紙色譜法，系以紙爲載體，以紙上所含水分或其他物質爲固定相，用展開劑進行展開的分配色譜。供試品經展開後，可用比移值(R<[f]>)表示其各組成成分的位置（比移值＝原點中心至斑點中心的距離／原點中心至展開劑前沿的距離），但由於影響比移值的因素較多，因而一般採用在相同實驗條件下與對照物質對比以確定其異同。作爲藥品的鑑別時，供試品在色譜中所顯主斑點的顏色（或熒光）與位置，應與對照品在色譜中所顯的主斑點相同。作爲藥品的純度檢查時，可取一定量的供試品，經展開後，按各藥品項下的規定，檢視其所顯雜質斑點的個數或呈色（或熒光）的強度。作爲藥品的含量測定時，將主色譜斑點剪下洗脫後，再用適宜的方法測定。
1.儀器與材料
(1) 展開室
通常爲圓形或長方形玻璃缸，缸上具有磨口玻璃蓋，應能密閉。用於下行法時，蓋上有孔，可插入分液漏斗，用以加入展開劑。在近頂端有一用支架架起的玻璃槽作爲展開劑的容器，槽內有一玻棒，用以壓住色譜濾紙；槽的兩側各支一玻棒，用以支持色譜濾紙使其自然下垂，避免展開劑沿濾紙與溶劑槽之間發生虹吸現象。用於上行法時，在蓋上的孔中加塞，塞中插入玻璃懸鉤,以便將點樣後的色譜濾紙掛在鉤上;併除去溶劑槽和支架。
(2)點樣器
常用具支架的微量注射器或定量毛細管,應能使點樣位置正確、集中。
(3) 濾紙
質地均勻平整，具有一定機械強度，不含影響展開效果的雜質；也不應與所用顯色劑起作用，以致影響分離和鑑別效果，必要時可進行處理後再用。用於下行法時，取色譜濾紙按纖維長絲方向切成適當大小的紙條，離紙條上端適當的距離（使色譜紙上端能足夠浸入溶劑槽內的展開劑中，並使點樣基線能在溶劑槽側的玻璃支持棒下數釐米處）用鉛筆劃一點樣基線，必要時，可在色譜濾紙下端切成鋸齒形便於展開劑滴下。用於上行法時，色譜濾紙長約25cm，寬度則按需要而定，必要時可將色譜濾紙捲成筒形；點樣基線距底邊約2.5cm。
2.操作方法
(1) 下行法
將供試品溶解於適當的溶劑中製成一定濃度的溶液。用微量吸管或微量注射器吸取溶液，點於點樣基線上，溶液宜分次點加，每次點加後，俟其自然乾燥、低溫烘乾或經溫熱氣流吹乾，樣點直徑爲2～4mm，點間距離約爲1.5～2.0cm，樣點通常應爲圓形。
將點樣後的色譜濾紙上端放在溶劑槽內並用玻棒壓住，使色譜紙通過槽側玻璃支持棒自然下垂，點樣基線在支持棒下數釐米處。展開前，展開室內用各品種項下規定的溶劑的蒸氣使之飽和，一般可在展開室底部放一裝有規定溶劑的平皿或將浸有規定溶劑的濾紙條附着在展開室內壁上，放置一定時間，俟溶劑揮發使室內充滿飽和蒸氣。然後添加展開劑使浸沒溶劑槽內的濾紙，展開劑即經毛細管作用沿濾紙移動進行展開，展開至規定的距離後，取出濾紙，標明展開劑前沿位置，俟展開劑揮散後按規定方法檢出色譜斑點。
(2) 上行法
點樣方法同下行法。展開室內加入展開劑適量，放置俟展開劑蒸氣飽和後，再下降懸鉤，使色譜濾紙浸入展開劑約0.5cm,展開劑即經毛細管作用沿色譜濾紙上升，除另有規定外，一般展開至約15cm後，取出晾乾，按規定方法檢視。
展開可以向一個方向進行，即單向展開；也可進行雙向展開,即先向一個方向展開,取出，俟展開劑完全揮發後，將濾紙轉動90°,再用原展開劑或另一種展開劑進行展開;亦可多次展開、連續展開或徑向展開等。