3 概述
Douvas等於1979年報告,硬皮病患者血清中有一種抗核抗體,其靶抗原爲細胞核中一種非組蛋白蛋白質,因在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)中移動的分子量爲70kD,故稱爲Scl-70。1986年,Shero等證實,Scl-70的本質是DNA拓樸異構酶-1,其天然分子量爲100kD,70kD抗原爲其降解片段。DNA拓樸異構酶-1,位於核質中,在核仁中的濃度很高。它與DNA超螺旋的鬆解過程有關,在DNA雙鏈的複製和轉錄中起作用。此酶將DNA鏈切斷,並附着在產生的遊離端上,因此,不需整個DNA分子解螺旋,而僅發生於將複製的區域。一旦某一區域複製或轉錄完成,DNA雙鏈就重新結合,拓樸酶釋放。它是細胞內具有重要生物功能的關鍵蛋白。
5 抗Scl-70抗體的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 抗Scl-70抗體的測定原理
檢測抗Scl-70的經典方法是瓊脂雙向免疫擴散法(Ouchterlony法),近年來則多用免疫印跡法(western blot法),兩法原理可參看本章抗Sm抗體測定。用免疫熒光法檢測時,在Hep-2細胞上呈現核的密集的斑點熒光圖型,但很難與其他引起斑點型熒光的抗核抗體區別。
5.5 試劑
同免疫印跡法。
5.6 操作方法
同免疫印跡法。
5.7 正常值
5.8 化驗結果臨牀意義
抗Scl-70抗體主要見於全身性進行性硬化症(PSS)中的瀰漫型,是該病的標誌性抗體,其陽性率25%~70%,陽性率的差異可能與免疫擴散法所用可提取性核抗原(ENA)的濃度不同以及選擇的病例類型不同有關,在重型瀰漫型硬皮病患者可高達75%,在CREST綜合徵患者抗Scl-70檢出率僅4%~11%,此抗體陽性者抗着絲粒抗體多爲陰性。侷限型硬皮病病人,此抗體檢出率很低,僅約20%左右。
5.9 附註
已用從牛和兔胸腺中提取,純化的Scl-70抗原建立了ELISA法,但尚未推廣。