1 概述
精氨酰琥珀酸裂解酶是尿素合成代謝過程中產生的一種酶,其在肝中含量最豐富,少量存在於小腸和腎臟。當肝臟發生病變時,精氨酰琥珀酸裂解酶即可隨肝細胞破壞進入血液。目前認爲診斷肝炎時測定精氨酰琥珀酸裂解酶的意義與轉氨酶相當。
3 精氨酰琥珀酸裂解酶的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 化驗取材
3.4 精氨酰琥珀酸裂解酶的測定原理
以精氨酰琥珀酸作基質,在一定的反應條件下,血清中的精氨酰琥珀酸裂解酶作用於基質,產生精氨酸和反丁烯乙酸。加入三氯乙酸,停止酶反應,同時沉澱蛋白,測定無蛋白濾液中精氨酸的量,來測知酶的活力。
3.5 試劑
(1)磷酸鹽-EDTA緩衝液(0.1mol.L磷酸鹽,0.1mol/L EDTA,pH7.0):取磷酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)31.2g,和乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)58.4g,加蒸餾水約500ml溶解,用2.5mol/L氫氧化鈉液校正pH至7.0加蒸餾水釋至1000ml(存於冰箱中)。
(2)基質液(精氨酰琥珀酸4mmol/L):稱取精氨酰琥珀酸鋇鹽(分子量493.7)50mg,溶於4ml蒸餾水中,加0.35mol/L硫酸鈉1ml,混勻後,放置1/2h後離心,吸取上清液。每ml上清液加4ml磷酸鹽-EDTA緩衝液,混勻即可使用(冰箱存1周)。
(3)20g/L胸腺嘧啶溶液:稱取胸腺嘧啶2g,用2.5mol/L氫氧化鈉溶液溶解並稀釋至100ml(存於冰箱中)。
(4)0.6g/L 2,4-二氯萘酚溶液:稱取2,4-二氯萘酚 60mg,加95%乙醇溶液溶解,並稀釋至100ml(存於冰箱中)。
(5)胸腺嘧啶-2,4-二氯萘酚溶液取“3”和“4”等量混合(臨用現配)。
(6)次氯酸鈉溶液:取安替福民(有效氯5.25%)60ml,加蒸餾水至500ml(存於冰箱中)。
(9)精氨酸標準液(1mmol/L):稱取L-精氨酸17.42mg,於100ml量瓶中,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解並稀釋至刻度(存在於冰箱中)。
3.6 操作方法
按表1操作。
每加一試劑混勻後再加第二試劑,放入冰浴中15min後用515nm波長立即比色,用空白管調吸光度至“0”點,讀取測定管的吸光度,在標準曲線上查出ASAL活力單位。
放入冰浴中15min,用515nm波長比色,用1號管調吸光度至“0”點,分別讀取各管吸光度,與其相應濃度製圖,繪成標準曲線。
3.7 正常值
(1)酶速率法(37℃):0~50U/L
(2)比色法: 0.2~5.3U
3.8 化驗結果臨牀意義
精氨酸琥珀酸裂解酶,是尿素合成代謝中的一種酶,肝臟中含量豐富。當肝臟發生病變時,隨肝細胞破壞ASAL就進入血液,所以,此酶測定較轉氨酶測定對肝臟疾病有較高的特異性。有助於診斷急慢性肝炎,尤其是HBsAg陽性而ALT升高不顯著的病人,作出早期診斷有較大價值。
3.9 附註
(1)此方法溫度高,顯色差;溫度低,顯色好。因此,應保持在一定低溫度下操作,如無冰浴條件,可在20℃以下室溫下操作,但重複性差,每次應作標準管計算結果。
(2)比色前應用力振搖,要在半小時內比色完畢,否則將影響測定結果。