高鐵血紅蛋白還原試驗_化驗及醫學檢查、血液檢查、紅細胞

心氣虛，則脈細；肺氣虛，則皮寒；肝氣虛，則氣少；腎氣虛，則泄利前後；脾氣虛，則飲食不入。

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1 拼音

gāo tiě xuè hóng dàn bái hái yuán shì yàn

2 英文參考

Methemoglobin reduction test

3 概述

正常人血清中無高鐵血紅蛋白，血清中出現高鐵血紅蛋白，提示血管內溶血。

4 檢查名稱

高鐵血紅蛋白還原試驗

5 分類

臨牀血液檢查 > 紅細胞

6 化驗取材

血液

7 高鐵血紅蛋白還原試驗的原理

正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白，可被亞硝酸氧化爲高鐵血紅蛋白。當紅細胞內葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶含量正常時，通過戊糖循環形成的還原型輔酶Ⅱ可作爲血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶，並在遞氫體美藍的參與下，使形成的高鐵血紅蛋白還原爲亞鐵血紅蛋白。當紅細胞內缺少葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶時，則高鐵血紅蛋白不能被還原。高鐵血紅蛋白爲暗灰色，在630～650nm波長處吸光度最高，故可加以測定。

8 試劑

（1）12.5g/L亞硝酸鈉-葡萄糖溶液：取亞硝酸鈉1.25g，葡萄糖5g，蒸餾水加至100ml。

（2）0.0001mol/L美藍溶液：取美藍0.15g，蒸鎦水加至100ml。

（3）0.02mol/L磷酸鹽緩衝液（pH7.4）：稱取磷酸氫二鈉（Na₂HPO₄·12H₂O）51mg。磷酸二氫鉀52.2mg，加蒸餾水至100ml。

9 操作方法

（1）靜脈取血1.5～2.0ml，加於含有3.8%檸檬酸鈉抗凝劑的小試管內，血液和抗凝劑接9∶1混合，加葡萄糖20mg。

（2）將此標本離心沉澱5min（1000r/min）或放置4℃冰箱過夜，待紅細胞下沉後吸去部分血漿，使紅細胞與血漿比例約爲1∶1（相當紅細胞比容35%～40%）。

（3）搖勻後取此血液1ml，加12.5g/L，亞硝酸鈉-葡萄糖溶液和0.0001mol/L美藍溶液各0.05ml，顛倒混合15次，使與空氣中的氧氣充分接觸，加塞，置於37℃水浴（或保溫箱）3h。

（4）取出後搖勻，吸取此液0.1ml，加於0.02mol/L磷酸鹽緩衝液10ml中，2min後於波長634nm處比色，測其吸光度爲S_△。

（5）吸取未加上述試劑但同樣保溫的血液0.1ml，加於0.02mol/L磷酸鹽緩衝液10ml中，2min後按上法進行比色，測其吸光度爲B，再於此液內加12.5g/L亞硝酸鈉-葡萄糖溶液1滴，搖勻，5min後用同樣方法測其吸光度爲St。

10 正常值

定性：陰性。

定量：還原率＞75%。

11 化驗結果臨牀意義

（1）陽性：葡萄糖-6-磷酸脫氫-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）缺乏症、純合子型、中間反應爲雜合子型。

（2）定量＜30%：G-6-PD缺乏症純合子型。

（3）定量74%～31%：G-6-PD缺乏症雜合子型

12 附註

（1）受檢者紅細胞比容對結果有一定影響，比容低於30%時，高鐵血紅蛋白還原率可明顯降低故貧血患者應先調整紅細胞比容後再測定。

（2）抗凝劑以38g/L檸檬酸鈉或輸血時用的抗凝劑ACD爲好，血液標本可保存1周左右。肝素抗凝也可用（每毫升血液用肝素0.5mg），但標本只能保存3天。草酸鹽抗凝不適於本法。

（3）ACD抗凝劑量不宜太多，血液與ACD抗凝劑按1∶0.15混合即可，否則可因pH降低，而使高鐵血紅蛋白還原速度減慢，以致出現假陽性。