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第十七章 熒光免疫技術--第一節 有關熒光的基本知識
第十七章 熒光免疫技術 熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等於1941年首次採用熒光素進...
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第一節 免疫熒光細胞化學的原理
第一節 免疫熒光細胞化學的原理 免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素製成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作爲分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。...
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熒光分析法
一、基本原理 某些物質的分子能吸收能量而發射出熒光,根據熒光的光譜和熒光強度,對物質進行定性或定量的方法,稱爲熒光分析法(fluorescenceanalysis)。 熒光分析法具有靈敏度高、選擇性強、需樣量少和方法簡便等...
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原子熒光光譜的產生及其類型
...較高能態,接着又以輻射形式去活化,就可以觀察到原子熒光。原子熒光可分爲三類:共振原子熒光、非共振原子熒光與敏化原子熒光。3.6.1.1共振原子熒光原子吸收輻射受激後再發射相同波長的輻射,產生共振原子熒光。若原...
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第三節 熒光免疫測定
第三節 熒光免疫測定 一、時間分辨熒光免疫測定 以常用熒光素作爲標記物的熒光免疫測定往往受血清成分、試管、儀器組件等的本底熒光干擾,以及激發光源的雜射光的影響,使靈敏度受到很大限制。時間分辨熒光免...
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第二節 熒光抗體技術
第二節 熒光抗體技術 一、熒光抗體的製備 (一)抗體的熒光素標記 用於標記的抗體,要求是高特異性和高親和力的。所用抗血清中不應含有針對標本中正常組織的抗體。一般需經純化提取IgG後再作標記。作爲標記...
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熒光蛋白照亮細胞生物學
自從1962年科學家們首先在水母體內發現綠色熒光蛋白(GFP)以來,這種神奇的蛋白質技術獲得飛速地發展,成爲了生物學功能研究的重要工具之一。除了水母中的綠色熒光蛋白,研究人員還從其他的動物體內分離獲得了多種GFP...
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熒光抗體的製備
(一)免疫球蛋白的提取(二)熒光素1.熒光色素的基本條件(1)具有化學活性基團,如異硫氰基(-NCS)等,易與免疫球蛋白結合形成共價鍵。(2)對免疫球蛋白無毒性,不影響抗體活性。(3)熒光效應高,與蛋白結合需要...
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第四節 熒光顯微鏡檢查法
第四節 熒光顯微鏡檢查法 一、熒光顯微鏡 熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的光激發標本發射熒光,通過物鏡和目鏡系統放大以觀察標本...
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神奇的熒光蛋白:讓老鼠和豬也發光
據美國《連線》雜誌報道,憑藉在綠色熒光蛋白質(GFP)研究領域取得的重要成就,3名科學家上週最終問鼎諾貝爾化學獎,他們分別是馬丁·查爾菲(MartinChalfie)、錢永健(RogerY.Tsien)和下村修(OsamuShimomura)。綠色熒光蛋白質可以幫助科...
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第三節 免疫熒光細胞化學染色方法
第三節 免疫熒光細胞化學染色方法 一、標本製作 可製作塗片、印片、細胞單層培養物、組織切片,經適當固定或不固定,作免疫熒光染色用。 二、熒光抗體染色方法 (一)直接法 1.染色切片經固定後,...
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激光掃描共聚焦顯微鏡中熒光強度的測定條件研究
【摘要】目的本文對應用激光掃描共聚焦顯微鏡進行熒光強度的測定條件做了詳細的分析。方法選擇和設置激光掃描共聚焦顯微鏡的各參數,對用間接免疫熒光法檢測改性後的材料表面對人牙齦成纖維細胞分泌細胞外基質纖粘連...
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免疫熒光細胞化學染色方法
...胞單層培養物、組織切片,經適當固定或不固定,作免疫熒光染色用。 二、熒光抗體染色方法 (一)直接法 1.染色切片經固定後,滴加經稀釋至染色效價如1:8或1:16的熒光抗體(如兔抗人γ-球蛋白熒光抗體或兔抗...
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第二節 熒光抗體的製備
第二節 熒光抗體的製備 熒光抗體是免疫熒光細胞化學的重要技術之一,製備高特異性和高效價的熒光抗體必須選用高質量的熒光素和高特異性高效價的免疫血清。 一、熒光素 熒光是指一個分子或原子吸收了給予的...
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激光誘發熒光診斷早期肺癌的研究現狀
一、激光誘發熒光診斷腫瘤的基礎 所謂激光誘發熒光(laserinducedfluorescence,LIF),即物質分子被激光激發後,一部分處於激發態的分子在下降到基態的過程中,以光子形式釋放出它所吸收的能量的過程。因受激分子在由激發態下...
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免疫熒光非特異性染色的消除方法
...,其產生的原因主要可分爲以下幾點: (1)一部分熒光素未與蛋白質結合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結合。 (3)除去檢...
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我國具有綠色熒光遺傳特徵克隆豬豬崽增至4頭
記者2月17日從東北農業大學獲悉,中國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬今年1月成功產下的11頭豬崽中,又有2頭豬崽被確認具有綠色熒光遺傳特徵,從而使這窩豬崽中“熒光豬崽”總數由2頭增加至4頭。據介紹,2006年12月,由東北...
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俄科學家培育出最強熒光蛋白質
據國外媒體報道,莫斯科的科研人員培育出一種深紅色的熒光蛋白質,這種蛋白質發出的光穿透性極強,即使蛋白質位於小動物體內深處,其發出的光也可穿透生物體被外界看到,這使生物學家能夠更方便地監視活生物體的發病...
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熒光素鈉用於眼底熒光血管造影不良反應的臨牀觀察
【摘要】目的觀察熒光素鈉眼底血管造影時出現的不良反應。方法20%熒光素鈉快速靜脈推注(肘前靜脈)後邊拍照檢查邊觀察患者的反應。結果造影560例,17例出現不良反應,佔總數3.04%。結論眼底熒光血管造影是一種安全可靠...
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急性前部缺血性視神經病變的眼底熒光血管造影表現特點
...觀察分析23例(35眼)急性前部缺血性視神經病變的眼底熒光造影(FFA)圖像表現特點。方法收集本院做過FFA檢查的視盤水腫病例分爲兩組進行回顧性、對比性分析。Ⅰ組爲確診急性前部缺血性視神經病變患者,Ⅱ組包括急性視...
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科學家發現可開關型的熒光蛋白
奧勒崗大學(UniversityofOregon)的科學家發現綠色熒光蛋白(greenfluorescentproteins),在置入一個單氧原子後,能持續維持不發光的狀態達65小時之久,這項研究結果發表於近期的PNAS期刊。S.JamesRemington教授表示:「能控制熒光蛋白的熒光...
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Ⅳ型膠原在賁門癌自體熒光診斷中的意義初步探討*
...門組織癌變後Ⅲ、Ⅳ型膠原蛋白分佈的改變對組織的自體熒光產生的影響。方法採用免疫組化技術,半定量計分分析Ⅲ、Ⅳ型膠原在16例賁門癌病人正常組織和癌組織中的分佈差異。結果正常組織的基底膜呈現很強的Ⅳ型膠原抗體...
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血液透析患者視盤水腫的熒光素眼底血管造影表現特徵
【摘要】目的探討行血液透析過程中出現視盤水腫患者的熒光素眼底血管造影(FFA)的表現特徵。方法終末期尿毒症在血液透析過程中視盤水腫患者4例,在血液透析前行FFA檢查,分析其FFA的表現。結果4例患者FFA表現爲:視盤境...
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照明與近視關聯的研究進展
【關鍵詞】視力,低;採光;熒光;白熾光 照明與近視的關聯涉及2個方面:一是照明的“量,此方面的研究結論比較一致,即在1000lx以下的範圍內,照度越高越好[1-2];二是照明的“質,即學生接觸到的各種光源的...
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第五節 非特異性染色的消除方法
...,其產生的原因主要可分爲以下幾點: (1)一部分熒光素未與蛋白質結合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結合。 (3)除去檢...
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爲何三人分享?
...此重大發現,瑞典皇家科學院在其新聞公報中評價,綠色熒光蛋白“已經成爲現代生物科學最重要的工具之一”,三位科學家在不同階段對這一研究作出貢獻,是此次諾貝爾化學獎授予他們三人的原因。 其實,生物發光的現...
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熒光分析法
標題熒光分析法附錄序號附錄Ⅳ內容全文 E.熒光分析法 某些物質受紫外光或可見光照射激發後能發射出比激發光波長較長的熒光。物質的激發光譜和熒光發射光譜,可以用作該物質的定性分析。當激發光強度、波長、所...
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免疫熒光染色方法
(一)製片選無自發性熒光的石英玻片或普通優質玻片,洗淨後浸泡於無水乙醇和乙醚等量混合液中。用時取出用綢布擦淨。將待檢樣品如組織塊剪成適當大小印壓於玻片上。也可採用冰凍切片或石蠟切片樣品。(二)固定除研...
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熒光蛋白“光控開關”的結構基礎確定
美國科學家最新發現了決定熒光蛋白髮光的分子機制,並通過插入一個單氧原子使熒光蛋白的處於“關閉”狀態長達65小時。該研究成果在線發表於《美國國家科學院院刊》(PNAS)上。領導該研究的美國俄勒岡大學物理學和分子...
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諾獎得主錢永健:愛“色”的熒光頑童
...引人注目。 錢永健一走上臺,燈光一暗,投影片上的熒光水母開始舞動,上千名聽衆屏息聆聽他解說發明綠色熒光的重要過程,原本躲在顯微鏡下的熒光蛋白宛若正在上演一場科學家導演的熒光科幻電影。 漂亮的顏色與...