3 基本信息
ICS 11.020
CCS C 61
中華人民共和國衛生行業標準WS/T 783—2021《血清中碘的測定標準 電感耦合等離子體質譜法》（Determination of iodine in serum —Inductively coupled plasma mass spectrometry）由中華人民共和國國家衛生健康委員會於2021年07月08日《關於發佈《地方性氟骨症診斷標準》等2項推薦性衛生行業標準的通告》（國衛通〔2021〕6號）發佈，自2022年01月01日起實施。
4 發佈通知
關於發佈《地方性氟骨症診斷標準》等2項推薦性衛生行業標準的通告
國衛通〔2021〕6號
現發佈《地方性氟骨症診斷標準》等2項推薦性衛生行業標準，編號和名稱如下：
WS/T 192—2021 地方性氟骨症診斷標準（代替WS/T 192—2008）
WS/T 783—2021 血清中碘的測定標準 電感耦合等離子體質譜法
上述標準自2022年1月1日起施行，WS/T 192—2008同時廢止。
特此通告。
國家衛生健康委
2021年7月8日
6 標準正文
6.1 1 範圍
本標準適用於血清中總碘的測定。
6.2 2 原理
血清樣品經抗壞血酸-氯化銨-乙醇胺-乙醇混合水溶液稀釋後，引入電感耦合等離子體質譜儀，經進樣系統霧化，以氬氣爲載氣帶入電感耦合等離子體炬焰中，經過蒸發、解離、原子化、電離等過程將待測碘轉化爲帶正電荷的正離子，經離子採集系統進入質譜儀，質譜儀根據離子質荷比進行分離，並由檢測器檢測碘離子計數，樣品中碘的濃度與碘的離子計數成正比，以錸爲內標做內標校正，由碘標準曲線計算得血清中碘的濃度。
6.3 3 儀器
3.1 電感耦合等離子體質譜儀。
3.2 分析天平：感量爲 0.1 mg。
3.3 旋渦混合器。
3.4 試管：聚丙烯離心試管（15 mL）或玻璃試管（15 mm×120 mm）。
3.5 定量移液器：200 μL，1 000 μL，5 000 μL。
3.6 玻璃移液管：5 mL 刻度移液管和 10 mL 單標移液管。
3.7 容量瓶：100 mL、500 mL、1 000 mL。
3.8 離心機。
6.4 4 試劑
4.1 純水，電阻率≥18 MΩ·cm，其餘指標符合 GB/T 6682 一級水規定。
4.2 抗壞血酸（C6H8O6），優級純。
4.3 氯化銨（NH4Cl），優級純。
4.5 無水乙醇（C2H6O），優級純。
4.7 錸單元素標準溶液（Re，濃度 1 000 μg/mL），標準物質。
4.8 質譜調諧液，推薦使用鋰（Li）、鈷（Co）、釔（Y）、銦（In）、鈰（Ce）、鉈（Tl）、鈾（U）混合調諧溶液，各元素濃度均爲 1 μg/L 或 10 μg/L。
4.9 氬氣（Ar），純度≥99.999%。
6.5 5 溶液配製
6.5.1 5.1 稀釋劑
（含 2.0 g/L 抗壞血酸、1.0 g/L 氯化銨、體積分數 0.10%乙醇胺和體積分數1.0%乙醇溶液）
稱取 2.0 g 抗壞血酸（4.2）和 1.0 g 氯化銨（4.3）溶於約 800 mL 純水（4.1）後，加入1.0mL乙醇胺（4.4）、10 mL 無水乙醇（4.5），再加純水（4.1）稀釋至 1 000 mL，搖勻。室溫下避光存放，1 周內使用。
6.5.2 5.2 清洗液
同稀釋劑（5.1），室溫下避光存放，1 周內使用。
6.5.3 5.3 碘標準儲備溶液[ρ(I) =100 μg/mL]
準確稱取 0.168 6 g 經 105 ℃～110 ℃烘乾至恆重的碘酸鉀（4.6），加純水（4.1）溶解，並用純水（4.1）定容至 1 000 mL，搖勻。儲於具塞嚴密的棕色瓶，置 4 ℃冰箱可保存6 個月。或購買經國家認證並授予標準物質證書的標準溶液物質。
6.5.4 5.4 碘標準中間溶液[ρ(I) =10 μg/mL]
吸取 10.00 mL 碘標準儲備溶液（5.3）置於 100 mL 容量瓶中，用純水（4.1）定容至刻度，搖勻。儲於具塞嚴密的棕色瓶，置 4 ℃冰箱可保存 1 個月。
6.5.5 5.5 碘標準使用系列溶液[ρ(I) = 0 μg/L～300 μg/L]
使用前吸取碘標準中間溶液（5.4）0 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00mL、3.00 mL 分別置於 100 mL 容量瓶中，用純水（4.1）定容至刻度，搖勻。此標準系列溶液的碘濃度分別爲 0 μg/L、50 μg/L、75μg/L、100 μg/L、150 μg/L、200 μg/L、300 μg/L。
6.5.6 5.6 內標錸中間溶液[ρ(Re) = 10 μg/mL]
吸取 1.00 mL 錸單元素標準溶液（4.7）置於 100 mL 容量瓶中，用純水（4.1）定容至刻度，搖勻。置 4 ℃冰箱可保存 3 個月。
6.5.7 5.7 內標錸使用溶液[ρ(Re) = 4 μg/L]
WS/T 783—20214吸取 0.10 mL 錸中間溶液（5.6）置於 250 mL 容量瓶中，用稀釋劑（5.1）定容至刻度，搖勻。室溫下避光存放，1 周內使用。
6.6 6 樣品採集和保存
使用一次性真空非抗凝採血管採集不少於 2 mL 血液，室溫靜置 0.5 h後，於3 000 r/min離心10min，分離出血清置於具塞聚乙烯塑料管中，嚴密封口以防水分蒸發。在 20 ℃下可保存1 周；在4 ℃下可保存 1 個月；在-20 ℃下可保存 3 個月；在-80 ℃下可保存 6 個月。
6.7 7 分析步驟
6.7.1 7.1 儀器操作主要參考條件
射頻功率爲 1 550 W；載氣流速爲 1.0 L/min；採樣深度爲 8 mm；霧化器溫度爲3 ℃。待測液:內標液爲 1:1 在線引入內標錸使用溶液（5.7）。兩次進樣期間，由儀器進樣管路引進清洗液（5.2），清洗時間 20 s。
6.7.2 7.2 待測液的製備
將低溫保存血清樣取出，恢復到室溫。充分搖勻血清樣。分別取 0.20 mL 碘標準使用系列溶液（5.5）和血清樣[如果血清樣的碘濃度超出標準曲線的碘濃度範圍，則用純水（4.1）稀釋（記錄稀釋倍數）後取樣]各置於試管（3.4）中，各加入 3.80 mL 稀釋劑（5.1），使用旋渦混合器混勻，作爲碘標準系列待測液和血清樣待測液。同時用 0.20 mL 純水（4.1）代替血清樣，按樣品同樣處理，作爲試劑空白，配製 5 份試劑空白待用。
6.7.3 7.3 預進樣使用液的製備
準備 3 份不同人血清樣，各充分搖勻後，各取 0.20 mL 分別置於 3 支試管（3.4），各加入3.80mL稀釋劑（5.1），使用旋渦混合器混勻後，將這 3 管稀釋樣液合併，作爲預進樣使用液。
6.7.4 7.4 儀器調諧與測定方法設置
開機，當儀器真空度達到要求後，點燃等離子體，預熱 30 min 後，用質譜調諧液（4.8）校驗調整儀器各項指標，使儀器靈敏度、氧化物、雙電荷分辨率等各項指標達到儀器測定工作狀態要求後，編輯測定方法，選擇測定目標元素碘（127I）及內標元素錸（187Re）。在儀器工作站中，設置對碘標準待測液的測定信號自動做內標校正和扣除標準空白（標準使用系列溶液 0 μg/L 對應的待測液管），對血清樣待測液的測定信號自動做內標校正和扣除試劑空白。
6.7.5 7.5 儀器測定血清碘前的操作順序
WS/T 783—20215在測定標準曲線之前，使用清洗液（5.2）、預進樣使用液（7.3）、內標錸使用溶液（5.7）將儀器運行至測定血清碘的適宜狀態，操作順序參見附錄 A 表 A.1 中的 1～3。
6.7.6 7.6 標準曲線的測定
依次將試劑空白（7.2）、碘標準系列待測液（7.2）引入儀器測定，操作順序參見附錄A表A.1中的 4～5。以對應測得碘計數的校正值（經內標校正和扣除標準空白）爲縱座標，或以對應測得的碘計數值對內標錸計數值的比值（扣除標準空白的對應比值）爲縱座標，以0 μg/L～300 μg/L碘標準使用系列溶液（5.5）的碘濃度（μg/L）爲橫座標，利用儀器自帶軟件繪製標準曲線及計算標準曲線迴歸方程。
6.7.7 7.7 樣品及試劑空白的測定
以標準曲線測定的相同儀器條件測定試劑空白（7.2）及血清樣待測液（7.2），操作順序參見附錄A 表 A.1 中的 6～7。以測得樣品待測液碘計數的校正值（經內標校正和扣除試劑空白），利用儀器自帶軟件以對應的標準曲線迴歸方程計算血清樣的碘濃度（μg/L）；或以測得樣品待測液的碘計數值對內標錸計數值的比值（扣除試劑空白的對應比值），利用儀器自帶軟件以對應的標準曲線迴歸方程計算血清樣的碘濃度（μg/L）。
6.8 8 計算
式中：
ρ（I） —— 血清中碘（I）的質量濃度，單位爲微克每升（μg/L）；
ρ0—— 由標準曲線迴歸方程計算得到的血清樣中碘的質量濃度，單位爲微克每升（μg/L）；
K —— 血清樣以純水稀釋的稀釋倍數。
6.9 9 方法特性
6.9.1 9.1 檢出限和測定範圍
本法對血清碘的檢出限爲1.3 μg/L（取血清樣量爲0.20 mL），可直接取樣加稀釋劑測定碘濃度範圍0 μg/L～300 μg/L的血清樣。
6.9.2 9.2 精密度和準確度
6.10 10 質量保證和質量控制
10.1 血清樣品在現場採集、運輸、分離血清及其保存過程中應避免與加碘物品接觸，應避免碘污染。
10.2 實驗環境、器皿及試劑應避免碘污染。實驗過程應避免外界環境引入碘污染。
10.3 每批次樣品測定應配製和測定標準系列，標準曲線迴歸方程的線性相關係數應≥0.999。
10.4 儀器進樣時的每個樣品提升時間應使其待測液在進樣管路內到達霧化器後至少平衡15 s，纔開始掃描記錄；測定計數掃描時間應滿足可得到穩定的計數值的需要。
10.5 每測定 20 個樣品後應重複測定 100 μg/L 碘標準使用溶液的待測液，結果相對誤差的絕對值應≤10%。
10.6 宜採用測定平行樣、加標回收樣及水溶性生物樣品碘標準物質作爲質量控制手段。平行樣測定的相對偏差應≤10%；加標回收率應在 90%～110%範圍；質控標準物質測定值應在給定值範圍。
6.11 附錄A（資料性）儀器測定血清碘的參考操作順序
在完成分析步驟 7.4 之後，爲降低血清樣品對儀器採樣錐錐口可能產生的影響，提供測定血清碘的參考操作順序見表 A.1。
表 A.1 儀器測定血清碘的參考操作順序操作順序
6.12 附錄B（資料性）方法的精密度和準確度
6.12.1 B.1 精密度
五家實驗室共對含碘 40.0 μg/L～277.9 μg/L 的 26 個血清樣各做 6 次重複測定，一家實驗室對含碘59.7 μg/L～232.5 μg/L 的 8 個血清樣各做 3 次重複測定，相對標準偏差爲0.3%～2.4%。
6.12.2 B.2 樣品加標回收率
六家實驗室共對含碘43.6 μg/L～232.5 μg/L的36個血清樣各做3次重複測定加標回收率，加入的碘濃度爲50 μg/L～100 μg/L，加標回收率爲92.6%～108.5%。
6.12.3 B.3 基體成分干擾實驗結果
在本法條件下，以下濃度的基體物質不干擾測定：11 g/L NaCl，1.5 g/L HPO42-，1.1 g/LNO3-，560mg/L NH4+，300 mg/L K+，200 mg/L Ca2+，400 mg/L Mg2+，2 mg/L F-，2 mg/L Fe2+，2 mg/LZn2+，2mg/LCu2+，0.05 mg/L Hg2+，10 g/L葡萄糖，3 g/L尿素，2 g/L甘氨酸，100 mg/L抗壞血酸，100 g/L蛋白。
6.12.4 B.4 與血清中碘的測定的另一標準方法對比測定結果
六家實驗室各進行了本法（X）與WS/T 572-2017方法（Y）測定相同血清樣品碘含量的結果對比實驗，彙總統計結果見表B.1。
注：血清樣在實驗室間是不同的。
