1 註解
在電化學發光免疫測定（electrochemluminescenceimmunoassay，ECLI）中應用的標記物爲電化學發光反應的底物三聯吡啶釕，其衍生物N-羥基琥珀酰胺（NHS）酯可通過化學反應與抗體或不同化學結構的抗原分子結合，製成標記的抗體或抗原。ECLI的測定模式與ELISA相似，分二個步驟進行。以雙抗體夾心法測定抗原爲例，第一步在試管中進行，反應物爲Ru（bpy）32+標記的抗體、吸附在磁性微球上的固相抗體以及受檢的標本，反應式如圖18-2。
圖18-2 ECLI中的抗原抗體反應
反應後除由標記抗體、固相抗體與標本中的抗原形成的夾心複合物外，尚有多餘的標記抗體和固相抗體。第二步是將反應液輸入特殊的檢測儀器的反應室中（圖18-3），隨即用含三丙胺（TPA）的緩衝液沖洗。反應室電極下有磁鐵。含磁性微球的夾心複合物及遊離的固相抗體被吸附在電極表面，遊離的標記抗體隨沖洗液流出。此時在反應室中即發生如圖18-1的電化學發光反應。發出的光由光電倍增管轉爲信號，通過電信號的測定反映標本中抗原的含量。
圖18-3 ECLI中的ECL反應
ECLI具有以下優點：①標記物在再循環利用，使發光時間更長、強度更高、易於測定；②敏感度高，可達pg/ml或pmol水平；③線性範圍寬，＞104；④反應時間短，20min以內可完成測定；⑤試劑穩定性好，2～5℃可保持一年以上。