2 英文參考
Urine—Determination of nickel—Spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 43—1996《尿中鎳的分光光度測定方法》(Urine—Determination of nickel—Spectrophotometric method)由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
4 2 原理
尿樣經酸消化後,其中的鎳與丁二酮肟(DMG)生成Ni-DMG絡合物,用三氯甲烷萃取,以分離其他干擾離子,然後在三氯甲烷-冰乙酸-乙醇介質中,Ni2+再與2-[(5-溴-吡啶)偶氮]-5-(二乙胺)苯酚(5-Br- PADAP)絡合,生成紅色絡合物,于波長559nm處,比色定量。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外,均爲分析純試劑。
4.2 硝酸,ρ20=1.42g/mL。
4.3硫酸,ρ20=1.84g/mL。
4.4 冰乙酸,ρ20=1.05g/mL。
4.5 高氯酸,ρ20=1.67g/mL。
4.6 氨水,ρ20=0.9g/mL。
4.7 無水乙醇。
4.8 三氯甲烷。
4.15 5-Br-PADAP乙醇溶液,0.35g/L。
4.16 鎳標準溶液:稱取0.4477g硫酸鎳(NiSO4·6H2O),溶於水中,定量轉移至1000mL容量瓶中,稀釋至刻度。此液1mL=100μgNi2+。臨用前再用水稀釋成1mL= 1μgNi2+的標準應用液。
4.17 質控樣:用標準尿樣、加標的模擬尿、接觸者混合尿或加標的正常人混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 樣品處理
取尿樣25mL於錐形瓶中,加混合酸(4.9)5mL,加熱至棕色或冒白煙,取下稍冷。加0.5mL高氯酸,繼續加熱消化至無色。冷卻後,加5mL水稀釋並移入分液漏斗中,用5mL水洗滌錐形瓶兩次,洗滌液亦並人同一分液漏斗中。用25mL水代替尿樣,按樣品處理的操作處理,作爲空白對照。
8.2 6.2 標準曲線的繪製
6.2.1 取分液漏斗6個,按下表配製標準管。
鎳的標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
標準應用液(4.16),mL | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
水,mL | 10.0 | 9.8 | 9.6 | 9.4 | 9.2 | 9.0 |
Ni的含量,μg | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
6.2.2 於分液漏斗中各加入1滴甲酚紅溶液,1.5mL檸檬酸鈉溶液,0.5mL丁二酮肟溶液。用氨水(4.6)調節溶液至呈紫色後再多加3滴,加5mL三氯甲烷。振搖250次,靜置分層,棄去水層,三氯甲烷層用氨水溶液(4.11)洗三次,然後移入比色管中。
6.2.3 於各管中加入0.5mL 5-Br-PADAP溶液,4mL冰乙酸-無水乙醇溶液,再加無水乙醇至刻度,混勻。10min後用30mm比色杯,于波長559nm處,以試劑空白爲參比,測量吸光度值。以鎳含量爲橫座標,吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
8.3 6.3 樣品測定
6.3.1 各樣品管按6.2.2條操作。
6.3.2 於樣品管中各加入0.5mL 5-Br-PADAP溶液,4mL冰乙酸無水乙醇溶液,再加無水乙醇至刻度,混勻。10min後用30mm比色杯,于波長559nm處,以空白對照爲參比,測量吸光度。從標準曲線上查得鎳含量。在測定前後以及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度校正係數(k)。
7.2 按式(2)計算尿中鎳的濃度。
式中:X——尿樣中鎳的濃度,μg/L;
m——由標準曲線上查得的鎳的含量,μg;
V——分析時所取尿樣體積,mL。
10 8 說明
8.1 本法的最低檢測濃度,取、25mL尿樣分析時爲2μg/L。線性範圍0~1.0μg。精密度:CV=3.2%~16.9%(尿鎳濃度2.36,6.48,15.9,79.6μg/L,n=6)。準確度:尿樣加標回收率=80.0%~103.3%(鎳加入量0.3,2.0μg,n=6)。
8.2 採集尿樣時工人要脫離現場環境,換下工作服,洗淨手,以防污染。
8.3 用三氯甲烷萃取Ni-DMG絡合物的一次萃取率可達99.5%,顏色可穩定15h。8.4 銅離子對本法有明顯干擾,用1+50氨水洗滌有機相即可完全消除此干擾。8.5 質控樣用標準尿樣和加標的模擬尿時可考察準確度和精密度。用接觸者尿和加標的正常尿時可考察精密度。但人尿不易久存。模擬尿只含人尿中的大量成分。