3 蛋黃卵磷脂藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
Danhuang Luanlinzhi
3.1.3 英文名
Egg Yolk Lecithin
3.2 CAS號
[93685-90-6]
3.3 來源及含量
本品系以蛋黃粉爲原料，經丙酮處理、脫油、脫水，再用無水乙醇提取精製而得的磷脂混合物。以無水物計算，含磷（P）應爲3.5%～4.1%，含氮（N）應爲1.75%～1.95%，含磷脂酰膽鹼應大於72.0%，含磷脂酰乙醇胺應不得過18.0%。
3.4 性狀
本品爲乳白色或淡黃色的粉末或蠟狀固體，具有輕微的特臭，觸摸時有輕微滑膩感。
本品在乙醇、乙醚、三氯甲烷或石油醚（沸程40～60℃）中溶解，在丙酮和水中幾乎不溶。
3.4.1 皂化值
本品的皂化值（2010年版藥典二部附錄Ⅶ H）爲195～212。
3.4.2 碘值
本品的碘值（2010年版藥典二部附錄Ⅶ H）爲65～73。
3.4.3 過氧化值
取本品2g，精密稱定，置250ml碘瓶中，依法測定（2010年版藥典二部附錄Ⅶ H）,不得過3.0。
3.5 鑑別
（1）取本品0.1g，置坩堝中，加碳酸鈉－碳酸鉀（2：1）3g，混勻，微火加熱，產生的氣體能使潤溼的紅色石蕊試紙變藍。
（2）取鑑別（1）項下遺留的殘渣約100mg，緩緩灼燒至炭化物全部消失，冷卻，加水30ml，微熱使殘渣溶解，濾過，濾液置試管中，滴加硫酸至無氣泡產生，再加硫酸4滴，加鉬酸鉀少許，加熱，應呈黃綠色。
3.6 檢查
3.6.1 遊離脂肪酸
稱取棕櫚酸0.512g，至50ml量瓶中，加正庚烷溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置50ml量瓶中，用正庚烷稀釋至刻度，搖勻，作爲對照品溶液；取本品約1g，精密稱定，至25ml量瓶中，用異丙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，作爲供試品溶液。精密量取上述兩種溶液各1ml，分別置20ml具塞試管中，各加異丙醇－正庚烷－0.5mol/L硫酸溶液（40：10：1）混合溶液5.0ml，振搖1分鐘，放置10分鐘。在供試品溶液管內精密加正庚烷3ml和水3ml，對照品溶液管內精密加正庚烷2ml與水4ml，密塞，上下翻轉10次，靜置1 5分鐘以上使分層。分別精密量取上層液3ml，置10ml離心管中，加尼羅藍指示液（取尼羅藍0.04g，加水200ml，使溶解後，加正庚烷100ml，振搖，棄去上層正庚烷，重複提取操作4次。取下層水溶液20ml，加無水乙醇180ml，混勻，即得。置棕色瓶中，室溫下一個月內使用）1ml，在氮氣流下，用氫氧化鈉滴定液（0.01mol/L）滴定至溶液顯淡紫色。供試品溶液消耗氫氧化鈉滴定液（0.01mol/L）的毫升數不得大於對照品溶液消耗氫氧化鈉滴定液（0.01mol/L）的毫升數。
3.6.2 甘油三酸酯、膽固醇與棕櫚酸
取本品適量，用己烷－異丙醇－水（40：50：8）混合溶劑製成每1ml中含20mg的溶液，作爲供試品溶液；分別精密稱取甘油三酸酯對照品、膽固醇對照品與棕櫚酸對照品各適量，用上述混合溶劑分別製成每1ml各含0.6mg、0.2mg、0.2mg的甘油三酸酯對照品溶液、膽固醇對照品溶液與棕櫚酸對照品溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ B）試驗，吸取上述供試品溶液5μl，甘油三酸酯對照品溶液5μl，膽固醇對照品溶液5μl，棕櫚酸對照品溶液1μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，以己烷－乙醚－冰醋酸（70：30：1）爲展開劑，置內壁貼有展開劑溼潤濾紙的層析缸中，展開，晾乾。噴以硫酸銅溶液，熱風吹乾，在170℃乾燥10分鐘。供試品溶液如顯與對照品溶液對應的雜質斑點，其顏色與對照品溶液的主斑點比較，不得更深。
3.6.3 有關物質
精密稱取本品約0.1g，置25ml量瓶中，用三氯甲烷－甲醇（2：1）溶解並稀釋至刻度，搖勻，作爲供試品溶液。另取磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、溶血磷脂酰膽鹼對照品各適量，用三氯甲烷－甲醇（2：1）溶解並定量稀釋製成每1ml中含上述對照品分別爲20μg、20μg、100μg、100μg的混合溶液，作爲對照品溶液。照磷脂酰膽鹼和磷脂酰乙醇胺含量測定項下的色譜條件，精密量取對照溶液10μl、20μl、30μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以對照品溶液濃度的對數值與相應的峯面積對數值計算迴歸方程；另精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由迴歸方程計算各雜質組分的含量。含磷脂酰肌醇不得過1.0%，含溶血磷脂酰乙醇胺不得過0.5%，含鞘磷脂不得過3.0%，含溶血磷脂酰膽鹼不得過3.5%。
3.6.4 殘留溶劑
3.6.4.1 乙醇與丙酮
取本品約0.2g，精密稱定，置20ml頂空瓶中，精密加入內標溶液（每1ml含0.1mg正己烷的正丙醇溶液）2ml使溶解，密封，作爲供試品溶液；另分別精密稱取乙醇和丙酮適量，用內標溶液稀釋製成每1ml中分別含乙醇0.5mg、丙酮0.5mg的混合溶液，精密量取2ml，置20ml頂空瓶中，密封，作爲對照品溶液。照殘留溶劑測定法（2010年版藥典二部附錄Ⅷ P第二法）試驗。以固定液爲100%聚乙二醇的毛細管柱爲色譜柱，柱溫30℃；檢測器溫度爲250℃；進樣口溫度爲220℃；頂空瓶平衡溫度爲80℃，平衡時間爲45分鐘。取對照品溶液頂空進樣，各色譜峯之間的分離度應符合要求。再取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣，記錄色譜圖。按內標法以峯面積計算，應符合規定。
3.6.5 水分
取本品，照水分測定法（2010年版藥典二部附錄Ⅷ M第一法 A）測定，含水分不得過2.0%。
3.6.6 重金屬
取本品2.0g，緩緩灼燒炭化，加硝酸2ml，小心加熱至幹，加硫酸2ml，加熱至完全炭化，在500～600℃灼燒至完全灰化，放冷，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ H第二法），含重金屬不得過百萬分之五。
3.6.7 砷鹽
取本品1.0g，置凱氏燒瓶中，加硫酸5ml，用小火消化使炭化，控制溫度不超過120℃（必要時可添加硫酸，總量不超過10ml），小心逐滴加入濃過氧化氫溶液，俟反應停止，繼續加熱，並滴加濃過氧化氫溶液至溶液無色，冷卻，加水10ml，蒸發至濃煙發生使除盡過氧化氫，加鹽酸5ml與水適量，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ J第一法），應符合規定（0.0002%）。
3.6.8 微生物限度
取本品，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ J），每1g供試品中除細菌數不得過1000個、黴菌及酵母菌數不得過100個外，還不得檢出大腸埃希菌。
3.7 含量測定
3.7.1 磷
3.7.1.1 對照品溶液的製備
取105℃乾燥至恆重的磷酸二氫鉀約0.13g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，精密量取10ml置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含磷約爲30μg）。
3.7.1.2 供試品溶液的製備
精密稱取本品約0.1g，置坩堝中，加三氯甲烷2ml溶解後，加氧化鋅2g，水浴蒸乾，緩緩熾灼使樣品炭化，然後在600℃熾灼1小時，放冷，加鹽酸溶液（1→2）10ml，煮沸5分鐘使殘渣溶解，用水定量轉移到100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。
3.7.1.3 測定法
精密量取對照品0ml、2ml、4ml、6ml、10ml，分別置25ml量瓶中，依次分別加水10ml、鉬酸銨硫酸溶液（取鉬酸銨5g，加0.5mol/L硫酸溶液100ml使溶解，即得）1ml、對苯二酚硫酸溶液（取對苯二酚0.5g，加0.25mol/L硫酸溶液100ml，使溶解，即得。臨用新制）1ml與50%醋酸鈉溶液3ml，並用水稀釋至刻度，搖勻，放置5分鐘。照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），以第一瓶爲空白，在720nm的波長處測定吸光度，以測得的吸光度與其對應的濃度計算迴歸方程。另精密量取供試品溶液4ml，置25ml量瓶中，照上述方法自“依次分別加水10ml”起，同法測定。由迴歸方程計算，即得。
3.7.2 氮
取本品約0.1g，精密稱定，照氮測定法（2010年版藥典二部附錄Ⅶ D第二法）測定，計算，即得。
3.7.2.1 磷脂酰膽鹼與磷脂酰乙醇胺
照高效液相色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ D）測定。
3.7.2.1.1 色譜條件與系統適用性試驗
用硅膠爲填充劑（色譜柱250mm×4.6mm，5μm），以甲醇－水－冰醋酸－三乙胺（85：15：0.45：0.05）爲流動相A，以正己烷－異丙醇－流動相A（20：48：32）爲流動相B；柱溫爲40℃；流速爲每分鐘1ml，按下表進行梯度洗脫；檢測器爲蒸發光散射檢測器。
時間（分鐘） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0 | 10 | 90 |
20 | 30 | 70 |
35 | 95 | 5 |
36 | 10 | 90 |
41 | 10 | 90 |
取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽鹼、鞘磷脂、溶血磷脂酰膽鹼對照品各適量，用三氯甲烷－甲醇（2：1）溶解並定量稀釋製成每1ml分別含上述對照品爲50μg、100μg、100μg、200μg、200μg、200μg的混合溶液，取上述溶液20μl注入液相色譜儀，各成分按上述順序依次洗脫，各成分峯之間的分離度均應符合規定，理論板數按磷脂酰膽鹼峯與磷脂酰乙醇胺峯計算均應不低於1500。
3.7.2.1.2 測定法
精密稱取磷脂酰乙醇胺與磷脂酰膽鹼對照品各適量，用三氯甲烷－甲醇（2：1）溶解並定量稀釋製成每1ml含磷脂酰膽鹼50μg、100μg、150μg、200μg、300μg、400μg與含磷脂酰乙醇胺5μg、10μg、15μg、20μg、30μg、40μg的溶液作爲對照品溶液。精密量取上述對照溶液各20μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以對照品溶液濃度的對數值與相應的峯面積對數值計算迴歸方程。另精密稱取本品約15mg，置50ml量瓶中，加三氯甲烷－甲醇（2：1）溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。由迴歸方程計算磷脂酰膽鹼與磷脂酰乙醇胺的含量。
3.8 類別
3.9 貯藏
3.10 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版