3 概述
肌鈣蛋白是肌肉收縮的調節蛋白，由三個結構不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（TnT）、肌鈣蛋白I（TnI）和肌鈣蛋白C（TnC），它附在收縮的橫紋肌細微組織上，TnI是一種結構蛋白，它與肌動蛋白及原肌球蛋白互相作用。TnI與肌動球蛋白在靜止狀態時相結合，抑制肌動球蛋白的ATP酶（ATPase）活性。TnC有四個能結合鈣離子的結合點，當它與細胞內的鈣離子結合時，能導致整個肌鈣蛋白構造上的變化。肌鈣蛋白放鬆了肌動球蛋白，讓肌動球蛋白與肌漿球蛋白互起作用，而造成肌肉收縮。肌鈣蛋白具有的3種同分異構體，其中兩種同分異構體是骨骼肌所特有的，一種同分異構體是心肌所特有的，這3種肌鈣蛋白的同分異構體存在着結構上的差異。心肌中的T和I亞基結構不同於其他肌肉組織，心肌鈣蛋白T、I（CTnT、CTnI）由於分子量小，分別爲37000D和24000D，所以發病後血中濃度迅速升高，目前已得到抗CTnT和CTnI的特異抗血清，應用免疫層析與酶免技術可進行快速檢測與定量測定，具有快速、靈敏、特異等特點。
5 血清肌鈣蛋白I（TnI）和肌鈣蛋白T（TnT）醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 原理
（1）心肌鈣蛋白T、I的快速檢測：應用免疫層析方法測定樣品中的特異抗原（CTnT、CTnI）。測試時滴加血清樣品於樣品槽，樣品通過毛細管效應沿試紙膜運動，如果樣品中含有特異抗原，試驗部位就出現色帶，在對照區域內應該有另一顏色條帶作爲實驗對照。
（2）心肌鈣蛋白T的ELISA法測定：生物素與親和素作用下的雙抗體夾心ELISA，用鏈黴親和素-生物素化的抗TnT單克隆抗體作包被物，依次於樣品中TnT抗原和酶標TnT單克隆的抗體反應，然後加入底物色原。酶催化底物顯色，由系列TnT標準制定的標準曲線，定量測定CTnT含量。
5.5 試劑
（1）心肌鈣蛋白T、I的快速檢測：CTnT免疫層析試紙條（德國寶靈曼公司專利）。
②孵育緩衝液。
③濃縮洗滌液。
④酶標結合物。
⑤CTnT標準品。
⑥底物色原：ABTS（二氨2，2疊氮）。
5.6 操作方法
①將包裝紙打開，標記上樣品編號。
③在10～15min內觀察色帶出現情況。
附註：
①試紙條只能用1次，重複使用無效。
②試紙條試驗區和對照區均不出現色帶，取另一試紙條重複檢測仍無結果，則表示試紙條失效。
③免疫層析技術測定CTnT、CTnI適合牀邊快速試驗，但只是定性或半定量，要真正瞭解病情嚴重程度及選擇治療措施還需定量測定。
①在包被板中分別加入標準血清，對照血清和病人標本於相應的孔內各50μl。
②每孔各加孵育緩衝液50μl，並輕輕混勻。
③室溫下孵育60min後洗滌三次，10min內完成。在吸水紙上用力拍打微孔。以除去殘留水滴。
④每孔各加入酶結合物100μl，輕輕混勻。
⑤倒空微孔板中的孵育液，用洗滌液將微孔洗三次，在吸水紙上用力拍打微孔，以除去殘留水滴。
⑥將200μl色原底物溶液加入相應的孔中，避光，輕輕混勻，靜置30min。
⑦用酶標儀在10min內，於405nm和630nm雙波長下測定吸光度值（OD值）。
附註：
①CTnT待測標本最好用血清，不要用抗凝血漿，因爲抗凝劑如：肝素、EDTA等對CTnT有影響。
②由於CTnT是心肌細胞損傷釋放出來的，所以儘量避免標本溶血，如果標本溶血很可能造成檢測結果增高。
③配製好孵育液不要冷凍保存，應放在2～8℃冷藏。
④實驗前應注意試劑有無失效，如變質，其顏色加深。
⑤爲了提高CTnT檢測的可靠性，應注意加樣的準確及其他操作過程，比色最好選用雙波長。
5.7 正常值
乾片法：TnI陰性 免疫法：TnT0～0.15μg/L 。
5.8 化驗結果意義
升高：心肌缺血損傷，如心肌梗死、急性心絞痛、不穩定型心絞痛、心臟手術後等。心肌損傷後、血中出現TnI、TnT時間最早、持續時間長，因此TnI、TnT是心肌損傷的一個較特異和較靈敏的指標，TnI較TnT更敏感。
（1）急性心肌梗死（AMI），發病後血中濃度很快增高，GTnT、CTnI，3～6h超過參考值上限值，GTnT 10～24h達峯值，10～15天恢復正常。CTnI 14～20h達峯值，5～7天恢復正常。即出現早，和CK-MB相當或稍早；消失慢，持續時間超過LD1，診斷的窗口期特別長，兼有CK-MB和LD1的優點。靈敏度GTnT爲50%～59%（0～6h），CTnI爲6%～44%；特異性GTnT爲74%～96%，CTnI爲93%～99%。據報道GTnT在診斷AMI時比CK-MB更爲靈敏，但有報道在腎臟疾病病人血樣中發現GTnT，所以特異性較差。GTnT比LD1/LD2比率在診斷AMI中更爲靈敏，且在腎病及其他疾病患者血液中未發現CTnI，所以CTnI是心臟受損時唯一的特異性標誌物。由於GTnT和CTnI消失慢，所以，可作爲心肌梗死後期標誌物。
（2）GTnT和CTnI可作爲心臟手術中心肌梗死症狀出現的指示物，當病人接受動脈搭橋手術時，若GTnT和CTnI含量增加，表明出現心肌梗死，而此時CK-MB含量並無變化。