4 蛋白S抗原的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 蛋白S抗原的測定原理
(1)酶免法:蛋白S抗體結合於微孔板表面,與血漿樣本中蛋白S結合,然後過氧化物酶標記抗體與蛋白S結合形成蛋白S免疫複合物,過氧化物酶結合的量與蛋白S量成比例,由增加底物顯色測定。結果以百分比或每升多少毫克表達。
(2)凝固法:基於APTT的許多方法都依賴於因子Ⅴ和因子Ⅷ。因子Ⅴ和因子Ⅷ激活被蛋白S活化抑制,測定蛋白S的抗凝活性能使APTT延長。爲避免干擾,樣本需稀釋並與缺乏蛋白S血漿混合,加入APTT試劑之後,再加入一種從蝮蛇毒素提取酶,以激活蛋白S,由於反應混合物中含有的各種抗凝因子超量,需依賴蛋白S活性測定抗凝時間,結果可從抗凝時間標準曲線讀出,以正常的百分數表達。
(3)氨基溶解法:蛋白S由蛋白S活化物(蛇毒)激活,然後用分光光度計確定底物顯色程度,活性以正常的百分數表示。
4.4 試劑
乏血小板的血漿(0.11moL/L枸櫞酸鈉1份,血液9份) 1ml。
4.5 操作方法
蛋白S濃度測定(免疫化學)與蛋白S活性測定方法(生理止血活性)是不同的。在某些條件下如急性反應期,兩種方法結果不一致。
(1)酶免法:測定蛋白S抗原濃度。
(2)凝固法:在凝固法中,測定目標爲蛋白S抗凝活性,即對因子Ⅷa和因子Ⅴa滅活能力。
(3)氨基溶解法:這種方法是用髮色底物來測定蛋白S酶活性。與凝固法不同是磷脂結合部位發生改變,如口服抗凝藥治療時較明顯,不產生任何影響。
4.6 正常值
PS活性 65%~140%
自由PS濃度 70%~140%
總PS濃度 70%~140%
4.7 化驗結果臨牀意義
蛋白S途徑缺失使靜脈血栓形形形成發生增加(表1),儘管有猜想認爲血栓形成的高度危險性與獲得性PC缺失之間存在聯繫,但仍需證實。
蛋白S途徑的生理作用是抑制凝血系統,有報告顯示與刺激纖維蛋白溶解相關,但需進一步證實。
蛋白S有加速活化的蛋白S作用,當蛋白S缺乏時抗凝作用消失。激活的蛋白S能抑制因子Ⅴ變異,但作用微小。因此,這種變異使蛋白S抗凝途徑受抑制從而血栓形成危險增加。
Ⅰ型:由於合成減少使兩種蛋白濃度和活性降低。
Ⅱ型:存在無功能蛋白,即濃度正常而活性顯著降低。
在蛋白S還有另外類型:
Ⅲ型:遊離蛋白S濃度降低引起C4b結合蛋白濃度增高,即蛋白S總濃度和活性正常而遊離蛋白S抗原濃度和活性降低。
關於因子Ⅴ萊頓的變異,由於常染色體顯性遺傳類型,雜合型攜帶者與純合型不同。
4.8 附註
有商品試劑盒子報道了其他參考值。