3 血清已糖的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 取材
3.4 血清已糖的測定原理
在已糖激酶催化下，葡萄糖和ATP發生磷酸化反應，生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）與ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶（G6PD）催化下脫氫，生成6-磷酸葡萄糖酸（6-GP），同時使NADP＋還原成NADPH。反應式如下：
根據反應方程式，NADPH的生成速率與已糖濃度呈正比，在波長340nm監測吸光度升高速率，計算血清中已糖濃度。
3.5 試劑
（1）酶混合試劑的成分與濃度：
緩衝液（pH7.5） 50mmol/L
MgSO4 2mmol/L
ATP 2.0mmol/L
NADP＋2.0mmol/L
HK ≥1500U/L
G6PD 2500U/L
根據試劑盒介紹復溶後，混合配製成酶試劑，置棕色瓶中放冰箱保存，約可穩定7天。
（2）5mmol/L已糖標準應用液：見GOD法。
3.6 操作方法
（1）速率法測定（以半自動分析儀爲例）：
①主要參數：
係數 8.2
孵育時間 30s
監測時間 60s
波長 340nm
吸樣量 0.5ml
溫度 37℃
②加樣：37℃預溫酶混合試劑1000μl，加血清20μl，立即吸入自動分析儀，監測吸光度升高速率（△A/min）。
③計算：
（2）終點法測定：取16mm×100mm試管，按表1編號與操作。
以上各管充分混勻，在37℃水浴，準確放置10min，分光光度計波長340nm、比色杯光徑10mm，用蒸餾水調零，分別讀取各管吸光度（Au、Ac、As、Ab）。
3.7 正常值
6.74±0.07mmol/L（121.5±1.3mg/dl）。
3.8 化驗結果臨牀意義
升高：肝硬化、慢性肝炎。
3.9 附註
（1）已糖激酶方法的特異性比葡萄糖氧化酶法高，是目前公認爲測定血糖的參考方法，適用於自動分析儀。輕度溶血、脂血、黃疸、維生素C、氟化鈉、肝素、EDTA和草酸鹽等不干擾本法測定。因爲從紅細胞釋放出的有機磷酸酯和一些酶能消耗NADP，故干擾本法測定。
（2）雖然根據NADPH的摩爾吸光度可以直接計算血清葡萄糖濃度（如Boehringer、Roche等試劑盒），但建議最好同時測定標準管和空白管（蒸餾水代替血清）。此時計算公式應爲：
