凍幹破傷風抗毒素藥典標準
品名
中文名
凍幹破傷風抗毒素
漢語拼音
Donggan Poshangfeng Kangdusu
英文名
Tetanus Antitoxin,Freeze-dried
定義、組成及用途
本品系由破傷風類毒素免疫馬所得的血漿，經胃酶消化後純化製成的凍幹抗毒素球蛋白製劑。用於預防和治療破傷風梭菌引起的感染。
1 基本要求
生產和檢定用設施、原材料及輔料、水、器具、動物等應符合“凡例”的有關要求。
2 製造
2.1 抗原與佐劑
應符合“免疫血清生產用馬匹檢疫和免疫規程”的規定。
2.2 免疫動物及血漿
2.2.1 免疫動物
免疫用馬匹必須符合“免疫血清生產用馬匹檢疫和免疫規程”的規定。
2.2.2 採血與分離血漿
按“免疫血清生產用馬匹檢疫和免疫規程”的規定進行。用動物法或其他適宜的方法測定免疫血清效價，不低於1100IU/ml時，即可採血。分離之血漿可加入適宜防腐劑，並應做無菌檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A）。
2.3 胃酶
用生理氯化鈉溶液將胃酶配製成1mg/ml溶液，進行類A血型物質含量測定（2010年版藥典三部附錄Ⅸ I），應不高於1.0μg/ml。
2.4 原液
2.4.1 原料血漿
原料血漿的破傷風抗毒素效價應不低於1000IU/ml（2010年版藥典三部附錄Ⅺ F）。血漿在保存期間，如發現有明顯的溶血、染菌及其他異常現象，不得用於製備。
2.4.2 製備
2.4.2.1 消化
將免疫血漿稀釋後，加入適量胃酶，如果必要還可加入適量甲苯，調整適宜pH值後，在適宜溫度下消化一定時間。
2.4.2.2 純化
採用加溫、硫酸銨鹽析、明礬吸附等步驟進行純化。
2.4.2.3 濃縮、澄清及除菌過濾
濃縮可採用超濾或硫酸銨沉澱法進行。可加入適量硫柳汞或間甲酚作爲防腐劑，然後澄清、除菌過濾。
純化後的抗毒素原液應置2～8℃避光保存至少1個月作爲穩定期。
2.4.3 原液檢定
按3.1項進行。
2.5 半成品
2.5.1 配製
將檢定合格的原液，按成品規格以滅菌注射用水稀釋，調整效價、蛋白質濃度、pH值及氯化鈉含量，除菌過濾。
2.5.2 半成品檢定
按3.2項進行。
2.6 成品
2.6.1 分批
應符合“生物製品分批規程”規定。
2.6.2 分裝及凍幹
應符合“生物製品分裝和凍幹規程”及附錄Ⅰ A有關規定。在凍幹過程中製品溫度應不高於35℃，真空或充氮封口。
2.6.3 規格
復溶後每瓶0.75ml，含破傷風抗毒素1500IU（預防用）；或每瓶2.5ml，含破傷風抗毒素10000IU（治療用）。
2.6.4 包裝
應符合“生物製品包裝規程”及2010年版藥典三部附錄Ⅰ A有關規定。
3 檢定
3.1 原液檢定
3.1.1 抗體效價
依法測定（2010年版藥典三部附錄Ⅺ F）。
3.1.2 無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.1.3 熱原檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ D），應符合規定。注射劑量按家兔體重每1kg注射3.0ml。
3.2 半成品檢定無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.3 成品檢定
除水分測定、裝量差異檢查外，應按標示量加入滅菌注射用水，復溶後進行以下檢定。
3.3.1 鑑別試驗
每批成品至少抽取1瓶做以下鑑別試驗。
3.3.1.1 動物中和試驗或特異沉澱反應
按2010年版藥典三部附錄Ⅺ F進行，供試品應能中和破傷風毒素；或採用免疫雙擴散法（2010年版藥典三部附錄Ⅷ C），供試品應與破傷風類毒素產生特異沉澱線。
3.3.1.2 免疫雙擴散或酶聯免疫吸附試驗
採用免疫雙擴散法（2010年版藥典三部附錄Ⅷ C）進行，供試品僅與抗馬的血清產生沉澱線；或採用酶聯免疫法（2010年版藥典三部附錄Ⅸ T），供試品應與馬IgG抗體反應呈陽性。
3.3.2 物理檢查
3.3.2.1 外觀
應爲白色或淡黃色的疏鬆體，按標示量加入注射用水，輕搖後應於15分鐘內完全溶解爲無色或淡黃色的澄明液體，無異物。
3.3.2.2 裝置差異
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅰ A），應符合規定。
3.3.3 化學檢定
3.3.3.1 水分
應不高於3.0%（2010年版藥典三部附錄Ⅶ D）。
3.3.3.2 pH值
應爲6.0～7.0（2010年版藥典三部附錄Ⅴ A）。
3.3.3.3 蛋白質含量
應不高於170g/L（2010年版藥典三部附錄Ⅵ B第一法）。
3.3.3.4 氯化鈉含量
應爲7.5～9.5g/L（2010年版藥典三部附錄Ⅶ G）。
3.3.3.5 硫酸銨含量
應不高於1.0g/L（2010年版藥典三部附錄Ⅶ C）。
3.3.3.6 防腐劑含量
如加硫柳汞，含量應不高於0.1g/l.（2010年版藥典三部附錄Ⅶ B）；如加間甲酚，含量應不高於2.5g/L（2010年版藥典三部附錄Ⅵ N）。
3.3.4 純度
3.3.4.1 白蛋白檢查
將供試品稀釋至2%的蛋白質濃度，進行瓊脂糖凝膠電泳分析（2010年版藥典三部附錄Ⅳ B），應不含或僅含痕量白蛋白遷移率的蛋白質成分。
3.3.4.2 F（ab'）2含量
2含量預防用的應不低於50%，治療用的應不低於60%; IgG含量應不高於10%。
3.3.5 抗體效價
預防用的效價應不低於2000IU/ml，比活性爲每1g蛋白質應不低於35000IU;治療用的效價應不低於3000IU/ml，比活性爲每1g蛋白質應不低於45000IU（2010年版藥典三部附錄Ⅺ F）。每瓶破傷風抗毒素裝量應不低於標示量。
3.3.6 無菌檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ A），應符合規定。
3.3.7 熱原檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ D），應符合規定。注射劑量按家兔體重每1kg注射3.0ml。
3.3.8 異常毒性檢查
依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ F），應符合規定。
3.3.9 稀釋劑
稀釋劑爲滅菌注射用水，應符合本版藥典（二部）的相關規定。
4 保存、運輸及有效期
於2～8℃避光保存和運輸。自生產之日起，有效期爲60個月。
5 使用說明
應符合“生物製品包裝規程”規定和批准的內容。版本《中華人民共和國藥典》2010年版