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廣州生物院首次研製出穩定攜帶報告基因的複製型流感病毒
...edinneuraminidasesegment。該成果首次報告成功研製了穩定攜帶報告基因的複製型甲型流感病毒。近年來,流感病毒的流行以及快速變異對人類健康提出了嚴峻的挑戰,因此流感病毒的致病機理亟待進一步闡明,人類也迫切需要更爲安...
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新複製型流感病毒可完整保留其基因組
...ortergeneharboredinneuraminidasesegment,首次成功研製了穩定攜帶報告基因的複製型甲型流感病毒。流感病毒的流行以及快速變異已經對人類健康提出了嚴峻挑戰,流感病毒的致病機理亟待進一步闡明,人類也迫切需要更爲安全有效的新...
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HLA-B27啓動子熒光素酶報告基因載體的構建及其在Hela細胞的轉錄調控研究
...病學雜誌》2007年第11卷第8期中國研究者構建了熒光素酶報告基因(luc)與HLA-B27啓動子融合蛋白哺乳動物細胞表達載體,觀察其在Hela細胞的表達調控。研究者克隆出HLA-B27啓動子序列(432bp),構建pGL4.14/B27pro-luc融合蛋白表達...
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酵母雙雜交體系的新發展
...用就可以將BD和AD在空間結構上重新聯結爲一個整體而與報告基因的上游激活序列(upstreamactivationsequence)結合,進而發揮激活轉錄的功能,使受調控的報告基因得到表達。根據這一原理,雙雜交系統通過簡便的酵母遺傳分析對報...
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陳凌研究組2011發多篇文章解析病毒
...另外一篇文章中,研究人員首次報告成功研製了穩定攜帶報告基因的複製型甲型流感病毒。這一突破性研究成果不但爲流感病毒的基礎研究,也爲流感疫苗、抗流感病毒藥物和抗體的研發提供了強有力的工具,相關報道公佈在著...
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上海巴斯德所腫瘤皰疹病毒週期調控研究獲進展
...生林先志等在藍柯研究員指導下,通過構建含RTA3’UTR的報告基因,對所有KSHV編碼的pre-miRNA表達質粒進行篩選,發現KSHV編碼的多個miRNA能夠下調報告基因的表達。其中miR-K12-9和miR-K12-7對報告基因的下調在不同細胞系中重複驗證。R...
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Nature新聞:尋找癌症“狙擊手”
...因與癌症存在關聯,但是這種基因更多的是作爲一種衰老報告基因。很早以前,科學家們就已經發現p16ink4a(p16)基因能夠激活一種重要的腫瘤抵抗機制:細胞衰老,從而在衰老和癌症抑制方面發揮作用。隨着細胞年齡的增長,DNA...
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NCLs致病相關基因CLN8酵母雙雜交誘餌質粒的構建及自激活作用的檢測
...細胞EGY48中,β-半乳糖苷酶濾膜分析檢測重組誘餌質粒對報告基因LacZ的自激活情況。結果擴增出目的基因片段,成功構建了重組誘餌質粒plexA-cln8,經酶切和測序鑑定正確;重組誘餌質粒無自發激活報告基因功能。結論重組誘餌質...
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應用LacZ報告系統研究白念珠菌HYR1基因的啓動子活性
...相關的啓動子片段。方法採用PCR、基因重組、酵母轉化和報告基因測活,比較不同HYR1基因上游1800bp內不同片段的啓動子活性。結果-400~-200bp區域存在啓動調控活性,其他區域未見相關的啓動活性。結論在HYR1基因上游-400~-200bp間存...
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短脈衝超聲波促進腫瘤基因治療
...脈衝HIFU處理小鼠中的腫瘤,然後迅速將一種易於測量的報告基因注射進它們尾巴的靜脈中。這種報告基因是一種存在於深海無脊椎動物中的綠色熒光蛋白,它能在被脈衝HIFU照射過的腫瘤的所有部分中看到。但是沒有用脈衝HIFU處...
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microRNA在心臟細胞生長及分化過程中的作用
...miRNAs十分困難,所以研究人員利用了一個可以產生藍點的報告基因來便於定位miRNAs。他們將報告基因接到miR-1-1的前端,結果發現在胚胎期小鼠的心臟和肌肉中都發現有報告基因的表達,並且這種表達受到幾個心臟和肌肉關鍵轉...
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北大汪南平教授闡釋miRNA的新功能
...9a的細胞系。多項分析表明,miR-19a的穩定轉染顯著減低了報告基因(此報告基因被cyclinD1基因的3’端非翻譯保守區所控制)的表達以及cyclinD1的蛋白水平,使細胞週期停滯在G1/S期。當內源miR-19a被抑制後,這種抑制作用減弱。這...
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瘧原蟲基因轉染的研究進展
...暫表達。 短暫轉染常用於基因調控的快速分析,通過報告基因的轉錄表達即可分析調控基因在基因表達調控中的確切作用。但在很多方面的研究和應用中穩定轉染是必需的。 1.2穩定轉染 與短暫轉染不同,穩定轉染(...
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細胞因子對小鼠α2(I)型前膠原基因啓動子活性影響的研究①
...子(-2kb~+54bp)爲靶序列,將它與氯黴素乙酰基轉移酶(CAT)報告基因組成的重組體pAZ1009用脂質體法轉染至膠原產生細胞NIH/3T3細胞,討論IFNα、IFNγ、TNFα對小鼠α2(I)型前膠原基因上游啓動子活性的影響。結果:TNFα抑制小鼠α2(I)型...
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抗纖複方及TGF-β對膠原基因啓動子活性的影響①
...kb啓動片段爲研究靶序列,以氯黴素乙酰基轉移酶(CAT)作報告基因,應用基因轉染技術研究小鼠膠原啓動子活性。結果:TGF-β可促進小鼠前膠原α2(Ⅰ)基因啓動序列的啓動活性,而中藥抗纖複方可明顯抑制其啓動活性。結論:TGF-...
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乙型肝炎病毒前S蛋白作爲“餌”載體的構建及表達
...一個完整的有活性的轉錄因子,激活由DNA-BD結合的UAS下游報告基因的轉錄表達。因此,可通過報告基因是否被轉錄來研究兩蛋白間的相互作用。酵母雙雜合系統屬於體內實驗,完全模擬體內環境下的兩個蛋白間相互作用。體內反...
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北大接連發表Nature,PNAS文章
...9a的細胞系。多項分析表明,miR-19a的穩定轉染顯著減低了報告基因(此報告基因被cyclinD1基因的3’端非翻譯保守區所控制)的表達以及cyclinD1的蛋白水平,使細胞週期停滯在G1/S期。當內源miR-19a被抑制後,這種抑制作用減弱。這...
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硅納米顆粒在植物轉基因上的應用
...。 FrancoisTorney和他的同事利用該技術將綠色熒光蛋白報告基因分別轉入了菸草和玉米細胞中,雌二醇作爲誘導物被同時轉入,另設不轉雌二醇誘導物的對照。研究發現,在不用金粉覆蓋硅顆粒的情況下,由於雌二醇釋放從而...
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構建可誘導性真核表達載體爲觀察腫瘤奠定基礎
...,是目前基因治療研究中的重要課題,而選擇一種理想的報告基因和標記基因是解決此問題的關鍵。源於維多利亞水母的GFP是新近發現的一種報告基因。GFP由238個氨基酸組成,它們在各種真核細胞中都可作爲定位各種蛋白質的標...
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利用熒光噬菌體開發出更快速簡便的檢測結核病方法
...和更簡便的檢測方法。熒光噬菌體(fluorophage)是攜帶熒光報告基因的細菌病毒。研究人員利用該噬菌體去感染從病人肺部咳出的含有結核菌素(tuberculin)唾液中的分枝桿菌。幾個小時之內,被感染的細菌表達報告基因而且發出的熒...
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中科院昆明動物所:發現人類大腦中存在特有基因剪切體
...異表達的剪切體。通過物種間的序列比較分析和細胞水平報告基因的實驗,他們發現在人類neuropsin基因內涵子中的一個點突變導致了新的剪切體的產生。將黑猩猩 neurospin基因的相應位置突變爲人類的序列後,黑猩猩的基因在報...
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我國自主研發出三維光學成像平臺
...體層攝影(BLT)和三維重建平臺引人注目。 BLT是新型報告基因光學成像手段,臨牀前研究證實,BLT可以監測體內多種生理及病理過程,並在藥物研發、疾病早期診斷和治療監測方面具有很大的應用潛力。目前該團隊劉俊廷博...
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昆明動物所發現人類大腦特有的基因剪切體
...異表達的剪切體。通過物種間的序列比較分析和細胞水平報告基因的實驗,他們發現在人類neuropsin基因內涵子中的一個點突變導致了新的剪切體的產生。他們將黑猩猩neurospin基因的相應位置突變爲人類的序列後,黑猩猩的基因在...
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進化信息照亮了果蠅Toll通路配體蛋白功能表面
...聚體頭部的色氨酸環區。運用進化指導的定點突變策略和報告基因系統,科研人員證實了一些印跡殘基及其鄰位氨基酸的突變能夠顯著降低Drosomycin啓動子的活性,其中色氨酸環區的突變幾乎完全阻斷了報告基因的表達,表明該...
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我科學家用CRISPR製備基因敲入豬
...員通過CRISPR/Cas9介導的基因組編輯,製備了攜帶Oct4-tdTomato報告基因的基因敲入豬。中科院廣州生物醫藥與健康研究院的賴良學、QingjianZou和雲南農業大學的曾養志教授是本文共同通訊作者。轉基因豬在農業和生物醫藥方面都有着...
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綠色熒光蛋白高表達動物模型的建立及在活體成像中的應用*
...白(greenfluorescentprotein,GFP)基因是光學分子成像最常用的報告基因,利用它標記Lewis肺癌移植瘤國際尚未見有報道,本研究建立荷GFP基因標記的小鼠Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)移植瘤裸鼠模型,應用自行研製的熒光成像儀進行...
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劉曉:單細胞表達譜不同維度感受基因的精彩
...表達的分析嗎?劉曉:我們是用一種紅色熒光蛋白(cherry)報告基因來測量基因啓動子的活性。所以更確切的說我們獲得的是啓動子的轉錄圖譜,不涉及轉錄後的調控。已測量的93個基因都編碼蛋白質,其中60個是轉錄因子。我們下...
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hNaDC1基因5’側翼區轉錄調控序列系列載體構建與鑑定
...建hNaDC1基因5’側翼區轉錄調控序列系列螢火蟲熒光素酶報告基因表達載體。方法PCR擴增獲得hNaDC1基因5’側翼轉錄調控區不同長度片段:hNaDC1A(-2232/+136,2368bp)、hNaDC1B(-1640/+136,1776bp)、hNaDC1C(-1084/+136,1221bp)、hNaDC1D(-253/+...
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RNA干擾靶向抑制胃癌SGC7901細胞COX2基因和蛋白表達的研究
...中COX2基因和蛋白的表達。結果TOPtranfection能夠有效介導報告基因DNA(pcDNA/lacZ)轉染SGC7901細胞,細胞轉染率爲56.0%,明顯優於其它兩種轉染試劑,轉染的pcDNA/lacZsiRNA對報告基因產生顯著抑制;TOPtranfection介導的COX2siRNA有效抑...
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siRNA表達載體
...C2C12細胞中,用長鏈具有髮卡結構的雙鏈RNA有效的阻斷了報告基因的表達,在穩定表達具有髮卡結構的雙鏈RNA的細胞株中,報告基因的表達被長期的阻斷了。帶有抗生素標記的載體可以在細胞中持續抑制靶基因的表達,持續數星...