4 唾液溶菌酶的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 唾液溶菌酶的測定原理
根據朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律當光線通過抗原抗體反應系統時,由於溶液中存在抗原抗體複合物,光線被吸收。吸收的量和複合物的量成正比(圖1)。
E:吸光度變化率;
Io:入射光;
I:透光度;
C:溶液的濃度;
K:cd或常數;
d:光路長。
(1)沉澱反應免疫比濁法:當抗體過剩時,抗原、抗體最適比值濃度範圍大致呈直線。應用紫外波長(340nm)可測定抗原抗體複合物濁度。大多數光電比色計,分光光度計及自動生化分析儀均可用於比濁。
(2)乳膠顆粒被動凝集免疫比濁法:將抗體致敏在乳膠顆粒上,加上抗原時,致敏的乳膠顆粒與抗原相結合,形成大小不等的凝集塊。凝集顆粒小時,光可通過;凝集顆粒大時,光散亂,透過光減少。利用此原理,可採用兩種方式比濁。
①白色光乳膠顆粒比濁法:乳膠顆粒直徑在0.1~0.8μm範圍時,粒徑大,吸光度增加,用500nm左右波長;0.1μm粒徑可用585nm波長進行測定。
②近紅外光乳膠顆粒比濁法:與白色光比濁原理相同,粒徑0.2μm乳膠顆粒,可用940nm近紅外光測定。
4.5 試劑
(1)參考標準和抗血清:可選用國內標準化產品,根據其效價進行不同濃度稀釋。
(2)稀釋液:聚乙二醇(PEG,MW6000)40g,NaF 20g,NaN30.5g,NaCl 9g,加蒸餾水溶解並稀釋至1000ml,0.45μm濾膜過濾,保存備用。
4.6 操作方法
使用免疫比濁操作法。
4.7 正常值
(1.7±0.2)mg/L。
4.8 化驗結果臨牀意義
生理性減低見於婦女月經期,病理性減低見於惡性腫瘤,唾液溶菌酶減低易致口腔感染。
升高:口眼乾燥綜合徵(Sjogren病)。
4.9 附註
(1)透射比濁時,應採用顆粒吸收最強烈的波長,否則將影響曲線斜率。
(2)應保證檢測儀器的良好性能,測定儀器光學系統調換零件時,應重新繪製比濁法的曲線,否則容易引起誤差。
(3)比濁法易受外界條件的影響,因此,試驗條件、試劑濃度、用量等要求一致,混懸液中顆粒大小要均勻,重現性好,否則將影響結果。