5 分類類型
種
8 小球藻病毒1型基本特性
綠藻病毒是指綠藻病毒屬的成員,主要包括小球藻病毒和水螅病毒,其代表種是小球藻病毒1型(PBCV-1)。綠藻病毒既有真核生物病毒的性質,同時又具有某些原核生物病毒的性質,所以從一定意義上說它是一類介於真核生物病毒與噬菌體之間的病毒,分類地位十分特殊。深入研究綠藻病毒可爲了解病毒及病毒宿主之間相互作用的分子生物學提供全新的依據,綠藻病毒感染小球藻的系統葉成爲一個研究光合真核生物基因表達與調控的理想模型。
綠藻病毒是20年前在與一種水螅(Hydraviridis)和一種草履蟲(Paramecium bursaria)營內共生(endosymbiotic)的“類小球藻”(Chlorella-like alga)或者“動物小球藻”中發現。綠藻病毒有兩類,一類是與水蛭內共生,稱爲HVCV型;另一類是與草履蟲內共生,稱爲PBCV型。PBCV-1型是目前瞭解最深入、研究最清楚的真核藻類病毒。
PBCV-1是直徑爲140-150nm的多角體粒子,含有21-25%的雙鏈DNA,64%的蛋白質,以及5-10%的脂肪,其基因組的的大小爲333kb,(G+C)的含量爲40%,鹼基甲基化。DNA的末端形成共價閉合的髮夾結構。PBCV-1的結構蛋白質有50多種,分子量從10kd到200kd不等。其中有一種54kd的糖蛋白佔40%。PBCV-1的脂類物質主要是卵磷脂和磷脂酰乙酰胺,他們對於病毒粒子的感染功能是必不可少的。因爲在氯仿,乙醚以及甲苯等脂溶性溶劑中,這些病毒粒子失去感染能力[6]。
PBCV-1侵染週期類似於噬菌體,採用在細胞壁上“打孔”的方式將自身DNA導入宿主細胞,在完成DNA轉錄、複製及子代病毒裝配後,通過裂解宿主細胞壁的方式釋放子代病毒。病毒在早期侵入及晚期子代病毒釋放過程中,都需要通過特異性降解小球藻細胞壁的作用來完成。例如PBCV-1感染chlorella NC64A的過程是這樣的,病毒用一些頭髮般的尾絲牢牢地吸附在宿主細胞的外壁上,並立刻產生一種酶消化吸附處的細胞壁,將病毒DNA注入宿主的細胞,空的衣殼留在細胞的外面,病毒的DNA注入宿主細胞後,宿主細胞很快裂解並釋放大量的新的病毒顆粒。張維娟等通過已建立的Lysin-NC64A細胞壁消解敏感指示系統,進行PBCV-1病毒顆粒溶壁酶活的檢測,應用凍融實驗比較各種酶在溶壁過程中的作用。結果發現:PBCV-1病毒顆粒具有降解宿主細胞壁的活性,參與其溶壁活性的酶是幾丁質酶、殼聚糖酶和β-1,3-葡萄糖苷酶,其中殼聚糖酶的活力高低並不與其裂解活性成正比。因此作者的結論是:幾丁質酶可能在PBCV-1病毒侵入及釋放過程中起主要作用,而殼聚糖酶只作爲一個輔助成分。
PBCV-1型病毒只侵染遊離於原生動物之外的所謂“外共生”的“草履蟲小球藻”,“纖毛蟲小球藻”,而不感染“內共生”的小球藻,也就是說,病毒無法進入原生動物的體內。這類小球藻只能生活在動物的體內,是因爲他們一旦被分離出來,就立刻受到病毒的攻擊而死亡,這也許具有進化上的意義。