3 概述
兒茶酚胺幾乎全部在體內代謝,產物爲VMA。其代謝途徑有二:少部分的CA經單胺氧化化酶作用,生成對-二羥杏仁酸,大部分CA經CA-O-甲基轉移酶作用後變爲3-甲氧腎上腺腎上腺素或去甲氧腎上腺腎上腺素,最後變爲VMA。
5 尿苦杏仁酸的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 尿苦杏仁酸的測定原理
用醋酸乙酯從酸化尿液中提取VMA,再用碳酸鉀溶液提取有機相中VMA,並與重氮化對硝基苯胺反應,生成偶氮複合物,用氯仿抽提,然後用氫氧化鈉溶液提取紅色偶氮化合物進行比色測定。
5.5 試劑
(1)醋酸乙酯。
(2)氯仿。
(3)氯化鈉。
(8)1g/L對硝基苯胺溶液:對硝基苯胺0.1g溶於0.2mol/L鹽酸中,再加0.2mol/L鹽酸至100ml,置棕色瓶中,放冰箱保存。
(9)5g/L亞硝酸鈉溶液:亞硝酸鈉0.5g,加蒸餾水至100ml,置棕色瓶中,放冰箱保存。
(10)重氮化對硝基苯胺溶液:將1g/L對硝基苯胺溶液和5g/L亞硝酸鈉溶液等體積混和,臨用前配製。
(11)VMA標準貯存液(1mg/ml):精確稱取100mg VMA(MW198.17)置於100ml容量瓶中,加0.01mol/L HCl至刻度,混勻,冰箱保存,可穩定3個月。
(12)VMA標準應用液(20μg/ml):取VMA標準貯存液2.0ml,加0.01mol/L HCl至100ml,臨用前配製。
5.6 操作方法
(1)標本收集與保存:收集24h尿液,加入6mol/L HCl 10ml防腐,測量並記錄尿液總量,混勻,取50ml送檢。在留尿過程中應置4℃冰箱或冰凍保存。
(2)取具塞試管2支,標明“測定管”與“標準管”,分別加入尿液和標準應用液2ml,再加5mol/L HCl 0.1ml。
(3)向各管加入固體氯化鈉約1.5g,振搖使之達到飽和,再加醋酸乙酯5ml,振搖5min,離心5min。
(4)另取具塞試管2支,標明“測定管”和“標準管”,分別依次加入相應的醋酸乙酯提取液(上層)4.0ml,再各加1mol/L碳酸鉀溶液3.0ml,振搖5min,離心5min。
(5)再取具塞試管2支,標明“測定管”和“標準管”,分別依次加入相應的碳酸鉀提取液(下層)2.0ml,各加重氮化對硝基苯胺溶液1.0ml,混勻,放置5min,再各加氯仿4.0ml,振搖1min,放置待分層。
(6)取第四批具塞試管2支,標明“測定管”和“標準管”,分別依次加入相應的氯仿提取液(下層)3.0ml,各加0.1mol/L NaOH溶液4.0ml,振搖1min,離心5min。此時氫氧化鈉溶液層(上層)呈粉紅色。
(7)吸出氫氧化鈉溶液層加入比色杯中,分光光度計,波長500nm,用0.1mol/L NaOH溶液調零,分別讀取吸光度(Au與As)。
5.7 正常值
2~6mg/24h尿
5.8 化驗結果臨牀意義
對陣發性或持續高血壓病人,特別是伴有腎上腺素分泌過多或交感神經過度興奮症狀的患者,可留尿測VMA,方法簡便,診斷價值大。