3 基本信息
ICS 13.100
C 52
中華人民共和國國家職業衛生標準GBZ/T 312—2018《尿中N-甲基乙酰胺的測定 氣相色譜法》（Determination of N-methylacetamide in urine—Gas chromatographic method）由中華人民共和國國家衛生健康委員會於2018年08月16日《關於發佈〈尿中銻的測定 原子熒光光譜法〉等23項推薦性職業衛生標準的通告》（國衛通〔2018〕14號）發佈，自2019年01月01日起實施。
4 發佈通知
關於發佈《尿中銻的測定 原子熒光光譜法》等23項推薦性職業衛生標準的通告
國衛通〔2018〕14號
現發佈《尿中銻的測定 原子熒光光譜法》等23項推薦性職業衛生標準，編號和名稱如下：
GBZ/T 303—2018 尿中鉛的測定 石墨爐原子吸收光譜法（代替WS/T 18—1996）
GBZ/T 304—2018 尿中鋁的測定 石墨爐原子吸收光譜法
GBZ/T 305—2018 尿中錳的測定 石墨爐原子吸收光譜法
GBZ/T 306—2018 尿中鉻的測定 石墨爐原子吸收光譜法（代替WS/T 37—1996）
GBZ/T 307.1—2018 尿中鎘的測定 第1部分：石墨爐原子吸收光譜法（代替WS/T 32—1996）
GBZ/T 307.2—2018 尿中鎘的測定 第2部分 ：電感耦合等離子體質譜法
GBZ/T 308—2018 尿中多種金屬同時測定 電感耦合等離子體質譜法
GBZ/T 309—2018 尿中丙酮的測定 頂空—氣相色譜法
GBZ/T 310—2018 尿中1-溴丙烷的測定 頂空—氣相色譜法
GBZ/T 311—2018 尿中甲苯二胺的測定 氣相色譜法
GBZ/T 312—2018 尿中N-甲基乙酰胺測定 氣相色譜法
GBZ/T 313.1—2018 尿中三甲基氯化錫的測定 第1部分：氣相色譜法
GBZ/T 313.2—2018 尿中三甲基氯化錫的測定 第2部分：氣相色譜-質譜法
GBZ/T 314—2018 血中鎳的測定 石墨爐原子吸收光譜法 （代替WS/T 45—1996）
GBZ/T 315—2018 血中鉻的測定 石墨爐原子吸收光譜法 （代替WS/T 38—1996）
GBZ/T 316.1—2018 血中鉛的測定 第1部分：石墨爐原子吸收光譜法（代替 WS/T 20—1996）
GBZ/T 316.2—2018 血中鉛的測定 第2部分： 電感耦合等離子體質譜法
GBZ/T 316.3—2018 血中鉛的測定 第3部分：原子熒光光譜法
GBZ/T 317.1—2018 血中鎘的測定 第1部分：石墨爐原子吸收光譜法（代替 WS/T 34—1996）
GBZ/T 317.2—2018 血中鎘的測定 第2部分：電感耦合等離子體質譜法
GBZ/T 318.1—2018 血中三甲基氯化錫的測定 第1部分：氣相色譜法
GBZ/T 318.2—2018 血中三甲基氯化錫的測定 第2部分：氣相色譜-質譜法。
上述標準自2019年1月1日起施行，WS/T 18—1996、WS/T 37—1996、WS/T 32—1996、WS/T 45—1996、WS/T 38—1996、WS/T 20—1996、WS/T 34—1996同時廢止。
特此通告。
國家衛生健康委員會
2018年8月16日
5 前言
根據《中華人民共和國職業病防治法》制定本標準。
本標準按照GB/T 1.1—2009給出的規則起草。
本標準起草單位：浙江省醫學科學院、浙江省疾病預防控制中心、廣東省職業病防治院、上海市疾病預防控制中心。
本標準主要起草人：錢亞玲、唐紅芳、阮徵、王晗、朱海豹、劉丹華、吳邦華、溫憶敏、趙永信。
6 標準正文
6.1 1 範圍
6.2 2 規範性引用文件
下列文件對於本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用於本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用於本文件。
WS/T 97 尿中肌酐分光光度測定方法
WS/T 98 尿中肌酐的反相高效液相色譜測定方法
6.3 3 原理
尿液樣品（以下稱尿樣）經冷凍、離心、甲醇沉澱蛋白後，用極性毛細管色譜柱分離尿中的 N-甲基乙酰胺，經氮磷檢測器檢測，以保留時間定性，峯面積定量。
6.4 4 儀器
4.3 離心機：5000r/min。
4.4 微量注射器：1µL。
4.5 氣相色譜儀，具氮磷檢測器、自動進樣器。
儀器操作參考條件：
a) 色譜柱：30 m×0.53 mm×1.0µm 鍵合/交聯聚乙二醇(PEG-20M)；
b) 柱溫：初溫 100℃，保持 1min ，以 25℃/min 升溫至 170℃，保持 3min，以 10℃／min 升溫至
210℃，保持 3min；
c) 汽化室溫度：250℃；
d) 檢測室溫度：320℃；
e) 載氣(氮氣)流量：6.0 mL/min；
f) 分流比：10:1。
6.5 5 試劑
5.3 標準溶液：準確稱取一定量的 N-甲基乙酰胺（含量≥99%，用溫水溶化後吸取），用甲醇溶液稀釋並定容到一定體積，製成標準貯備液，置於 4℃冰箱中保存、備用。臨用時用甲醇溶液稀釋成濃度爲1.00 mg/mL 的標準應用液①和濃度爲 0.020mg/mL 的標準應用液②。
6.6 6 樣品的採集、運輸和保存
用具蓋聚乙烯塑料瓶收集職業接觸二甲基乙酰胺勞動者工作週末的班末尿 50mL，旋緊瓶蓋後於室溫下運輸，置-18℃冰箱中存放，可保存兩週。
6.7 7 分析步驟
7.1 空白檢查：取 1.0mL 水移至 5mL 具塞離心管中，加甲醇溶液 4.0mL，混勻後供測定，色譜鑑定應無干擾雜峯。
7.2 樣品處理：將冰凍尿樣放置在室溫解凍後，混勻，取 10mL 尿液置於 10mL 具塞離心管中，以 3000r/min 離心 10min，準確吸取上清液 1.0mL 移至 5mL 具塞離心管中，加入甲醇溶液 4.0mL，混勻，再以3000 r/min 離心 10min，上清液供測定。
7.3 標準曲線繪製：於 10 mL 容量瓶中準確加入 0.0 mL、0.10mL、0.20mL、1.00mL 的標準應用液②和 0.10mL、0.50mL 的標準應用液①，加水 2.0mL，用甲醇溶液定容到刻度，配製成濃度爲 0.0µg/mL、0.20µg/mL、0.40µg/mL、2.00µg/mL、10.0µg/mL、50.0µg/mL 的 N-甲基乙酰胺標準系列；參照儀器操作條件，將氣相色譜儀調節至最佳測定狀態，分別進樣 0.2μL，測定各標準系列，每個濃度重複測定 3 次。以保留時間定性，以 N-甲基乙酰胺的濃度（µg/mL）爲橫座標，測得的峯面積均值爲縱座標繪製標準曲線或計算迴歸方程。
7.4 樣品測定：用測定標準系列的操作條件測定尿樣上清液溶液，測得的樣品峯面積值由標準曲線或迴歸方程，得到樣品溶液中 N-甲基乙酰胺的濃度（µg/mL）。若樣品中 N-甲基乙酰胺濃度超過測定範圍，可用甲醇溶液稀釋後測定，計算時乘以稀釋倍數。
6.8 8 計算
C=5C0………… （1）
式中：
C—— 尿中 N-甲基乙酰胺的濃度，單位爲毫克每升（mg/L）；
5——尿樣前處理的稀釋因子；
C0——測得的尿樣溶液中 N-甲基乙酰胺的濃度，單位爲微克每毫升（μg/mL）。
8.2 爲了校正尿液的稀釋作用，尿樣採集後應按 WS/T 97 或 WS/T 98 儘快測定肌酐，校正公式見式（2）：
式中：
m——肌酐校正後尿樣中 N-甲基乙酰胺的濃度，單位爲毫克每克肌酐（mg/g 肌酐）；
c——尿中 N-甲基乙酰胺的濃度，單位爲毫克每升（mg/L）；
Cr——尿中肌酐的濃度，單位爲克每升（g/L）。
6.9 9 說明
9.1 本法測定範圍爲 0.20μg/mL ~50.0 μg/mL，檢出限爲 0.04 μg/mL，最低檢出濃度爲 0.2 mg/L（以取尿樣 1.0mL 用甲醇溶液定容至 5mL 計），相對標準偏差爲 1.5％~3.4％，加標回收率爲 96.0％~99.4％。
9.2 若採用微量注射器手動進樣，需將最終標準系列和尿樣上清液用甲醇溶液稀釋 5 倍，進樣體積調整爲 1.0µL。
9.3 測定過高濃度尿樣後，若接着測定低濃度尿樣，需應用甲醇溶液進樣數次以清洗色譜系統，直至無干擾峯。
9.5 干擾試驗：當工作場所空氣中二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺共存時，接觸者的尿樣中除代謝物 N甲基乙酰胺外，還有 N-甲基甲酰胺、乙酰胺、甲酰胺，以及未轉化的二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺。
結果表明另 5 種酰胺不干擾尿中 N-甲基乙酰胺的測定。若工作場所空氣中不共存二甲基甲酰胺，即尿中無 N-甲基甲酰胺時，也可採用規格爲 30 m×0.32 mm×0.25µm 的鍵合/交聯聚乙二醇（PEG）毛細管色譜柱測定。
9.7 尿樣測定的色譜分離圖見圖1。
注：
a——二甲基甲酰胺；
b——二甲基乙酰胺；
d——N-甲基甲酰胺；
e——乙酰胺；
f——甲酰胺。
圖 1 尿中共存物色譜分離圖
