3 概述
ET是一類活性多肽,廣泛分佈於各種組織中如血管平滑肌、腎臟、心臟、脊髓灰質、肝脾等。現已證明:內皮素-1僅由內皮細胞產生,內皮素-2可能產生於腎臟,內皮素-3可能主要產生於神經組織。內皮素的生物合成是由細胞內前內皮素原(203個氨基酸)經內肽酶水解生成的內皮素原(38~39個氨基酸組成),再經內皮素轉化酶作用形成內皮素(21個氨基酸殘基組成)。體循環中的內皮素不易透過血腦屏障,實驗表明內皮素主要分佈在下丘腦、丘腦、側腦室、蒼白球、尾狀核、腦幹包括腦橋等處。生理功能是目前所知的最強的縮血管物質,對心肌有正性肌力作用,在腦和脊髓中不僅作爲主遞質,也作爲輔遞質,中樞神經產生的ET主要作爲神經調節肽,以旁分泌和自分泌的形式參與血壓、行爲調節和神經信息的傳遞等。
5 腦脊液內皮素的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 腦脊液內皮素的測定原理
內皮素(endothelin,ET)是由血管內皮細胞釋放的21個氨基酸殘基所組成活性多肽。它是迄今所知收縮血管作用最強的物質。由於在血漿中濃度很低,樣品要經柱層析純化,125I-ET要求必須高純度和高比放射活性,以此建立超靈敏的放射免疫方法。樣品中微量的ET首先和限量抗體結合,然後再加入125I標記ET和抗體剩餘部分結合,即非平衡法來完成樣品中極微量ET的測定。
5.5 試劑
(1)緩衝液:取0.1mol/L pH7.4PB1000ml,加NaCl 2.5g,BSA 1g,NaN30.5g,Triton X-100 1ml。
(2)標準ET-1液:取每安瓿含有10ngET-1標準品,用緩衝液溶解,稀釋成100μl中含有0.25,1.0,10,100,1000pg。臨用前配製。
(3)125I-ET-1:取標記物用緩衝液稀釋至100μl中約6000~8000cpm。
(4)抗血清:用緩衝液稀釋至100μl結合125I-ET-I 100μl的30%~40%。臨用前配製。
(5)PR分離劑:取140g/L PEG20ml,加入蒸餾水70ml,羊抗兔IgG血清3ml,正常兔血清0.5ml,纖維素粉0.5g,加蒸餾水至100ml,放4℃12h後應用。
5.6 操作方法
使用放射免疫操作法。
5.7 正常值
83.9±13.8ng/L。
5.8 化驗結果臨牀意義
CSF中ET含量升高見於腦外傷、蛛網膜下腔出血(特別是伴腦血管痙攣者比未痙攣者更顯著)。
5.9 附註
創傷性休克(腦外傷等)CSF中ET水平升2~6倍。休克過程中組織缺血以及兒茶酚胺的大量釋放,都可促進ET的合成和稀放。血漿和CSF ET水平測定可以作爲休克的監測指標。