3 羊水肌酐的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 取材
3.4 羊水肌酐的測定原理
除蛋白鹼性苦味酸法:肌酐與鹼性苦味酸反應,生成橙紅色復合物,在510nm波長比色測定。
3.5 試劑
(1)40mmol/L苦味酸溶液:稱取苦味酸(AR)9.3g,溶於500ml、80℃蒸餾水中,冷卻至室溫,然後用蒸餾水稀釋至1000ml,以酚酞作指示劑,用0.1mol/L氫氧化鈉滴定結果,用蒸餾水稀釋至0.04mol/L,貯存於棕色試劑瓶中備用。
(2)0.75mol/L氫氧化鈉:稱取氫氧化鈉(AR)30g加適量蒸餾水溶解後,冷卻至室溫,用蒸餾水稀釋至1000ml。
(3)35mmol/L鎢酸溶液
①取100ml蒸餾水,加入聚乙烯醇1g,加熱助溶,冷卻。
②取11.1g鎢酸鈉,完全溶解於300ml蒸餾水中。
③取300ml蒸餾水,沿壁慢慢加入濃硫酸2.1ml,冷卻。取1000ml容量瓶一隻,①液加入②液中,再與③液混合,加蒸餾水至刻度,置室溫保存,至少可穩定一年。
(4)10mmol/L肌酐標準應用液:精確稱取肌酐113mg(分子量113.12),用適量0.1mol/L鹽酸溶解,並移入100ml容量瓶中,再以0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,置於冰箱內保存,可穩定一年。
(5)10μmol/L肌酐標準應用液:精確吸取10mmol/L肌酐標準應用液1.0ml,加入1000ml容量瓶中,以0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度,置冰箱內保存。
3.6 操作方法
(1)取16mm×110mm試管一支,加入羊水0.5ml,然後加入35mmol/L鎢酸溶液4.5ml,充分混勻。3000r/min離心10min,取上清液備用。
(2)另取試管三支,分別標明測定管“U”、標準管“S”、空白管“B”。
(3)於測定管內加入無蛋白血濾液,標準管內加入肌酐標準應用液各3.0ml,空白管內加入蒸餾水3.0ml,然後各管分別加入0.04mol/L苦味酸試劑1.0ml,加入0.75mol/L氫氧化鈉溶液1.0ml。
(4)顛倒混勻,放置15min,在510nm波長,用分光光度計,以空白管調“0”,分別讀取測定管與標準管吸光度。
3.7 正常值
早期妊娠:70.7~97.2μmol/L (0.8~1.1mg/dl)
足月妊娠:159.1~353.6μmol/L (1.8~4.0mg/dl)
3.8 化驗結果臨牀意義
妊娠後期羊水肌酐>176.8μmol/L,表示胎兒的肌肉重量,並表明有功能的腎小球已有一百萬,爲胎兒腎臟成熟度。羊水肌酐降低者,胎兒雖成熟但出生體重過低。孕婦患腎臟病或妊娠高血壓綜合徵(妊高症)時,羊水肌酐可僞增,故亦應檢查孕婦的血清肌酐。
3.9 附註
(1)測定肌酐時,各管溫度須降至室溫,再行比色,因爲溫度升高可使苦味酸溶液顏色加深,但標準與測定並不一致。
(2)爲了確保測試結果準確可靠,每次測試均應包括質控血清,所測質控值須落在允許範圍內之。
(3)WHO推薦肌酐苦味酸比色法OCV爲±0.4%,RCV爲±8%,我國推薦的RCV爲8%。
(4)如自制質控血清,要特別注意肝炎病毒的傳染,並做好消毒處理工作。
(5)標本樣如當天不測,可置於冰箱內保存3天,若長時間不測,可-20℃保存。
(6)輕微溶血可使肌酐測定結果偏高,嚴重溶血可干擾測定結果。
(7)肌酐測定用的無蛋白血濾液,其回收率受pH值影響,當pH值在2以下時,其回收率可達100%。
(8)苦味酸有毒,切勿吞服或接觸皮膚,如不慎接觸,要及時用大量清水沖洗。
(9)苦味酸質量要高:要用AR以上等級的試劑,如苦味酸試劑不純,可使空白管吸光度升高而影響測定結果。
(10)顯色後應在15min內完成比色,如時間過久,苦味酸可與血濾液中的其他物質發生非特異性反應則影響測定結果的準確性。
(11)苦味酸係一種爆炸品,爲防止意外事故發生,最好用塑料瓶盛裝,並加少許蒸餾水。