血清補體旁路途徑活性

1 拼音

xuè qīng bǔ tǐ páng lù tú jìng huó xìng

2 英文參考

Serum complement alternative pathway activity

3 概述

本試驗阻斷補體傳統活化途徑，加入兔紅細胞使B因子活化，導致補體旁路激活，兔紅細胞遭受損傷而發生溶血。溶血率與補體旁路活性之間的關係類似CH50。

4 血清補體旁路途徑活性的醫學檢查

4.1 檢查名稱

血清補體旁路途徑活性

4.2 分類

免疫學檢查 > 細胞免疫測定

4.3 取材

血液

4.4 血清補體旁路途徑活性的測定原理

將新鮮的受檢血清作一系列稀釋後，分別加入抗體致敏綿羊紅細胞，經過一定時間的反應，根據溶血程度可判斷受檢血清中的總補體活性。

總補體測定現在用的是50%溶血活性測定，要比CH100敏感，這是因爲溶血程度在30%～70%的範圍內補體的用量稍有變動即能影響溶血程度，因而CH50單位比較準確。但是CH50操作要求比100%溶血試驗要高。

4.5 試劑

（1）pH7.4巴比妥緩衝液（含鈣、鎂離子）：巴比妥鈉5.1g，氯化鈉44.5mg，氯化鈣42.5mg，氯化鎂250mg，1mol/L鹽酸（調pH）約30ml，加去離子水至1000ml，使用時取原液做1∶5稀釋，當日用完。

（2）2%綿羊紅細胞懸液：吸取經洗滌配製的2%羊紅細胞懸液0.2ml，加入pH7.4巴比妥緩衝液5ml，混合後，倒入1cm比色杯，用721型分光光度計（波長542nm）比色。以巴比妥緩衝液作爲空白，校正透光率到100%，讀取測定管透光率，應爲40%。如有差異，按比例給予調節。

（3）2u抗綿羊紅細胞溶血素溶液：如溶血素的效價爲1∶6000，則用巴比妥緩衝液稀釋1∶3000即成。

（4）標準管制備：2%羊紅細胞懸液2ml，加蒸餾水8ml，使其全溶血爲100%全溶血管。取全溶血管上清2.5ml，加巴比妥緩衝液（pH7.4）2.5ml，即爲50%溶血標準管。

4.6 操作方法

（1）將待檢血清按1∶20稀釋，吸取待檢血清0.2ml於一試管中，加入巴比妥緩衝液3.8ml，混勻。

（2）取10支試管按（表1）加液混勻。

（3）將上述各管先與50%溶血標準管作初步目視比較，選擇與標準管相接近的兩管，用分光光度計在波長542nm讀數，求出二者中更加接近標準光密度數的一管。根據此管中加入稀釋血清的量按下式求出總補體值。

4.7 正常值

本法測得的健康人正常值爲50～100u/ml。

4.8 化驗結果臨牀意義

在許多病理情況下，血清補體含量可以發生變化，因此臨牀上觀察補體含量的動態變化，如總補體活性、補體個別成分特別是C₃和C₄量的變化等，對一些疾病的診斷、病因研究及預後判斷都有一定意義。但補體量的降低，並不一定就是免疫紊亂或免疫性疾病。現知缺血、凝固性壞死和中毒性壞死，可使組織釋放較多的蛋白分解酶，導致補體溶血活性和每個補體成分下降。某些先天性補體缺乏症也可出現某個補體成分的缺損，因此需對具體情況作詳細分析。

4.9 附註

（1）受檢血清必須新鮮，如放置室溫2h以上，會使補體活性下降。

（2）補體的溶血活性受多種因素的影響，如綿羊紅細胞濃度及致敏抗體的量等。當每一致敏紅細胞吸附的抗體分子低於100時，紅細胞溶解程度隨細胞濃度的增加而減少。當用高濃度抗體致敏時，溶血程度隨細胞的增加而增加。紅細胞濃度增加一倍，可使50%溶血補體量增加25%左右。鈣、鎂離子的存在可穩定溶血系統。但含量過多時，反而抑制溶血反應。因此在進行試驗時，需對反應的各個環節作嚴格控制。

（3）本試驗不能測定補體蛋白的絕對值，也不能測定備解素系統中的成分。