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兩種分離人血清蛋白質電泳技術的比較研究
【摘要】目的比較雙向電泳和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術分離人血清中蛋白質的效果。方法雙向電泳直接分離人血清中的蛋白質;採用改進後的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離去除白蛋白的人血清樣品。結果雙向電泳圖譜顯示,樣品...
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SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白分子量,是根據大多數蛋白都能與陽離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)按重量比結合成複合物,使蛋白分子所帶的負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷,消除了不同蛋白分子的電荷效應,使蛋白分...
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生化實驗講義(理論部分)四--電泳技術
...aymond和Weintraub利用人工合成的凝膠作爲支持介質,創建了聚丙烯酰胺凝膠電泳,極大地提高了電泳技術的分辨率,開創了近代電泳的新時代。30多年來,聚丙烯酰胺凝膠電泳仍是生物化學和分子生物學中對蛋白質、多肽、核酸等...
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PCR擴增產物的電泳分析
凝膠電泳分瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳兩種. 一、瓊脂糖凝膠電泳:瓊脂糖凝膠電泳是一種非常簡便、快速、最常用的分離純化和 鑑定核酸的方法.瓊脂糖是從海藻中提取的一種線狀高聚物.根據瓊脂糖的溶解溫度,...
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電泳技術發展簡史
...aymond和Weintraub利用人工合成的凝膠作爲支持介質,創建了聚丙烯酰胺凝膠電泳,極大地提高了電泳技術的分辨率,開創了近代電泳的新時代30多年來,聚丙烯酰胺凝膠電泳仍是生物化學和分子生物學中對蛋白質、多肽、核酸等生...
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生化實驗講義(理論部分)四--電泳技術(一)
...aymond和Weintraub利用人工合成的凝膠作爲支持介質,創建了聚丙烯酰胺凝膠電泳,極大地提高了電泳技術的分辨率,開創了近代電泳的新時代。30多年來,聚丙烯酰胺凝膠電泳仍是生物化學和分子生物學中對蛋白質、多肽、核酸等...
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SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白分子量,是根據大多數蛋白都能與陽離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)按重量比結合成複合物,使蛋白分子所帶的負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷,消除了不同蛋白分子的電荷效應,使蛋白分...
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用噬菌體抗體庫分離NK細胞抑制受體特異性的ScFv片段
...由測定噬菌體的菌落形成單位及DNA酶切圖譜分析。ELISA、聚丙烯酰胺凝膠電泳及免疫印跡分析ScFv特異性及免疫學特徵,並進行DNA的序列測定。結果 5次篩選後,噬菌體得到200倍的富集,酶切圖譜也顯示某種構型噬菌體的富集。40...
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丙烯酰胺凝膠電泳
聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作爲支持介質的電泳方法。在這種支持介質上可根據被分離物質分子大小和分子電荷多少來分離。聚丙烯酰胺凝膠有以下優點:①聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和N,N‘甲叉雙丙烯酰胺聚...
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轉移電泳技術
(一)原理轉移電泳是將經聚丙烯酰胺凝膠電泳分離出的蛋白質譜直接轉移到硝酸纖維膜上,而形成固定相,並同時排除各種干擾物質,保持其天然構象和生物學活性,完成在凝膠中難以進行的各種生物試驗。(二)材料1.瓊...
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PCR-SSCP技術
...在聚丙烯酰胺凝膠中受排阻大小不同.因此,通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE),可以非常敏銳地將構象上有差異的分子分離開.作者稱該方法爲單鏈構象多態性(Single-StrandConformationPolymorphism,SSCP)分析.在隨後的研究中,作者又...
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唐山地區兒童腹瀉病中輪狀病毒感染的流行病學特徵研究
關鍵詞輪狀病毒;腹瀉;聚丙烯酰胺凝膠電泳;兒童 1對象與方法 1.1研究對象 本組研究對象爲唐山市中心區四所綜合醫院2003年1月1日—2005年12月31日因患腹瀉住院的社區感染兒童以及住院期間患腹瀉病的院內感染兒童...
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間接ELISA法測定大腸桿菌DH5α菌體蛋白含量的實驗研究
...ELISA方法。經初步測定,該方法的靈敏度爲0.5ng/ml,比聚丙烯酰胺凝膠電泳的考馬斯亮藍染色方法的靈敏度高3000倍,比銀染色方法的靈敏度高150倍。在20~620ng/ml範圍內測定呈直線關係,直線相關係數爲0.895。經8次重複測定,...
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中國農業科學院基因工程概論試題(博士)2003年-1998年
...裏)1.什麼是基因工程?試述在農業生產上的意義。2.聚丙烯酰胺凝膠電泳與瓊脂糖電泳在應用中有何不同和特點。3.雙脫氧法測序的基本原理是什麼?4.SOUTHERN印跡的基本原理及其應用。5.試述兩種轉基因方法並說明其原...
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載脂蛋白E基因多態性與早發冠心病遺傳關係研究
...4外顯子內的227bp片段,繼以限制性內切酶CfoI酶解消化,8%聚丙烯酰胺凝膠電泳,最後銀染顯帶判定基因型,並計算等位基因頻率。共檢測了52例早發冠心病患者和110例正常對照者的apoE基因型及等位基因頻率。結果早發冠心病患者...
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人氣管粘膜上皮細胞抗菌多肽探討
...細胞分泌液對綠膿桿菌的抗菌作用。方法:採用酸性尿素聚丙烯酰胺凝膠電泳(AU-PAGE)分析人支氣管肺泡灌洗液陽離子蛋白成分;氣液界面無血清培養人氣管上皮細胞;電泳凝膠瓊脂糖彌散法和瓊脂糖彌散法檢測支氣管肺泡灌...
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第十七章 血清載脂蛋白分離純化及其鑑定--第一節 載脂蛋白分離純化
...入柳硫汞或疊氮,鈉等防腐劑以免細菌污染。 (三)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離純化法 電泳技術廣泛應用於生命科學的領域裏。在載脂蛋白的分離純化中,電泳分離技術也是一種常被採用的方法。 因支持物的不同,電...
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雙向電泳在大鼠脊髓蛋白質組分析中的應用
...相同的蛋白質,根據分子量不同再次得到分離。與通常的聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)相比,能獲得更多的信息。1雙向電泳中蛋白樣品的製備是關鍵環節SD大鼠用2%的戊巴比妥鈉進行腹腔麻醉,活體狀態下取出脊髓,加入裂解...
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373A型DNA測序儀的應用體會
...止法(Dye-primer或Dye-terminator)進行DNA測序反應,變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,實時檢測自動讀序。該儀器與其它儀器相比較,其顯著特點是它能用4種不同的熒光分子分別標記4種反應引物(Dye-primer法)或4種dNTP(Dye-termina...
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多發性骨髓瘤IgH檢測的探討
...NaCl沉澱,提取DNA,TE溶解紫外分光光度計測出DNA含量,用聚丙烯酰胺凝膠電泳鑑定效果。引物由上海生物工程技術服務有限公司合成,IgH序列爲:5′-ACACGGCCGTGTATTACTGT-3′,5′-GTGACCAGAGTACCTTGGCCCCAG-3′,擴增產物110bp。陽性模板選擇...
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電泳法
...染色,用水洗去多餘的染色液至背景無色爲止。 四、聚丙烯酰胺凝膠電泳法 1.儀器裝置 通常由穩流電泳儀和圓盤或平板電泳槽組成。其電泳室有上、下兩槽,每個槽中都有固定的鉑電極,鉑電極經隔離電線接於電泳儀...
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精神分裂症與細胞色素P4502D6基因多態性關聯研究
...物爲268bp的片段。用限制性內切酶HpaⅡ(37℃)酶切過夜,12%聚丙烯酰胺凝膠電泳,EB染色1h後分析結果,野生型產生188bp和82bp片段,突變型則產生168bp,82bp和20bp片段。CYP2D6B基因擴增[4]:引物1(5‘-GCCTTCGCCAACCACTCCG-3‘),引物2(5‘-AA...
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三種方法檢測新生兒輪狀病毒感染的效果比較
關鍵詞:輪狀病毒;腹瀉,病毒學;酶聯免疫吸附測定;聚丙烯酰胺凝膠電泳;電鏡 【摘要】 目的 比較三種方法檢測新生兒輪狀病毒(RV)感染的效果。方法 採用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)、電鏡(EM...
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尿毒症患者血清蛋白質組份的雙向凝膠電泳-飛行時間串聯質譜分析研究
...pH梯度(IPG)等電聚焦(IEF)爲第一向和垂直十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)爲第二向,分別對尿毒症患者和正常者血清蛋白質樣品進行二維雙向電泳,經銀染顯色和ImageMaster2D5.0軟件分析凝膠圖像,對有差異性表達的尿毒...
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核酸電泳的指示劑與染色劑
...Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染色黑褐色.主要用於聚丙烯酰胺凝膠電泳染色.也用於瓊脂糖凝膠染色.其靈敏度比EB高200倍.但銀染色後,DNA不宜回收.作者:
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常用的電泳緩衝液
...②鹼性電泳緩衝液應現用現配。③tris-甘氨酸緩衝液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。2×sds凝膠加樣緩衝液:100mmol/ltris·hcl(6.8)200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)4%sds(電泳級)0.2%溴酚藍20%甘油不含dtt的2×sds凝膠加樣緩衝液可保存於室溫,應在...
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預測早產兒視網膜病的可能生物學指標
...似的pI爲7-9的蛋白質在這些患兒中少見。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和序列分析檢測到這些蛋白質由alpha-、beta-和gamma球蛋白鏈組成。僅pI4-5的蛋白質中可見beta球蛋白鏈中Asn139部分脫酰胺。因此可見,上述發現提...
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北京大學醫學部1991年碩士入學考試生物化學試題
....膽汁酸3.纖維素4.腸道PH⑶測定蛋白質分子量的方法()1.聚丙烯酰胺凝膠電泳2.SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳3.紫外分光光度法4.超速離心⑷下列哪種維生素參與生物氧化()1.生物素2.核黃素3.硫胺素4.尼克酰胺⑸參與轉移一碳單位的化...
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Pick病的蛋白質組研究
...蛋白質以固相pH梯度等電聚焦爲第一向,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)爲第二向進行雙向電泳(2-DE),圖像分析軟件ImageMaster2DElite分析電泳圖譜,基質輔助激光解析/電離-飛行時間(MALDI-TOF)質譜或MALDI-TOF/TOF串聯質譜鑑...
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多數刺梨多糖組分具神經營養活性
...分離純化,得到RRTP-1~RRTP-8共8個多糖組分。凝膠柱色譜和聚丙烯酰胺凝膠電泳鑑定純度,採用大鼠嗜鉻細胞瘤PC12細胞對各組分的神經營養活性進行篩選,並對純化的單一多糖進行活性定量測定。結果發現,RRTP-1和RRTP-3爲相對分子...