3 概述
維生素PP又名抗癩皮病維生素,其中包括菸酸(煙酸,尼可酸)和菸酰胺(煙酰胺,尼可酰胺)兩種化合物,二者可以互變。它們在體內以輔酶形式NAD+(輔酶Ⅰ)或NAP+(輔酶Ⅱ)發揮生理作用。正常人尿中不含菸酸而只含微量菸酰胺。尿中的主要排泄物爲菸酰胺的代謝產物:N-甲基菸酰胺和N-甲基-2-吡啶酮-5-酰胺。測定尿液中N-甲基菸酰胺的排泄量可瞭解體內菸酸和菸酰胺的營養狀況。
4 尿N'-甲基煙酰胺的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿N'-甲基煙酰胺的測定原理
N'甲基菸酰胺在鹼性條件下與丙酮作用形成縮合物,再在酸性溶液中加熱,形成穩定的藍色熒光的萘啶化合物。
4.5 試劑
(1)6mol/L氫氧化鈉。
(2)6mol/L鹽酸。
(4)磷酸二氫鉀溶液,稱取磷酸二氫鉀20g,用水溶解後稀釋成100ml。
(5)活性炭,應作N'甲基菸酰胺標準液的回收試驗,以檢查其吸附性能。以免被測物被吸附。
(6)N'甲基菸酰胺儲存標準液(500mg/L),準確稱取乾燥的N'氯代甲基菸酰胺62.7mg,以0.1mol/L鹽酸溶解成100ml,盛於棕色瓶內,置4℃下可穩定半年。
(7)N'甲基菸酰胺應用標準液(1000μg/L),吸取上述儲存標準液2.0ml,以0.01mol/L鹽酸稀釋成1000ml,放4℃可穩定數天。
(8)硫酸奎寧儲存液(100mg/L):稱取硫酸奎寧100mg,以0.05mol/L硫酸溶解並稀釋成1000ml,置4℃下避光可長期保存。
(9)硫酸奎寧應用液(300μg/L):取硫酸奎寧儲存液3.0ml,以0.05mol/L硫酸稀釋成1000ml,置4℃下避光保存,可用3個月。
4.6 操作方法
(1)純化:取10ml帶塞刻度試管2支,標明測定管(U)、標準管(S)。測定管內加尿液2ml及冰乙酸0.2ml,用水稀釋到10ml。標準管內加入N'甲基菸酰胺應用標準液10ml。兩管內各加活性炭100mg,混勻數次,立即用濾紙過濾,取濾液作測定。
(2)反應:取10ml帶塞試管4支,標明測定管(U),測定空白管(UB),標準管(S)及標準空白管(SB),按下表(表1)操作。
(3)熒光測定:先用硫酸奎寧應用液調讀數到50~80。選用激發波長380~360nm,發射波長430~450nm,然後讀取各管熒光強度。
4.7 正常值
熒光測定法:3~17mg/d。
4.8 化驗結果臨牀意義
(1)健康人攝入適宜膳食,24h尿液N-甲基菸酰胺排量平均約7mg。有人觀察到癩皮病患者每日尿液N-甲基菸酰胺排泄量爲0.5~0.6mg。
(2)有人認爲,空腹時每小時尿液中N-甲基菸酰胺排泄量低於0.03mg,或空腹時每小時每100ml尿液中N-甲基菸酰胺排泄量低於95μg時,表示組織中菸酰胺含量低於正常。
(3)判定菸酰胺的營養狀況最好進行飽和試驗,方法爲口服菸酰胺50mg,如每4小時尿液中N-甲基菸酰胺排泄量在0.5mg以下,即表示菸酰胺缺乏。