血小板電泳時間測定

臨牀血液流變學檢查 化驗及醫學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

xuè xiǎo bǎn diàn yǒng shí jiān cè dìng

2 英文參考

platelet electrophoretic time assay

3 概述

血小板的內黏度紅細胞大。血小板數量的增加、黏附性和聚集性的增高,以及釋放物的增多,均使血黏度增高。影響血小板聚集性的因素與影響紅細胞的因素相同。但在低流變狀態下,血小板更易聚集

血小板黏附性、聚集性升高、全血黏度血漿成分和HCT增高,血小板變形能力下降,血流速度減慢和流態異常,並形成渦流,是形成血栓的有利條件。血管損傷造成血小板黏附、聚集性增高,血小板數量和形態改變,導致血液流動性降低。血流減慢或流經血管彎曲、分叉、狹窄處,或血管壁受病理性損害變粗糙,血小板易黏附管壁,聚集釋放促凝物質,使血液凝固血栓形成

6 血小板電泳時間測定的原理

紅細胞表面帶負電荷,在電場中向正極移動,此即細胞電泳,其電泳率(EPM)計算如下:

(公式1)

式中E爲電場強度(V/cm),V爲電泳速度(μm/s)。因此細胞電泳遷移率的含意是指荷電顆粒在單位電場強度下,單位時間內泳動的距離(μm·s-1/V·cm-1)。

溶液中帶負電荷的細胞周圍含有相反的電荷,兩種電荷相互吸引,從而在細胞周圍形成雙電層,當細胞電場中泳動時,雙電層間出現一種電位(稱Zata電位)。Zata電位與EPM有如下關系:

(公式2)

式中η爲液體的黏度,ε爲液體介電常數。表面電荷密度與Zata電位有如下關系:

(公式3)

式中N爲阿伏加德羅常數,D爲溶液的介電常數,K爲玻爾茲曼常數,T爲絕對溫度,Z爲離子價,e爲電子荷電量,Sinh爲雙曲函數符號,即等於

7 試劑

細胞電泳儀主要由直流電源、電極,電泳室及顯微鏡等部分組成。目前國內大多采用方形玻璃毛細管作爲電泳小室。

(1)電泳小室:採用長7~8cm,內徑1mm,內徑均勻的方形毛細管,其靜止層在內徑1/10深度處。

(2)電極:一般採用銀電極,爲防止電極極化最好採用銀-氯化銀電極。

銀-氯化銀電極製作。將表面光潔的銀絲用乙醇乙醚擦洗乾淨,以銀絲作陰極,銀片作陽極與1.5V電池連接,兩電極均浸於0.1mol/L鹽酸溶液中,於暗處電解1~2h,銀絲表面便有一層紫黑色氯化銀,保存於暗處備用。

(3)瓊脂導管制作:取內徑略大於方形玻璃管的硬質塑料管,切成2~3cm,長,注入1%的瓊脂溶液(其中氯化鈉的濃度爲10%),冷卻後備用。

(4)紅細胞懸浮液的配製:取靜脈血,以肝素或EDTAK2抗凝,於2000r/min離心10min,取出血漿放入小試管內,加入1滴血使其中紅細胞的含量每微升1萬個左右備用。也可以生理鹽水或9%的蔗糖溶液作懸浮基體。但由於生理鹽水離子強度高,導電性強,工作電流較大,故易生熱,而影響測量結果

8 操作方法

(1)將配製好的稀釋的細胞懸浮液裝入方形玻璃管中,然後兩端套好瓊脂管,裝在電泳管架上後置於顯微鏡臺上,並插入電極。

(2)接通電泳:利用倒向開關變換兩電極的極性,利用測微尺,測量細胞泳動一定距離(s)所需要的時間(),記錄20個細胞在兩端方向泳動時間的平均值(),計算電泳速度(v),V=s/,利用公式(1)、(2),(3)可計算出細胞屯泳遷移率和細胞表面電荷密度。

9 正常值

16.4~23.2s。

11 附註

影響細胞泳動速度因素很多,應注意控制。如介質離子強度,電場強度及溼度等。

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