2 註解
實時聚合酶鏈反應(Real-Time PCR)是一種最新發展的定量PCR技術。該技術藉助於熒光信號來檢測PCR產物,一方面提高了靈敏度,另一方面還可以做到PCR每循環一次就收集一個數據,建立實時擴增曲線,準確地確定CT值,從而根據CT值確定起始DNA拷貝數,做到了真正意義上的DNA定量,較以往常用的終點定量的方法更加準確。根據所使用的技術不同,熒光定量PCR又可以分爲TaqMan探針和SYBR Green I熒光染料兩種方法。Real-time PCR所採用的專用PCR儀能夠自動在每個循環的特定階段對反應體系的熒光強度進行檢測,實時的記錄熒光強度的改變,從而對樣品的濃度進行精確的定量。