1 拼音
WS/T 39—1996 niào zhōng liú qíng suān yán de bǐ dìng —bā bǐ tuǒ suān fēn guāng guāng dù cè dìng fāng fǎ
2 英文參考
Urine—Determination of thiocyanate—Pyridine-barbituric acid spectrophotometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 39—1996《尿中硫氰酸鹽的吡啶—巴比妥酸分光光度測定方法》(Urine—Determination of thiocyanate—Pyridine-barbituric acid spectrophotometric method)由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈,自1997年05月01日起實施。
5 3 儀器
3.1 分光光度計,10 mm比色杯。
3.2 吸量管,0.5,2.0,5.0,10.0 mL。
3.3 容量瓶,100 mL。
3.4 硬質玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶,50 mL或100 mL。
3.5 尿比重計。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外,均爲分析純試劑。
4.3 硫氰酸鉀,優級純。
4.4 磷酸鹽緩衝液(pH=7):溶解2.79 g磷酸二氫鉀(KH2PO4)和4.14 g磷酸氫二鈉(Na2HPO4)於少量水中,並稀釋至1L。
4.5 氯胺T溶液,10 g/L。
4.6 吡啶-巴比妥酸溶液:溶解0.18 g巴比妥酸於3 mL吡啶及10 mL鹽酸溶液(4.2)中,用水稀釋至100 mL(臨用前配製)。
4.7 硫氰酸鹽標準溶液:溶解0.1673 g已烘乾的硫氰酸鉀(KSCN)於少量水中,用水稀釋至100 mL,此溶液1 mL=1mg SCN-,存放普通冰箱中,可使用1個月。將此溶液用水分別稀釋爲.(A)1 mL=2μg SCN-和(B)1 mL=10μg SCN-的標準應用液(當日配製)。
4.8 質控樣:用加標的模擬尿、接觸者混合尿或加標的正常人混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 樣品處理
樣品不需處理,直接按6.3條進行測定。
8.2 6.2 標準曲線的繪製。
6.2.1 取7只10 mL比色管,按下表配製標準管。
硫氰酸鹽標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
標準應用液A,mL | 0 | 0 | 0.10 | 0.25 | 0 | 0 | 0 |
標準應用液B,mL | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.10 | 0.15 | 0.20 |
非接觸者尿1),mL | 0 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
SCN-含量,μg | 0 | 0 | 0.2 | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 |
1)選取SCN-濃度低的尿。
6.2.2 分別加入2 mL緩衝液(4.4),混勻,加入0.2 mL氯胺T溶液,立即蓋塞,混勻。放置5 min,加入2 mL吡啶-巴比妥酸溶液,混勻,於室溫低於25℃時,置於25℃恆溫箱中放置20 min,加水至5 mL,混勻。于波長580 nm處,用10 mm比色杯,以試劑空白(0號管)爲參比,測量吸光度。
6.2.3 將2~6號管的吸光度減去1號管的吸光度,以SCN含量爲橫座標,吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
8.3 6.3 樣品測定
6.3.1 吸取0.1 mL新鮮尿樣於10 mL比色管中。
6.3.2 按6.2.2條操作,測量吸光度,從標準曲線上查出硫氰酸鹽的含量。在測定前後及每測定10個樣品後,測定一次質控樣。
9 7 計算
7.1 按式(1)計算尿樣換算成標準比重(1.020)下的濃度校正係數k。
7.2 按式(2)計算尿中硫氰酸鹽的濃度。
式中:X——尿中硫氰酸鹽的濃度,mg/L;
m——由標準曲線上查得的硫氰酸鹽含量,μg;
V——分析時所取尿樣體積,mL。
10 8 說明
8.1 本法檢測限爲1 mg/L(空白值的3倍標準差),測定範圍0.1~2.0μg,精密度:CV=3.25%~6.73% (SCN-含量爲0.2,0.5,1.0,1.5,2.0μg,n=6);準確度:接觸氰化物工人尿樣加標回收率爲97.1%~99.8%(加標量爲0.2,0.5,1.0μg,n=6)。
8.2 本法測定的尿樣必須是新鮮的,放4℃冰箱第二天後測定結果偏低。故取班後一次尿樣,4h內進行測定,夏季運輸時最好冷藏。
8.3 顯色溫度應保持在25℃以上。吡啶-巴比妥酸溶液應於臨用前配製,放置時間過長會影響吸光度。
8.4 氰化物進入人體後,大部分與體內的硫結合爲SCN-,從尿中排出,一小部分仍以CN-的形式排出。CN-也同樣顯色,故測出的結果是CN-和SCN-的總量。
8.5 質控樣選加標的模擬尿時可考查準確度和精密度。選用接觸者尿或加標正常尿時可考查精密度。但人尿不易久存。模擬尿只含人尿中的大量成分。