3 概述
纖維連接蛋白(FN)主要由纖維母細胞和血管上皮細胞產生,存在於體液、結締組織和細胞表面,是維持機體完整性和防禦功能的重要物質。區別惡性腹腔積液與肝硬化腹腔積腹腔積液的準確性可達100%。如腹腔積液FN超過5mg/L,可高度懷疑爲惡性積液。
4 積液纖維結合蛋白的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 積液纖維結合蛋白的測定原理
ELISA的原理是基於抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學活性,抗原或抗體的酶結合物既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成抗原抗體複合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化爲有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高,故可極大地放大反應的結果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
4.4 試劑
ELISA的主要試劑爲固相的抗原或抗體,酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關聯的酶反應底物。這些試劑的製備比較複雜,在臨牀檢驗中均採用商品的試劑盒,其中配有該項測定中所需的全部試劑,但國內某些商品中僅提供主要試劑,操作者需自作固相的包被和一些溶液的配製。目前國內常用的ELISA檢驗主要是以辣根過氧化物酶(HRP)爲標記物的微孔板法,本文以此法爲主,敘述其技術要點。
完整的ELISA試劑盒應包含以下各組分;①已包被抗原或抗體的固相載體。②酶標記的抗原或抗體(結合物)。③酶的底物。④陰性對照和陽性對照(定性測定),參考標準和控制血清(定量測定)。⑤結合物及標本的稀釋液。⑥洗滌液。⑦酶反應終止液。
4.5 操作方法
使用ELISA操作法。
4.6 正常值
5mg/L。
4.7 化驗結果臨牀意義
FN對癌性腹水的診斷價值較大,癌性腹水FN爲173.9±65.9mg/L,非癌性腹水爲13.4±6.8mg/L,腹水FN>75mg/L可高度懷疑癌性腹水,認爲腫瘤細胞可合成和分泌FN。
4.8 附註
(1)標本採集後,如不能及時檢測,最好立即分離漿液保存。溶血和脂類標本影響實驗結果。
(2)按試劑盒介紹要求,稀釋或配製試驗中的試劑,需要加樣、保溫、洗滌、比色等均按嚴格要求,準確操作。