3 方法及內容
1.夫婦ABO血型相合者,可將男方5%紅細胞,加入孕、產婦血清作鹽水和酶介質及抗人球蛋白試驗,任何1項顯示陽性,則示血清中有抗體,鹽水中不凝集,其他介質中凝集,則爲不完全抗體,可進一步用配組譜細胞檢查抗體,並測效價。
2.夫婦ABO血型不合者,可利用免疫性IgG抗A(B)不被巰基乙醇破壞和不被血型物質中和的性質,用巰基乙醇(2-ME)破壞或用血型物質中和孕產婦血清中的天然IgM抗A(B),再測定免疫性抗體及其效價,一般可在懷孕第3或7個月前後測定,若7個月後抗體效價過高或胎兒情況不好,可建議引產。
pH7.4 PBS配方:KH2PO41.73g, Na2HPO4·12H2O 19.35g NaC1 8g,蒸餾水加至1000ml。0.2mol/L 2-ME配製:取化學純2-ME液14.7ml,以pH7.4 PBS稀釋至 1000ml,分裝於1-2ml安瓶,保存於4℃冰箱內,可用1個月。抗人球蛋白試劑。孕婦血清,A(B)型紅細胞經洗滌3次後配成5%懸液。
操作方法:①待檢血清與0.2mol/L 2-ME在小試管中等量混合,加塞置室溫2h。②2-ME處理後血清以PBS或生理鹽水倍量稀釋,每管0.2ml,至10管。③每管加相應5%A(B)紅細胞,置37℃水浴1h。④以3000r/min離心15s,觀察並記錄凝集情況,不凝集的各管內的紅細胞以PBS或生理鹽水洗3次後,加入抗人球蛋白試劑2滴混勻,3000r/min離心15s,觀察結果。
結果判讀:在鹽水介質中不凝集,加抗人球蛋白試劑後顯凝集,表示待檢者血清中有IgG抗A(B)抗體存在。舉例見表一、表二。
表一 孕婦血清IgG測定結果
稀釋度 | 1 : 1 | 1 : 2 | 1 : 4 | 1 : 8 | 1 : 16 | 1 : 32 | 1 : 64 | 1: 128 | 1: 256 |
鹽水介質 | 1+ | ± | - | - | - | - | - | - | - |
抗人球蛋白介質 | 1+ | ± | - | - | - | - | - | - | - |
稀釋度 | 1 : 1 | 1 : 2 | 1 : 4 | 1 : 8 | 1 : 16 | 1 : 32 | 1 : 64 | 1: 128 | 1: 256 | 1: 512 |
鹽水介質 | 3+ | 2+ | 1+ | ± | - | - | - | - | - | - |
抗人球蛋白介質 | 0 | 0 | 0 | 0 | 3+ | 2+ | 1+ | 1+ | - | - |