4 尿TH蛋白的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿TH蛋白的測定原理
未標記的THP和一定量的125I-THP與有限量的抗-THP抗體進行競爭性免疫反應,即抗體與125I-THP結合的量受未標記THP所抑制,若未標記THP量少,則抗體與125I-THP結合量就多,反之抗體與125I-THP結合量就少。反應平衡後,分離結合部分(B)與遊離部分(F),測定結合部分的放射性計數(cpm),計算各標準樣品的結合百分率B/B0,以標準濃度爲橫座標,B/B0爲縱座標,做標準曲線,根據待測標本的B/B0,即可從曲線上查出標本中的THP含量。
4.5 試劑
(1)緩衝液:2瓶(液體)
每瓶用40ml蒸餾水稀釋。
(2)THP標準:6瓶(凍幹品)
每瓶準確地加2.0ml稀釋後的緩衝液溶解,濃度分別是31.25、62.5、125、250、500、1000ng/ml。
(3)125I-THP:1瓶(凍幹品)
(4)抗THP血清:1瓶(凍幹品)
(5)固相二抗:2瓶(液體)
用前搖勻,嚴禁冰凍。
4.6 操作方法
取圓底聚苯乙烯試管若干(注意不要用平底試管,以免沉澱不集中),編號後按表1加樣。
任取三管測總放射性計數(cpm)均值爲T。
3500r/min離心分離15min,棄上清,測沉澱放射性計數(cpm)。
4.7 正常值
(36.86±7.08)mg/24h尿(酶聯免疫吸附測定法)。
4.8 化驗結果臨牀意義
4.9 附註
(1)靈敏度:10ng/ml
(2)測定範圍:31.25~1000ng/ml
(3)有效期:測定盒內全部試劑溶解前4℃貯存,有效期爲1個月。
注意:固相二抗嚴禁冰凍。
(4)抗血清的特異性:與β2-MG交叉反應1%;與Alb交叉反應0.2%。