3 概述
尿遊離皮質醇由血液中遊離皮質醇經腎小球濾過而來，因此基量與血漿中真正具有生物活性的遊離皮質醇成正比。測定尿遊離皮質醇可以有效、正確地反映腎上腺皮質的功能狀態。留取24h尿量，用10ml冰醋酸作防腐劑。
4 尿遊離皮質醇的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 尿遊離皮質醇的測定原理
皮質醇爲腎上腺皮質所分泌的糖皮質激素，標記抗原與樣品中的抗原對特異抗體產生競爭抑制反應，當加入標記抗原和抗體的量恆定時，則帶標記的結合物形成與抗原的含量成反比，根據標準曲線求出樣品的含量。
4.5 試劑
（1）0.1mol/L pH7.0磷酸-氯化鈉緩衝液（PBS）0.2mol/L NaH2PO4·2H2O 100ml，0.2mol/LNa2HPO4·12H2O 400ml，NaCl 9g，加水至1000ml。
（2）1g/L明膠-磷酸緩衝液（W/V）：簡稱1g/LGPS，貯於4℃。
（3）5g/L明膠-磷酸緩衝液（W/V）：簡稱5g/LGPS，貯於4℃。
（4）2.5g/L DCC溶液：葡聚糖T70250mg，溶於PBS 100ml，加活性炭NoritA2.5g，攪拌或振搖1h，貯於4℃，使用時再用PBS10倍稀釋。
（5）閃爍液：對聯三苯（TP）4g，1.4-雙-2-（5-苯基噁唑基）苯（POPOP）125mg，醋酸乙酯250ml，二甲苯1000ml，室溫避光保存。
（6）抗體：皮質醇-C21-牛血清白蛋白爲抗原免疫家兔，抗體的工作液濃度爲1∶3800，對皮質酮和17-羥孕酮的交叉分別爲10%和17%。
（7）氚標皮質醇：[1，2-3H]皮質醇，比活性（SA）＝148×1016Bq/mmol（40Ci/mmol），放化純度＞95%。工作液用無水乙醇配成7000cpm/10μl，密封，貯存於4℃。
（8）皮質醇標準液：上海第九製藥廠層析純，工作液用無水乙醇配成2ng/100μl，密封，4℃保存。
4.6 操作方法
（1）尿樣品測定：取萬分之一的24h混合尿，用蒸餾水稀釋至0.5ml，於10ml抽提管中，加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH 0.2ml，抽提5min，靜止片刻棄去上層液，下層二氯甲烷抽提液用水洗2次，每次1ml，搖1min，離心1500r/min 3min，棄去水層，取二氯甲烷提取液雙份各1ml（復管），45℃壓縮空氣吹乾，加3H-皮質醇7000cpm/10μl，45℃吹乾，各管加0.2ml抗體應用液（1∶3800用1g/L GPS稀釋），搖勻置4℃過夜，以下步驟同標準管。
（2）標準曲線製作：0，0.1，0.3，0.6，1.0，2.0，4.0ng（各點做復管），各管加3H-皮質醇10ml，吹乾，每管加抗體0.2ml，另取四管各加3H皮質醇10ml，分別加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作總脈衝測定管，另二管作非特異性測定（BN%）搖勻後，放4℃過夜。次日各管加5g/L GPS 0.1ml搖勻，再加2.5g/L DCC 0.5ml（總管T不加）。分離遊離與結合物；搖勻4℃停放10min，3000r/min離心10min吸取上清液0.4ml，加到8ml閃爍液中，混旋1min，避光4h後，用液爍計數儀測量。
4.7 正常值
成人：206.9±44.1nmol/24h 尿 （範圍129.7～303.6）
4.8 化驗結果臨牀意義
（1）皮質醇增多增多症：血漿和尿皮質醇明顯升高，血漿晝夜節律變化消失。
（2）異位產生ACTH的腫瘤：如燕麥型肺癌、胰、甲狀腺、甲狀旁腺、卵巢、睾丸、大腸、膽囊、乳腺、以及縱膈瘤等這種癌腫組織具有分泌ACTH樣物質的功能，使促腎上腺皮質合成皮質醇，血漿中皮質醇則顯著升高。
（3）垂體前葉機能亢進症：由於垂體前葉促激素的大量分泌，靶腺增生，血漿和尿皮質醇可升高。
（4）腎上腺皮質功能低下，如阿狄森、西蒙、席漢綜合徵，血漿和尿皮質醇含量減少。
（5）長期使用類固醇激素可通過負反饋抑制ACTH分泌，使腎上腺皮質處於抑制或萎縮、則血漿和尿皮質醇含量減少。
（7）先天性腎上腺皮質增生症，因體內缺少某種酶如C20-22斷裂酶3β-脫氫酶、17α-羥化酶11β羥化酶和18羥化酶等使皮質醇合成障礙，而皮質醇產生減少。
4.9 附註
（1）各管加入3H或標準必須吹乾，然後加抗體，因爲3H或標準是乙醇配製，否則會損害抗體。
（2）加定量的3H鬚根據實驗情況而定（本文加7000cpm），在相應的範圍內3H抗原加入量越少靈敏度就越高。