2 英文參考
Urine—Determination of phenol—Spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 48—1996《尿中酚的分光光度測定方法》(Urine—Determination of phenol—Spectrophotometric method)由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外,均爲分析純試劑。
4.2 硫酸,ρ20=1.84 g/mL。
4.3 冰乙酸。
4.4 氫氧化銨溶液,1+14,用前配製。
4.7 苯酚標準溶液:稱取0.5000 g新蒸餾的酚,加少量水溶解,轉入500 mL容量瓶中,加水至刻度。此溶液1 mL=1 mg酚。臨用時稀釋成30μg/mL之標準溶液。
4.8 質控樣:用加標的模擬尿、接觸者混合尿或加標的正常人混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
6.1 取比重爲1.010~1.030尿樣5 mL置於蒸餾瓶中,加入1.5 mL硫酸,搖勻後進行水蒸氣蒸餾,收集50 mL餾出液,取其中的10 mL於試管中。
6.2 標準曲線的繪製
6.2.1 取6只比色管(3.3),按下表配製標準管。
酚標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
標準溶液(4.7),mL | 0 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 3.0 | 5.0 |
水,mL | 10.0 | 9.5 | 9.0 | 8.0 | 7.0 | 5.0 |
酚含量,pg | 0 | 15 | 30 | 60 | 90 | 150 |
6.2.2 向每管中各加入1 mL氫氧化銨溶液(4.4),1 mL 4-氨基安替比林溶液(4.5)及1 mL鐵氰化鉀溶液(4.6)。每加一種試劑後充分搖勻,再加另一種試劑。溶液混勻後於510 nm波長下比色。
6.2.3 以酚的含量爲橫座標,吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
6.3 樣品測定
取處理後的樣品溶液(6.1)按6.2.2條操作,比色後由標準曲線上查出酚的含量。在測定前後以及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度校正係數(k)。
7.2 按式(2)計算尿中酚的濃度。
式中:x——尿中酚的濃度,mg/L;
m——由標準曲線查得的酚的含量,μg;
V——取尿樣的體積,mL。
10 8 說明
8.1 本法的檢測限,取5mL尿樣時爲2 mg/L。精密度:CV=0.8%~1.1%(尿酚濃度15~150 mg/L,n=6)。準確度:接觸者尿樣加標回收率88.6%~98.5%(尿酚本底濃度6.35~62.9 mg/L,加標濃度7.0~60.6 mg/L,n=6)。
8.2 尿樣要在接觸結束時收集。因接觸期間和接觸後尿酚濃度變化很大,取樣時間應嚴格控制,尿樣不大可能污染,外源性酚的污染可用測定遊離酚的辦法(不水解直接測定)來檢查。
8.3 4-氨基安替比林與間甲酚和鄰甲酚有與苯酚類似的顯色反應,但此二者在尿中一般不存在。對甲酚雖生理性排泄量較大,但其對顯色基本無干擾。
8.4 尿樣的預處理如果用直接蒸餾法測尿酚,回收率較低(70%左右)。本法與美國NIOSH方法相比,NIOSH方法靈敏度高於本法,但線性範圍較窄。本法線性範圍可覆蓋3倍生物接觸限值。
8.5 質控樣用加標的模擬尿時可考察準確度和精密度。用接觸者尿和正常尿時可考察精密度。但人尿不易久存。模擬尿只含人尿中主要成分。