5 準備
採集待檢的標本。
6 方法
6.1 1.分泌物的塗片檢查
主要適用於男性。
(2)戴消毒手套後,用手指由陰莖根部向尿道口方向擠出膿液,用接種環或棉拭子蘸取膿液,輕輕塗於載玻片上,待其自然乾燥後加熱固定,做革蘭染色,然後鏡檢。
(3)在多形核白細胞內找到革蘭陰性的腎形雙球菌時,可明確診斷。
6.2 2.淋球菌的分離培養
(1)取材。
①男性患者從尿道取材時,可用細小棉拭子伸入尿道2~4cm,輕輕轉動後取出分泌物(應略帶黏膜)。
②女性患者取材時,先用陰道窺器暴露宮頸口,用無菌棉拭子拭去宮頸口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宮頸口內1~2cm,轉動並停留10~20s取出。
(2)標本取出後立即接種於培養基中,目前常用加入多黏菌素的血液瓊脂或巧克力瓊脂培養基。
(3)初次分離應使用5%~10%CO2燭缸,培養溫度以36℃爲宜,相對溼度80%以上,培養24~48h看結果。
(4)淋球菌在多黏菌素B血液瓊脂上經24~48h培養後,可形成圓形、凸起、溼潤、光滑、半透明或灰白色的菌落,邊緣呈花瓣狀,直徑0.5~1.0cm,用接種環觸之有黏性,如繼續培養,菌落體積增大,表面粗糙,邊緣皺縮。
6.3 3.淋球菌的鑑定——氧化酶試驗
(1)配製氧化酶試劑:0.5%~1%鹽酸二甲基對苯二胺水溶液。
(2)將溶液滴加於可疑菌落上,觀察顏色變化。也可先將試劑滴在一小張濾紙片上,然後挑取可疑菌落與之接觸,觀察顏色變化。
(3)菌落在接觸氧化酶試劑15~20s出現紅色,保持30s以上,然後逐漸變成紫色,最後呈黑色,爲氧化酶試驗陽性,證實爲淋球菌。