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siRNA的製備
...許多國外公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成siRNA。主要的缺點包括價格高,定製週期長,特別是有特殊需求的。由於價格比其他方法高,爲一個基因合成3—4對siRNAs的成本就更高了,比較常見的做法是用其他方法篩...
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siRNAs在基因治療中的應用
...用而創造出新的治療性藥物.小干擾RNAs(smallinterferingRNAs,siRNAs)最有可能成爲這類藥物中的新成員.本文將從siRNAs的沉默機制、基因沉默效率、表達載體,siRNAs在活體內的應用以及作爲可能的治療性藥物等方面,探討其應用於臨牀...
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siRNA治療研究異彩紛呈(中)
...最具挑戰性的障礙。動物實驗採用的是無添加的劑型(裸siRNA)或作爲共軛、脂質體/陽離子脂質體複合物或與肽、聚合物或抗體複合物的修飾小分子干擾核糖核酸(siRNA)。局部、直接運送siRNA在一些組織部位已經得到闡明,但si...
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siRNA實驗成功要點
1.對每個基因設計並檢測兩到四個siRNA序列 爲了找到潛在靶位點,掃描靶基因中的AA序列。記錄每個AA3’端19個核苷酸作爲潛在siRNA靶位點。潛在靶位點需通過GENBANK數據庫的BLAST分析,去除那些與其它基因明顯同源的靶位點。...
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用RNaseIII消化長片斷雙鏈RNA製備siRNA庫
其他製備siRNA的方法都需要設計和檢驗多個siRNA序列以便找到一個最有效的siRNA。而用RNaseIII降解長片斷雙鏈RNA成爲siRNAs庫就象製備一份混合有各種siRNAs“混合雞尾酒”,RNaseIII的完全降解產物(12—15bp)同樣可以誘導專一的基因...
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RNA干擾技術在哺乳動物中的應用
...細胞中,RNAi由21~23個核苷酸組成的雙鏈RNA引發.小干擾RNA(siRNA)可以在體外合成或通過表達載體在哺乳動物細胞內合成.由於RNAi技術具有快速、簡單和特異性強等特點,在基因功能研究、抗病毒治療和抗腫瘤治療等方面有廣泛的應用...
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新型siRNA候選藥物顯示強烈免疫應答
遺傳物質合成的小片段——小干擾RNA(smallinterferingRNA,siRNA)可以阻斷異常蛋白的產生,然而siRNA候選藥物能同時誘發機體產生強烈的免疫反應,造成毒副作用。2009年第2期Oligonucleotides上的一篇綜述文章就siRNA如何激活免疫反應,如...
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《自然》子刊:辨別力高的siRNA
...基因的相似變異體的高度特異性的小干擾RNAs。小干擾RNAs(siRNAs)是一些能夠減少目標mRNAs表達的微小RNAs。近年來,生物學家已經把siRNAs作爲一種重要的工具。siRNAs也具有臨牀治療的潛在意義,它可以作爲藥物用於減少致病突變基...
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siRNA研究新進展
...日在線版)上有篇小RNA研究內容頗爲引人注目,提出次級siRNAs(secondarysiRNAs,又稱傳遞RNAi)是一種特殊的小RNAs羣體。來自荷蘭皇家科學院(HubrechtLaboratory,NIOB-KNAW)的研究人員從可以表達一個單22核苷酸的初級siRNA(primarysiRNA)...
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siRNA治療研究異彩紛呈
...實際應用,則還需要克服現實中的種種困難。 ■siRNAs治療被看好 RNAi途徑是通過小RNAs,包括小的干擾性RNA(siRNAs)和微小干擾RNA(miRNAs)引導的。基因沉默可以由siRNA通過信使RNA(mRNA)順序特異性分裂誘導,而miRNAs...
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新型siRNAs能夠區分基因變異體
...使得它能夠區分出同一基因的相似變異體。小型干擾RNAs(siRNAs)是那些能夠減少目標mRNAs表達的小型RNAs。近來,生物學家已經把siRNAs作爲一種重要的工具投入到應用中。siRNAs也具有臨牀治療的潛在意義,它可以作爲治療劑用於減少...
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抗擊腫瘤和病毒的新策略
...和病毒感染。”他說:“我們通過合成小的干擾RNA(siRNA),可以用來開發藥物治療病毒感染和癌症。現在我們研究的更加深入,已經知道對不同的細胞培養物要合成不同的siRNA來治療不同的疾病。”先前的研究顯示siRNA...
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四川大學最新文章發表siRNA新方法
...duBiologicalProducts)的研究人員通過構建質粒pAd-hTR證明了hTRsiRNA在HeLa細胞系中有效和特異的端粒酶的敲除,從而指出了這種siRNA表達重組腺病毒系統在癌症基因治療方面的前景。這一研究成果公佈在《CancerGeneTherapy》雜誌上。領導...
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Nature子刊破解siRNAs技術難題
由於短干擾RNA(ShortinterferingRNAs,siRNAs)具有沉默致病基因的潛力,其成爲了目前許多研究的主題。然而,要有效地發揮治療效應,必須首先讓細胞攝取siRNAs,使其進入到細胞溶質(cytosol)中——這對於研究人員而言是一個重大...
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hTERT-siRNA及hTR-siRNA的合成及對Hut78細胞端粒酶活性的影響
...成端粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因及端粒酶RNA(hTR)的小干擾RNA(siRNA)對皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)細胞株Hut78端粒酶活性的影響,研究者採用體外轉錄法分別合成兩條hTERT-siRNA及hTR-siRNA。採用siRNA直接處理細胞裂解液及磷酸鈣共沉澱法將siRNA轉...
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RNA干擾技術在抗病毒性疾病中的應用
...先在Dicer酶的降解下形成21~23核苷酸長度的小干擾RNAs(siRNAs),每個siRNA的3‘端都有2個鹼基突出。在RNAi效應階段,siRNA結合到核糖核苷酸酶複合物上形成RNA誘導的基因沉默複合體(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)。該複合體依賴ATP...
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siRNA的轉染
將製備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種: 1.磷酸鈣共沉澱 將氯化鈣,RNA(或DNA)和磷酸緩衝液混合,沉澱形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA複合物粘附到細胞膜並...
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RNAi技術突破:siRNA體內傳遞機制
...遞進脊椎動物的時候出現了許多問題。尤其是小RNAs,即siRNAs(smallinterferingRNAs),在動物操作中十分困難。雖然利用不同的方法,比如高壓噴射(high-pressureinjections)或者膽固醇協力,可能可以成功傳遞siRNAs,但是其機制至今並...
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化學合成siRNA
在較早的哺乳動物RNAi實驗中,siRNAs是通過化學方法合成的,就像合成引物一樣,是應用起來最方便的一種方法,研究人員幾乎不需要做什麼工作。但是RNA合成成本高,定製週期長,特別是有特殊需求的RNA序列。由於價格比其他...
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過程工程所構建小核酸藥物輸遞系統
...核酸藥物對腫瘤具有很好的治療作用,但是小核酸藥物(siRNA)由21-25個核苷酸組成,其電荷密度較低,且爲剛性骨架,使其包載率較低;要提高小核酸藥物的包載率,將使用大量帶正電的材料,其對機體會產生明顯的毒副作用...
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體外轉錄合成siRNAs
體外轉錄合成siRNAs,其成本相對化學合成法比較低,是一種相對性價比高的篩選siRNAs的好方法,而且要比化學合成法更快的得到siRNAs。一旦得到DNA雙鏈模版(這個還是需要DNA合成的,不過DNA合成的成本就比較低了),只要24小時...
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針對Bcl-2的siRNAs可以抑制胰腺癌生長
...國的一項研究結果顯示:針對bcl-2基因設計的小干擾RNAs(SiRNA)可有效抑制胰腺癌的生長。結果發表在9月份的《Gut》(Gut2005;54:1215-1216,1298-1308)雜誌上。Bcl-2是一種抗凋亡基因,在大多數前列腺癌中過表達,已經由研究結果顯示...
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RNAi技術在醫學上的應用研究進展
...的mRNA降解,達到阻止基因表達的目的[1]。人工合成的siRNA(smallinterferingRNA,小分子的干涉RNA)是長度爲21~25個核苷酸大小的小RNA分子,它可以與RISC共同發揮作用,使沉默複合物識別靶目標。目前研究表明,在許多生物體中...
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Bioneer確保第二代癌症遺傳子治療劑的本原高新技術
...已經結束的知識經濟部所試行的‘利用目標定向傳達體的siRNA開發癌症遺傳子治療劑‘課題的第一階段,並簽署了第二階段的協議。Bioneer在第二階段事業中,通過siRNA的大量生產,爲了全臨牀選定了新藥候補物質。爲確保目標定...
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留美博士研究siRNA可防治非典
...最新研究成果:中美研究人員發現兩種小型干擾核糖核酸siRNA,可以降低猴子體內的非典病毒含量並預防再次感染。 猴子實驗 研究小組在實驗對比中,共使用5組猴子,每組4只,所選猴子全部爲短尾猿。其中兩組猴子不接受...
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中國首個siRNA高通量篩查中心即將建立
...iochip公司(SBC)作爲首要合作伙伴,爲SBC提供各種小干擾RNA(siRNA)庫。SBC將使用此siRNA庫建立中國首個siRNA高通量篩查中心。siRNAs是合成RNA分子,具有通過調節蛋白形成而“開放”和“關閉”基因的能力(即RNA干擾RNAi)。siRNAs用於功能...
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siRNA表達載體
多數的siRNA表達載體依賴RNA聚合酶III啓動子(polIII)中的一種,操縱一段45—50nt的髮夾結構RNA(smallhairpinRNA,shRNA)在哺乳動物細胞中的表達,shRNA在細胞內會自動被加工成爲siRNA,從而引發基因沉默或者表達抑制。這一類啓動子包括大...
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RNA干擾靶向抑制胃癌SGC7901細胞COX2基因和蛋白表達的研究
...和轉移提供基因治療的新方法。方法設計併合成6條COX2siRNA和1條陰性對照siRNA,用3種不同的轉染試劑分別轉染胃癌SGC7901細胞,熒光定量PCR和Westernblotting檢測胃癌SGC7901細胞中COX2基因和蛋白的表達。結果TOPtranfection能夠有效介...
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脯氨酸羥化酶2siRNA對抗黴素誘導腎小管上皮細胞凋亡的影響
...l.22No.11P.673-67615(西安)爲了探討是否脯氨酸羥化酶2(PHD2)siRNA通過減少缺氧誘導因子(HIF)1的降解而減輕缺氧引起的腎小管上皮細胞凋亡。研究者構建針對人PHD2的表達質粒,將其轉染到培養的人腎小管上皮細胞系(HKC)中。用RT-PCR方...
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將siRNA傳遞到中樞神經系統
...ly製藥公司和Hanyang大學的研究人員發表的最新文章證實,siRNA(小干擾RNA)能夠通過血腦障壁到達中樞神經系統。在神經疾病治療過程中的一個主要障礙是血腦障壁的存在,這道屏障使治療性分子無法從血液進入大腦。在這項新...