3 概述
人、動物、植物、微生物間存在一種嗜異性抗原(Forssman antigen,F.antigen),可激發機體產生與種屬特異性無關的嗜異性抗體(嗜異性凝集素)(Forssman antibody,F.antibody),除與相應抗原起反應外,還能與其他動物的紅細胞或組織浸液等發生反應。檢測患者血清中F-antibody,可協助臨牀診斷治療某些疾病。
7 嗜異性凝集吸收試驗的原理
某些物質激發機體所產生的抗體,除與相應抗原起反應外,還能與人或其他動物的紅細胞或組織浸液等發生反應,它與種屬特異性無關,故統稱爲嗜異性抗體或嗜異性凝集素。
傳染性單核細胞增多症患者,某些正常人或曾用抗血清(馬血清)治療的患者,其血清中有類似的嗜異性抗體,均能與綿羊紅細胞凝集,但可通過吸附試驗加以鑑別。
8 試劑
(1)綿羊紅細胞懸液:將脫纖維蛋白綿羊紅細胞放4℃24h後用生理鹽水洗3次,按比容配成1%細胞懸液。
(3)20%豚鼠腎髒組織懸液:取豚鼠腎髒擠去血液,用生理鹽水洗淨血液。切碎並研磨成糊狀,每2g加生理鹽水10ml。隔水煮沸1h,補足失水量,加石炭酸至最終濃度爲0.5%防腐。冰箱保存能使用數月。
(4)20%牛紅細胞懸液:將脫纖維蛋白牛血用生理鹽水洗3次,按比容配成20%細胞懸液。隔水煮沸1h,補足失水量,加入石炭酸至最終濃度爲0.5%防腐。4℃保存。
9 操作方法
(1)初步嗜異性凝集試驗:
①排列10支試管,第1管加生理鹽水0.8ml,其餘各管0.5ml。
②第1管加受檢血清0.2ml,混勻後吸0.5ml加第2管內,混勻,依次稀釋至第9管,第10管作爲對照。
③每管各加1%綿羊紅細胞懸液0.5ml,此時1~9管血清稀釋倍數依次爲1∶10,l∶20,1∶40,1∶80,1∶160,1∶320,1∶640,1∶1280,1∶2560。
④混勻、37℃水浴1h,如未出現凝集,應移置4℃過夜,再放37℃水浴1h,作最後觀察。
⑤結果判定同一般試管血凝試驗,血清最高稀釋管出現(++)凝集者,該管血清稀釋倍數的倒數即爲該血清的效價。
(2)鑑別嗜異性凝集試驗:
①豚鼠腎髒組織吸收試驗取20%豚鼠腎髒組織懸液1ml,加受檢血清0.2ml,混勻。室溫放lh,其間常振搖;以1500r/min離心,取上清液,即爲1∶5稀釋的吸收過血清;取該血清按初步嗜異性凝集試驗複測抗體效價。結果判斷同前。
②牛紅細胞吸收試驗取20%牛紅細胞懸液1ml,加受檢血清0.2ml,混勻,室溫放1h,其間常振搖。以1500r/min離心;10min,上清液即爲1∶5稀釋的吸收過的血清。取該血清按初步嗜異性凝集試驗複測抗體效價。結果判斷同前所述。
11 化驗結果臨牀意義
(l)傳染性單核細胞增多症患者血清中嗜異性抗體,可被牛紅細胞完全吸收,而被豚鼠腎髒組織部分吸收。
(2)注射抗血清(馬血清)或患有血清病者血清中的嗜異性抗體可被豚鼠腎髒組織和牛紅細胞完全吸收。
(3)傳染性單核細胞增多症患者的嗜異性抗體並不經常爲陽性,最早出現於起病第4天,大多數爲第1周後出現,常持續至發病後第3周,少數患者可維持數月。有報道患病第1周呈有意義的抗體效價的病例約爲40%,至第2週上升至60%。但由於嗜異性抗體出現的時間頗不一致,因此須定期多次複查,如在病程中抗體效價上升,則更有意義。