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第四節 熒光顯微鏡檢查法
第四節 熒光顯微鏡檢查法 一、熒光顯微鏡 熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光,通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本...
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第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用範圍
...爲三小塊,分別作冰凍切片、石蠟切片及超薄切片,進行熒光顯微鏡、光學顯微鏡及透射電鏡觀察。所應用的免疫細胞化學技術包括免疫熒光、免疫酶標及免疫電鏡,茲分述如下: (一)免疫熒光細胞化學技術的應用 自...
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流式細胞儀標本的製備
...胞免疫熒光技術是用於FCM檢測的標本準備,染色後也能在熒光顯微鏡下進行觀察,在某些實驗條件下,活細胞免疫熒光染色後的特異性和敏感性要優於滴片固定的常規間接免疫熒光的結果。 (一) 原理 活細胞表面保...
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流式細胞儀標本的製備
...胞免疫熒光技術是用於FCM檢測的標本準備,染色後也能在熒光顯微鏡下進行觀察,在某些實驗條件下,活細胞免疫熒光染色後的特異性和敏感性要優於滴片固定的常規間接免疫熒光的結果。 (一) 原理 活細胞表面保留有...
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科學家發現超亮光敏熒光基團
...破壞,因此能觀測的樣本也相當有限。這幾年超高分辨率熒光顯微鏡跨越了一大步,使得研究者可以從納米級觀測細胞突起的伸展,從而宣告200—750納米大小範圍的模糊團塊的時代結束了。這些超高分辨率熒光顯微鏡技術有些基...
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骨髓間充質幹細胞對肌腱移植物在骨隧道內癒合效果及示蹤的實驗研究
...行生物力學評估癒合效果,實驗組2、4、8周組織冰凍切片熒光顯微鏡和手術後即刻、3、7d行7.0TMR示蹤移植的BMSCs。[結果]SPIO、DiI能有效標記幹細胞。實驗組2、4、8周熒光顯微鏡觀察在腱骨界面有DiI標記的陽性細胞存在。7.0TMR未能...
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H1N1檢測突破極限幾分鐘內搞定
...符合病原體遺傳物質特定部分的一段DNA或RNA)連接。然後熒光顯微鏡可以探測到非常少量的這種病毒。在一項尚未發表的研究中,這組科學家成功地探測到了登革熱病毒和人類乳頭瘤病毒。該研究的協調者CelsoPintodeMelo說,這種...
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微泡超聲爆破助溶血栓機制的離體研究
...309-31127(重慶)爲了用熒光分子探針標記脂膜超聲微泡,熒光顯微鏡下觀察並追蹤熒光微泡在超聲作用下於血栓表面及內部分佈情況,爲超聲聯合微泡對體外血栓的助溶機制提供病理學依據。研究者將染料標記於脂膜微泡,結合...
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骨關節炎和類風溼關節炎患者滑液對中性粒細胞凋亡的影響
...者滑液對中性粒細胞凋亡的影響。方法通過流式細胞儀及熒光顯微鏡檢查19例RA和11例OA患者對體外培養粒細胞凋亡的影響。結果流式細胞儀及熒光顯微鏡檢測的體外培養粒細胞自發凋亡發生率分別爲43.6%和37.4%,加RA滑液組分別爲1...
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脫細胞骨基質對骨髓間充質幹細胞成骨及示蹤的觀察
...入後4周,X線及組織學觀察實驗側植人物爲中心成骨明顯,熒光顯微鏡下見新生骨組織中BCD陽性細胞較多。對照側材料逐漸吸收。結論ACBM作爲支架材料有助於MSCs的粘附、生長和成骨活性的表達。【關鍵詞】組織工程;支架材料;骨髓...
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第一節 免疫熒光細胞化學的原理
...細胞或組織中形成的抗原抗體複合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量...
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神經生物學應用:激光層照熒光顯微技術
...部或下部檢測熒光,激發光路與檢測光路垂直。激光層照熒光顯微鏡激發一個層面上的熒光基團,一次成像一個面,這種技術不僅大大降低了光毒性,還提高了長時間成像活樣本的能力。Light-sheet技術始於一百年前,原本是用來...
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四軍醫大西京醫院成功建立胃癌GC9811P-GFP細胞株
...粒轉染胃癌細胞株GC9811-P,經過G418篩選和克隆化培養,用熒光顯微鏡及流式細胞儀檢測轉染的EGFP基因在癌細胞體內外的表達,MTT比色法觀察細胞生長,Westernblot檢測轉染細胞和未轉染細胞腫瘤相關抗原的表達。結果發現,GC9811-PE...
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腺病毒介導VEGF基因在人骨髓基質幹細胞中的表達
...轉染組。取重組腺病毒AdVEGF165(MOI=20pfu/cell)感染hBMSe。熒光顯微鏡下觀察eGFP的表達,判斷感染效率及細胞生長情況,RTPCR檢測,ELISA和Westernblot檢測分別用於觀察基因轉染的表達。[結果]MOI=20pfu的轉染率已達80%以上,取此...
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第二節 熒光抗體技術
...胞表面的抗原進行反應,洗滌除去遊離的熒光抗體後,於熒光顯微鏡下觀察,在黑暗背景上可見明亮的特異熒光。 (一)標本的製作 熒光顯微技術主要靠觀察切片標本上熒光抗體的染色結果作爲抗原的鑑定和定位。因此...
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著名學者莊小威Cell解析精子精細結構
...ePhosphorylationandMotility”的文章,利用遺傳學,超高分辨率熒光顯微鏡,以及磷酸蛋白質組學等研究技術,破解了精子中一種關鍵離子通道:CatSper的結構特徵,這將有助於解析鞭毛的信號傳遞級聯放大過程。文章的通訊作者之一...
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細胞凋亡的檢測方法
...質分割 成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。 2熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡 一般以細胞核染色質的形態學改變爲指標來評判細胞凋亡的進展情況。 常用的DNA特異性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst33...
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小鼠視網膜新生血管模型熒光素灌注造影
...經過短暫固定後,通過顯微手術鏡遊離視網膜並鋪片,在熒光顯微鏡下觀察視網膜血管的分佈與形態。結果在熒光顯微鏡下清楚地觀察到全視網膜血管形態、走行,通過調節焦點,使視網膜淺層、深層以及二者交通支都清晰顯影...
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熒光顯微技術實現深層觀測新突破
...用動物蛋白質對光的選擇吸收特性,科學家早已發明了用熒光顯微鏡觀測活體動物內部器官組織和活細胞的技術,但光在動物內部組織的聚焦性能太弱,使顯微鏡下的圖像變得非常模糊,因此這項技術一直侷限於研究表層厚度不...
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德國開發出觀測活細胞中蛋白質相互作用新法
...費力。常用的“熒光共振能量轉移”(FRET)分析法是用熒光顯微鏡來觀測個別細胞。漢堡大學海因裏希·佩特實驗病毒學和免疫學研究所20日發佈公告說,傳統方法在統計學上缺乏說服力,也容易出錯。該研究所開發的新方法在...
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綠色熒光蛋白與H-2Kb融合基因的構建及表達
...融合基因。RT-PCR和Western印跡分析基因表達;激光共聚焦熒光顯微鏡觀察活細胞內熒光佈局。結果 RT-PCR和Western印跡分析表明融合基因獲得了正確表達。激光共聚焦熒光顯微鏡觀察結果表明,Kb-GFP融合分子象天然Kb分子一樣表達...
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第五節 實驗室檢查
...蟲易於認出,或用1600倍吖啶橙液1滴滴入新鮮標本上,用熒光顯微鏡觀察,可見蟲體帶有淡黃綠色的熒光,特別好看,直接鏡檢法檢出率極高。 二、塗片染色法 將分泌物塗在玻片上,待自然乾燥後可用不同染液染色,如...
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轉鐵蛋白受體在IgA腎病腎組織中的表達
...組)38例。用免疫熒光雙套色法標記的抗體,在激光共聚焦熒光顯微鏡下觀察四甲基羅丹明(TRITC)標記的CD71和異硫氰熒光素(FITC)標記的IgA在腎組織上的表達。結果CD71的表達強度與IgA的沉積程度相一致。CD71與IgA在原發組腎小球...
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Cad-Ⅱ基因轉染的兔骨髓間充質幹細胞自體移植術後的表達研究△
...10%FCS的DMEM繼續培養。在已建立的培養條件下孵育24h後,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達,檢測轉染效率。1.2.3MSCs膠原海綿複合體的構建及自體移植Cad-Ⅱ轉染48h後,按1×106將轉染MSCs注入1.5cm×1.5cm×1.5cm大小的膠原海綿...
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第一節 自身抗體的免疫組織化學檢測方法
...抑制或吸收等對照,以證明陽性結果的特異性。 3.熒光顯微鏡檢查陽性熒光呈明亮的黃綠色熒光,抗原組織成分呈現出陽性熒光時,即證明病人有對該組織成分的自身抗體,如細胞核呈明亮的黃綠色熒光即報告抗核抗體陽...
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重組起搏基因質粒構建生物起搏器的實驗研究
...結區域,體表心電圖監測犬竇房結功能改善情況,並通過熒光顯微鏡及RT-PCR檢測重組質粒pIRES2-EGFP-HCN2在體內外的表達。而對照組僅注射生理鹽水。結果構建了重組質粒pIRES2-EGFP-HCN2。熒光顯微鏡下可見轉染後的心房肌細胞呈綠色...
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氯化鈰誘導K562腫瘤細胞凋亡的實驗研究
...化鈰(CeCl3)誘導K562細胞凋亡的劑量效應關係。方法採用熒光顯微鏡定性檢測細胞凋亡;流式細胞術定量測定細胞凋亡率。結果較低劑量情況下,氯化鈰可以顯著引起細胞凋亡,3mg/L尤爲顯著,其中加稀土後24h收穫細胞的凋亡率...
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SET-EGFP重組表達質粒的構建及表達
...清的RPMI-1640培養基繼續培養。轉染24h後,PBS洗滌3次,在熒光顯微鏡下觀察重組蛋白的表達。 2結果 2.1SET目的基因的PCR擴增SET目的基因PCR擴增產物以1%瓊脂糖凝膠進行電泳,凝膠成像系統上觀察電泳結果,可見約在900bp有...
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基因工程化分泌神經營養因子-3的鼠胚神經幹細胞實驗研究
...NSC,用同時攜帶NT-3和GFP的lentivirus轉染構建工程化NSC:用熒光顯微鏡、鼠胚背根神經結培養(DorsalRootGanglion,DRG)、Westernblot等方法檢測基因工程NSC的轉基因表達。結果熒光顯微鏡觀察到幾乎100%的工程化NSC表達GFP,DRG培養和Westernblot...
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過敏性紫癜性腎炎腎組織中CD71表達的分子特徵及意義
...)38例。運用免疫熒光雙套色法標記的抗體在激光共聚焦熒光顯微鏡下觀察四甲基羅丹明(TRITC)標記CD71和異硫氰熒光素(FITC)標記IgA在腎組織上的分子表達。結果CD71在對照組患者的腎小球上呈現微弱表達或不表達,在NHSP組和I...