qun Naomoyanqiujun Duotang Yimiao
【成分和性狀】
本品系用A羣腦膜炎球菌培養液，經提取獲得的莢膜多糖抗原，純化後加入適宜穩定劑凍乾製成。爲白色疏鬆體，復溶後爲澄明液體，
【接種對象】
6個月～15週歲少年兒童。
【作用與用途】
接種本疫苗後，可使機體產生體液免疫應答。用於預防A羣腦膜炎球菌引起的流行性腦脊髓膜炎。
【規格】
按標示量復溶後每瓶5ml（10次人用劑量），含多糖300μg;按標示量復溶後每瓶2.5ml（5次人用劑量），含多糖150μg。每1次人用劑量含多糖應不低於30μg。
（1）按標示量加入所附稀釋劑復溶，搖勻立即使用。
（2）於上臂外側三角肌附着處皮下注射0.5ml（含多糖不低於30μg）。
（3）基礎免疫注射2針，從6月齡開始，每針間隔3個月；3歲以上兒童只需注射1次。接種應於流行性腦脊髓膜炎流行季節前完成。
根據需要每3年複種1次。在遇有流行情況下，可擴大年齡組做應急接種。
【不良反應】
常見不良反應：
（1）接種後24小時內，在注射部位可出現疼痛和觸痛，注射局部紅腫浸潤輕、中度反應，多數情況2～3天內自行消失。
（2）接種疫苗後可出現一過性發熱反應。其中大多數爲輕度發熱反應，持續1～2天后可自行緩解，一般不需處理；對於中度發熱反應或發熱時間超過48小時者，可對症處理。
罕見不良反應：
（2）注射局部重度紅腫或其他併發症，應給予對症處理。
極罕見不良反應：
（1）過敏性皮疹：接種疫苗後72小時內可出現皮疹，應及時就診，給予抗過敏治療。
（2）過敏性休克：一般在注射疫苗後1小時內發生。應及時搶救，注射腎上腺素進行治療。
（3）過敏性紫癜，出現過敏性紫癜反應時應及時就診，應用皮質固醇類藥物給予抗過敏治療，治療不當或不及時有可能併發紫癜性腎炎。
【禁忌】
（1）已知對該疫苗的任何成分過敏者。
（2）患急性疾病、嚴重慢性疾病、慢性疾病的急性發作期和發熱者。
【注意事項】
（1）以下情況者慎用：家族和個人有驚厥史者、患慢性疾病者、有癲癇史者、過敏體質者、哺乳期婦女。
（2）疫苗瓶有裂紋、標籤不清或失效者、疫苗復溶後出現渾濁等外觀異常者均不得使用。
（3）疫苗開啓後應立即使用，如需放置，應置2～8℃於1小時內用完，剩餘均應廢棄。
（4）應備有腎上腺素等藥物，以備偶有發生嚴重過敏反應時急救用。接受注射者在注射後應在現場觀察至少30分鐘。
（5）嚴禁凍結。
【貯藏】
於2～8℃避光保存和運輸。
【包裝】
【有效期】
24個月。
【執行標準】
【批准文號】
【生產企業】
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傳真號碼：
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3.8 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版