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熒光定量PCR技術在女性泌尿生殖系感染中的應用
【摘要】目的探討熒光定量PCR(FQ—PCR)檢測技術在女性泌尿生殖系感染診斷中的應用。方法用熒光定量PCR法、普通PCR法及免疫熒光技術對STD門診有泌尿生殖感染者178例女性分泌物進行了沙眼衣原體(CT)、解脲支原體(UU)、單...
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定量PCR技術
定量PCR(PolymeraseChainReaction)技術有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術是指以外參或內參爲標準,通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測,進行PCR起始模板量的定量。 廣義概念下的定量PCR技術可以分爲五種類...
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熒光定量PCR與沙原衣原體培養在檢測泌尿生殖道沙眼衣原體時的對比分析
【摘要】目的探討熒光定量PCR在檢測泌尿生殖道沙眼衣原體感染診斷中的價值。方法我們對性病門診600例患者隨機分成兩組,一部分採用熒光定量PCR檢測沙眼衣原體,一部分採用沙眼衣原體培養的方法進行檢測分析。結果沙眼衣...
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熒光定量RT-PCR檢測AFPmRNA基因表達
【摘要】目的建立熒光定量RT-PCR方法檢測AFPmRNA基因表達的方法,瞭解肝癌組織中AFPmRNA的表達水平。方法用熒光定量PCR方法檢測33例肝癌及癌旁組織AFPmRNA表達水平。結果33例肝癌組織和癌旁組織AFPmRNA表達均陽性,肝癌組織AFPmRNA的...
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尿嘧啶DNA糖基化酶在熒光定量PCR技術中的應用
【摘要】目的建立尿嘧啶DNA糖基化酶在熒光定量PCR技術中應用,以控制PCR技術中可能出現的污染問題。方法用乙肝病毒HBVDNA核酸擴增熒光定量檢測試劑盒構建模擬污染源的U-DNA,經尿嘧啶DNA糖基化酶消化後,用試劑盒檢測其抗污...
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胎盤組織熒光PCR診斷早期先天梅毒的研究
...梅毒對照孕婦的胎盤和臍帶組織進行梅毒螺旋體DNA的熒光定量PCR檢測,並與常規臨牀及血清學綜合診斷方法比較。結果34例梅毒孕婦的胎盤組織中,11例熒光PCR爲陽性,陽性率爲32.35%,30例非梅毒孕婦的胎盤和臍帶樣本熒光PCR均爲...
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實時PCR檢測HSV2DNA的方法學評價及應用
【摘要】目的對本室利用TaqManMG技術建立的HSV2實時定量PCR法進行方法學評價及臨牀應用。方法收集60名近期有流產史婦女的全血及血清標本,分別用FQPCR和ELISA法同時檢測,並進行比較;另對FQPCR從重複性、靈敏度、線性範...
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應用循環逆轉錄PCR技術檢測丙型肝炎病毒RNA
...一種簡便有效的提高RNA檢測靈敏度的方法,並適合應用於定量分析 中圖分類號:R373.2+1;Q522 文獻標識碼:A 文章編號:1000-8721(2000)03-0266-04DetectionofHepatitisCVirusRNAbyCirculatoryReversetranscription-PCRCHENRan,WUDi,TANGRong...
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血紅蛋白和肝素對FQ-PCR檢測HBVDNA結果的影響
【摘要】目的探討血紅蛋白和肝素對熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)定量檢測乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的影響。方法採用沉澱煮沸裂解法提取含不同濃度血紅蛋白或肝素的血漿標本中的HBVDNA,應用FQ-PCR方法對HBVDNA進行定量檢測。...
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熒光定量和定性PCR平行檢測慢性乙型肝炎患者243人份血清中HBV-DNA結果對比研究
...9月在我院就診的慢性乙型肝炎患者243人份血清進行HBV-DNA定量和定性PCR檢測對比研究,探討HBV-DNA熒光定量PCR和定性PCR的關係。方法採用實時熒光定量PCR方法,檢測試劑爲深圳匹基公司產品,定量和定性PCR按照常規操作手冊進行。...
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實時熒光定量PCR在乙型肝炎診斷中的臨牀價值探討
【摘要】目的探討定量HBV-DNA與HBV其他標誌物(HBVM)及乙肝前S1蛋白(Pre-S1)檢測間的關係,正確評價其臨牀意義。方法採用實時熒光定量PCR(FQ-PCR)對360例血清HBVM陽性患者進行HBV-DNA檢測,並且還對其中162例HBsAg、HBeAg、HBcAb(即1.3.5)陽...
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熒光定量PCR檢測NG、CT和UU三種性病混合感染的分析
...T+UU感染率最高,CT+UU+NG感染率最低。【關鍵詞】實時熒光定量PCR;感染;淋球菌;沙眼衣原體;解脲支原體 淋球菌(NG)、沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)通過性傳播所致的泌尿生殖道感染者日益增多,且有逐年上升[...
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結核分枝桿菌熒光定量PCR檢測方法的建立與應用
【摘要】 目的建立結核分枝桿菌的熒光定量PCR檢測方法,探討熒光PCR檢測痰標本中結核分枝桿菌的應用價值。方法根據結核分枝桿菌基因保守序列設計引物和探針,並構建標準品。對102例培養塗陽的結核痰液標本和45例非結核...
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時間分辨熒光免疫法檢測乙肝E抗體陽性及PCR定量陰性的意義
...臨牀意義。方法:收集50例乙型肝炎血清學E抗體陽性且PCR定量結果〈1.00×10^3copies/ml及肝功正常的血清標本,用時間分辨熒光免疫分析技術進行定量檢測,然後進行結果分析。結果:用TRFIA方法檢測,有18例血清標本HBsAg、HBeAb...
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HBV前C區部分序列亞克隆與FQ-PCR標準曲線的製備
...病毒性肝炎早期診斷價值和意義並基於此靶基因製備熒光定量PCR標準曲線。方法設計特異性引物,將pBR322-HBV質粒前C區部分序列PCR產物AT亞克隆至pBS-T載體,提取和純化質粒DNA,製作標準品並在FQ-PCR儀上得到標準曲線,進而對精確...
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免疫PCR(ImmunoPCR,Im-PCR)
...,用酶或同位素標記抗體可使檢測的敏感性提高,常用的定量檢測方法ELISA和RIA均基於標記分子可以使檢測的信號增強。免疫PCR是在ELISA的基礎上建立起來的新方法,用PCR擴增代替ELISA的酶催化底物顯色。PCR具有很強的放大能力,...
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熒光定量PCR檢測不孕婦女生殖道沙眼衣原體和解脲支原體
...的生殖道沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)感染;比較熒光定量PCR法與UU培養或金標法檢測CT的敏感性。方法219例不孕婦女患者取宮頸分泌物,用熒光定量PCR法檢測219例分泌物標本UU的DNA,同時對196例標本進行CT的DNA檢測。另選68例正常...
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熒光定量PCR檢測慢性前列腺炎病原體及臨牀應用
【摘要】目的應用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)技術準確檢測久治不愈或複發性慢性前列腺液中病原體DNA含量,爲臨牀診斷和治療提供依據。方法應用熒光探針標記引物的熒光定量PCR對246份前列腺液標本進行淋球菌(NG)、沙...
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熒光定量聚合酶鏈反應檢測弓形蟲DNA及其臨牀應用
熒光定量聚合酶鏈反應檢測弓形蟲DNA及其臨牀應用中華微生物學和免疫學雜誌2000年第4期第20卷檢測技術作者:符生苗 阮和球 陳鑫萍 龐海雲 徐文 凌奕 楊力芳單位:符生苗阮和球陳鑫萍龐海雲凌奕(570311海口,海南省...
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抗凝劑對定量檢測乙型肝炎病毒DNA的影響
【摘要】 目的探討用實時熒光定量PCR技術檢測乙型肝炎病毒DNA拷貝數時,不同抗凝劑對乙型肝炎病毒DNA定量檢測的影響。方法採集40例乙型肝炎患者血液,分別置於不含抗凝劑及含肝素鈉、枸緣酸鈉、EDTA-K2抗凝劑的無菌試管...
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反覆凍融對熒光實時定量PCR質粒標準品的影響研究
...盒所配的低濃度標準品應避免反覆凍融。【關鍵詞】實時定量PCR;質粒DNA標準品ResearchonstabilityofplasmidDNAstandardsforfluorescencequantificationreal-timePCR WANGHeng-li,CHENHong-tao,KONGMei,etal.DepartmentofClinicalLaboratory,TheFifthAffiliatedHospitalofSunYat-senUni...
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FQ-PCR檢測乙型肝炎HBVM和前S1抗原不同模式的HBV-DNA含量及意義
【摘要】目的評價實時熒光定量PCR(FQ-PCR)技術在乙型肝炎診斷和治療中的應用價值。方法用FQ-PCR和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)同時檢測693份初診標本和治療3個月前後231份複診病人標本的HBVM和HBV-DNA。結果HBVM模式共16組,其中HBeA...
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熒光定量RT-PCR快速檢測手足口病病原研究
【摘要】 目的建立熒光定量RT-PCR技術用於檢測手足口病的腸道病毒。方法利用TaqMan技術,設計一對共引物及探針,建立、優化反應體系後,構建質粒標準品,利用10倍稀釋法建立相對定量標準曲線,根據TCID50倍比稀釋,建立...
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如何看待病毒性肝炎的基因診斷
...映血液中病毒含量的變化,但試劑價格十分昂貴,在HBVDNA定量檢測中,線性範圍的下限較高,HCVRNA的定量檢測中敏感性不夠,難於在臨牀上廣泛應用。90年代後期,Digene公司推出了第二代雜交捕獲法檢測HBVDNA的試劑,通過化學發光捕獲...
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乙型肝炎病毒熒光定量檢測與其血清標誌物檢測結果的相關性研究
【摘要】目的用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)方法檢測乙型肝炎病毒HBV-DNA,瞭解HBV-DNA熒光定量檢測結果與HBV免疫標誌物不同類型之間的關係。方法對220例慢性乙型肝炎患者,用FQ-PCR方法檢測乙型肝炎病毒HBV-DNA含量,用ELISA方...
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培養法與熒光定量聚合酶鏈反應法檢測生殖道解脲支原體的方法學比較
【摘要】目的比較液體培養法和熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)法2種常用檢測解脲支原體(Uu)的方法,並分析其優缺點。方法應用培養法與FQ-PCR法對85例不孕不育婦女的宮頸拭子標本進行解脲支原體檢測。結果種檢測方法符合...
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乙肝病毒核酸定量測定的臨牀價值
【摘要】目的研究乙型肝炎患者HBV-DNA定量檢測與血清學免疫標誌物及丙氨酸氨基轉移酶(ALT)水平之間的關係。方法用熒光定量PCR法檢測326份乙肝表面抗原陽性標本中的HBV-DNA,同時檢測血清免疫標誌物和ALT。結果326例乙肝表面抗...
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客觀評價乙肝病毒基因檢測在臨牀診斷中的意義
...V病毒,結果分別報告爲“陽性”或“陰性”。 2HBV-DNA定量檢測 用於HBV-DNA定量檢測的方法主要有:熒光PCR法、競爭PCR法、PCR酶聯免疫吸附法、熒光標記物法和PCR酶聯化學發光等方法。這些方法各有優缺點,所使用的儀器設...
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乙型肝炎病毒熒光定量檢測與其血清標誌物檢測結果的相關性研究
【摘要】目的用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)方法檢測乙型肝炎病毒HBV-DNA,瞭解HBV-DNA熒光定量檢測結果與HBV免疫標誌物不同類型之間的關係。方法對220例慢性乙型肝炎患者,用FQ-PCR方法檢測乙型肝炎病毒HBV-DNA含量,用ELISA方...
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原發性膽汁性肝硬化外周血中顆粒溶素的基因表達水平的檢測
【摘要】目的用實時熒光定量RT-PCR的方法測定PBC患者外周血中GNLY的基因表達水平,探討GNLY在原發性膽汁性肝硬化(PBC)的表達及意義。方法採用Taqman探針技術,以18sRNA爲內對照,測定了60例PBC性心臟病患者外周血中GNLYmRNA的含量...