4 唾液尿素氮的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 唾液尿素氮的測定原理
尿素在尿素酶作用下水解成NH4+和CO2,NH4+、NADH和α-酮戊二酸在穀氨酸脫氫脫氫酶作用下生成CO2、穀氨酸和NAD+。由於NADH被氧化成NAD+,在340nm吸光度降低,其吸光度降低值與尿素濃度成正比。
4.5 試劑
目前各廠家所產試劑盒並不完全相同。緩衝液多用0.1mol/L(pH 7.5±0.1)的磷酸鹽緩衝液。α-酮戊二酸5mmol/L,NADH 3.5mmol/L,尿素酶15000U/L,穀氨酸脫氫脫氫酶2000U/L,ADP 2mmol/L。
4.6 操作方法
試劑樣品比爲70∶1,37℃,340nm,延滯時間30s,讀數時間30s。具體分析條件可據試劑盒和儀器的介紹確定,最好每次定標。
4.7 正常值
4.1~7.3mmol/L (11.4~20.4mg/dl)。
4.8 化驗結果臨牀意義
4.8.1 (1)升高
C.利尿劑。
②尿素生成過剩:
A.高蛋白飲食。
B.組織壞死(異化亢進):絕食、發熱、感染症、糖尿病、癌、甲狀腺功能亢進症、外科手術、使用類固醇激素等。
③消化道出血。
4.8.2 (2)降低
①尿素生成減少:
B.低蛋白飲食。
A.多尿。
B.尿崩症。
4.9 附註
(1)該法最常出現的問題是試劑失效或反應系統被污染。試劑中最不穩定的是NADH和穀氨酸脫氫脫氫酶。在分析過程中應注意以下幾個方面:如用血漿則不能用含氟化合物或NH4+的抗凝劑,前者可抑制尿素酶活性,後者則可參與反應。
(2)試劑空白吸光度應大於1.2A,否則說明NADH被氧化。同種試劑、儀器,在分析條件不變的情況下,測定得F值應相對恆定,否則說明試劑失效。
(3)復溶試劑勿振動,以免酶變性失活。必須用無氨水復溶試劑。試劑杯、樣品杯、反應杯要無氨、潔淨、無酸鹼污染,應每次定標,並跟測質控血清。